| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-24页 |
| 1.1 辣椒概况 | 第11-17页 |
| 1.1.1 辣椒和辣椒素简介 | 第11-13页 |
| 1.1.2 辣椒素生物合成及基因调控 | 第13-17页 |
| 1.2 启动子概述 | 第17-21页 |
| 1.2.1 植物基因启动子简介 | 第17页 |
| 1.2.2 植物启动子的类型 | 第17-20页 |
| 1.2.3 启动子功能研究方法 | 第20-21页 |
| 1.3 茉莉酸类物质 | 第21-23页 |
| 1.3.1 茉莉酸类物质的生物学功能 | 第21-22页 |
| 1.3.2 茉莉酸与植物次生代谢产物 | 第22-23页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第2章 辣椒素合成酶 CS 基因启动子克隆 | 第24-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌种与载体 | 第24页 |
| 2.1.3 药品试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.4 仪器 | 第26页 |
| 2.1.5 试剂与培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.2 CS 基因启动子区域序列克隆及测序 | 第27-33页 |
| 2.2.1 辣椒总 DNA 的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.2 CS 基因启动子引物设计 | 第28页 |
| 2.2.3 CS 基因启动子区域克隆 | 第28-33页 |
| 2.3 CS 基因启动子序列的在线预测分析 | 第33页 |
| 2.4 结果与分析 | 第33-38页 |
| 2.4.1 辣椒总 DNA 的提取 | 第33页 |
| 2.4.2 CS 基因启动子 PCR 扩增 | 第33-34页 |
| 2.4.3 CS 基因启动子克隆测序 | 第34-35页 |
| 2.4.4 CS 基因启动子序列的在线预测分析 | 第35-38页 |
| 第3章 CSPRO 系列缺失表达载体的构建及遗传转化 | 第38-63页 |
| 3.1 CSPRO1351 植物表达载体的构建及遗传转化 | 第38-44页 |
| 3.1.1 植物表达载体 pCA-CSPRO1351 的构建 | 第38-40页 |
| 3.1.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第40-42页 |
| 3.1.3 转化阳性拟南芥植株的鉴定及 GUS 染色分析 | 第42-44页 |
| 3.2 缺失 MeJA 元件 CSPRO906 表达载体的构建及遗传转化 | 第44-48页 |
| 3.2.1 缺失引物的设计 | 第44页 |
| 3.2.2 缺失 MeJA 元件 CSPRO906 的克隆 | 第44-45页 |
| 3.2.3 缺失 MeJA 元件 CSPRO906 表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.2.4 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第47-48页 |
| 3.3 缺失 MYB 结合位点 CSPRO841 表达载体的构建及遗传转化 | 第48-52页 |
| 3.3.1 缺失引物的设计 | 第48页 |
| 3.3.2 缺失 MYB 结合位点 CSPRO841 的克隆 | 第48-49页 |
| 3.3.3 缺失 MYB 结合位点 CSPRO841 表达载体的构建 | 第49-51页 |
| 3.3.4 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第51-52页 |
| 3.4 结果与分析 | 第52-63页 |
| 3.4.1 pCA-CSPRO1351 植物表达载体构建及 GUS 表达鉴定 | 第52-58页 |
| 3.4.2 pCA-CSPRO906 植物表达载体的构建 | 第58-60页 |
| 3.4.3 pCA-CSPRO841 植物表达载体的构建 | 第60-63页 |
| 第4章 CSPRO 中顺式作用元件点突变及功能分析 | 第63-91页 |
| 4.1 MeJA 顺式作用元件点突变 | 第63-68页 |
| 4.1.1 MeJA 突变引物和对应引物的设计 | 第63页 |
| 4.1.2 MeJA 突变反应 | 第63-64页 |
| 4.1.3 pGM-CSPROmutant（简称 m）MeJA 菌液 PCR 鉴定 | 第64页 |
| 4.1.4 pGM-CSPROmMeJA 突变位点的验证 | 第64-65页 |
| 4.1.5 pCA-CSPROmMeJA 表达载体的构建 | 第65-67页 |
| 4.1.6 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第67页 |
| 4.1.7 转化阳性拟南芥植株的鉴定及 GUS 染色分析 | 第67-68页 |
| 4.2 MYB 结合位点点突变 | 第68-73页 |
| 4.2.1 MYB 突变引物和对应引物的设计 | 第68-69页 |
| 4.2.2 MYB 突变反应 | 第69页 |
| 4.2.3 pGM-CSPROmMYB 菌液 PCR 鉴定 | 第69页 |
| 4.2.4 pGM-CSPROmMYB 突变位点的验证 | 第69页 |
| 4.2.5 pCA-CSPROmMYB 功能表达载体的构建 | 第69-71页 |
| 4.2.6 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第71-72页 |
| 4.2.7 转化阳性拟南芥植株的鉴定及 GUS 染色分析 | 第72-73页 |
| 4.3 MeJA 顺式作用元件与 MYB 结合位点共同点突变 | 第73-74页 |
| 4.3.1 突变策略 | 第73页 |
| 4.3.2 突变反应 | 第73页 |
| 4.3.3 pGM-CSPROmMeJAmMYB 菌液 PCR 鉴定 | 第73页 |
| 4.3.4 pGM-CSPROtMeJAtMYB 突变位点的验证 | 第73-74页 |
| 4.3.5 pCA-CSPROmMeJAmMYB 功能表达载体的构建 | 第74页 |
| 4.3.6 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第74页 |
| 4.3.7 转化阳性拟南芥植株的鉴定及 GUS 染色分析 | 第74页 |
| 4.4 结果与分析 | 第74-91页 |
| 4.4.1 MeJA 顺式作用元件点突变及功能验证 | 第74-83页 |
| 4.4.2 MYB 结合位点点突变及植物表达载体的构建 | 第83-86页 |
| 4.4.3 MeJA 顺式作用元件与 MYB 结合位点共同点突变 | 第86-91页 |
| 第5章 讨论 | 第91-94页 |
| 5.1 CSPRO 启动子序列生物信息分析与预测 | 第91页 |
| 5.2 素和环境因子对辣椒素合成调控 | 第91-92页 |
| 5.3 CSPRO 启动子对外源茉莉酸甲酯的响应 | 第92-94页 |
| 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-103页 |
| 作者简介及科研成果 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
