| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 丙酮酸激酶的历史和现状 | 第10-38页 |
| ·糖酵解 | 第10-11页 |
| ·丙酮酸激酶 | 第11-14页 |
| ·丙酮酸激酶的结构 | 第14-17页 |
| ·活性部位 | 第15页 |
| ·活化离子结合部位 | 第15-16页 |
| ·ADP结合部位 | 第16-17页 |
| ·PEP结合部位 | 第17页 |
| ·Phe结合部位 | 第17页 |
| ·丙酮酸激酶的研究现状 | 第17-21页 |
| ·活化离子对兔肌丙酮酸激酶结构和构象的影响 | 第17-19页 |
| ·底物对兔肌丙酮酸激酶结构和构象的影响 | 第19页 |
| ·抑制剂对兔肌丙酮酸激酶结构和构象的影响 | 第19-20页 |
| ·温度对兔肌丙酮酸激酶结构和构象的影响 | 第20-21页 |
| ·盐酸胍对丙酮酸激酶结构的影响 | 第21页 |
| ·本研究采用的研究技术 | 第21-25页 |
| ·内源荧光和ANS荧光技术 | 第21-22页 |
| ·丙烯酰胺荧光淬灭技术 | 第22-24页 |
| ·等温滴定量热技术 | 第24-25页 |
| ·研究的目的和意义 | 第25-28页 |
| 参考文献 | 第28-38页 |
| 第二章 丙酮酸激酶在活化离子和底物诱导下的构象变化 | 第38-61页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·丙酮酸激酶的准备 | 第39页 |
| ·丙酮酸激酶的活性测定 | 第39-40页 |
| ·丙酮酸激酶的圆二色谱测定 | 第40页 |
| ·丙酮酸激酶的荧光光谱学分析 | 第40-41页 |
| ·丙酮酸激酶的丙烯酰胺荧光淬灭 | 第41页 |
| ·GdnHCl对丙酮酸激酶的荧光强度和园二色谱值影响 | 第41-42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-57页 |
| ·丙酮酸激酶的准备 | 第42页 |
| ·丙酮酸激酶的活性 | 第42-43页 |
| ·活化离子、底物和抑制剂对丙酮酸激酶的影响 | 第43-51页 |
| ·温度对丙酮酸激酶的影响 | 第51-54页 |
| ·GdnHCl对丙酮酸激酶的影响 | 第54-57页 |
| ·本章小结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 第三章 丙酮酸激酶的热力学研究 | 第61-73页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·实验材料 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·实验仪器 | 第61页 |
| ·实验方案 | 第61-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-71页 |
| ·ADP滴定PEP和丙酮酸激酶 | 第62-64页 |
| ·ADP滴定PEP、丙酮酸激酶和KCl | 第64-65页 |
| ·ADP滴定PEP、丙酮酸激酶和MgSO_4 | 第65-67页 |
| ·ADP滴定PEP、丙酮酸激酶、KCl和MgSO_4 | 第67-69页 |
| ·PEP滴定ADP、丙酮酸激酶、KCl和MgSO_4 | 第69-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-73页 |
| 第四章 蛋白磷酸化酶的调控机理研究 | 第73-86页 |
| ·引言 | 第73-75页 |
| ·实验设计与实验材料 | 第75-76页 |
| ·实验设计 | 第75-76页 |
| ·实验试剂 | 第76页 |
| ·实验仪器 | 第76页 |
| ·实验方法 | 第76-79页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第76页 |
| ·质粒转化 | 第76-77页 |
| ·蛋白的预表达 | 第77页 |
| ·蛋白的大量表达 | 第77-78页 |
| ·蛋白的提纯 | 第78-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-83页 |
| ·蛋白的表达与提纯 | 第79-80页 |
| ·CN以及其片段的丙烯酰胺荧光淬灭 | 第80-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-86页 |
| 第五章 研究结果总结和下一步工作建议 | 第86-88页 |
| ·研究结果总结 | 第86页 |
| ·下一步工作建议 | 第86-88页 |
| 硕士期间发表论文 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
