| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| 1.1 家蚕神经系统的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.1.1 家蚕神经系统的结构及功能 | 第14-15页 |
| 1.1.2 家蚕神经发育的调控研究 | 第15-16页 |
| 1.2 家蚕丝腺的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.1 家蚕丝腺的结构及功能 | 第16页 |
| 1.2.2 家蚕丝腺发育的调控研究 | 第16-17页 |
| 1.3 转录因子的结构及功能研究 | 第17-18页 |
| 1.4 apt的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.4.1 Apt的结构 | 第18-19页 |
| 1.4.2 转录因子Apt的功能研究 | 第19-22页 |
| 1.4.2.1 Apt对果蝇气管发育的调控研究 | 第19-20页 |
| 1.4.2.2 Apt对果蝇心脏发育的调控研究 | 第20页 |
| 1.4.2.3 Apt对果蝇眼发育的调控研究 | 第20-21页 |
| 1.4.2.4 Apt对果蝇翅发育的调控研究 | 第21页 |
| 1.4.2.5 Apt对家蚕表皮色素合成的调控研究 | 第21-22页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-44页 |
| 2.1 材料 | 第23-30页 |
| 2.1.1 实验蚕种 | 第23页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第23页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第23-28页 |
| 2.1.3.1 试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.1.3.2 主要试剂的配制 | 第24-28页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第28-29页 |
| 2.1.5 信息检索网站及数据处理软件 | 第29页 |
| 2.1.6 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.2 方法 | 第30-44页 |
| 2.2.1 apt基因的克隆 | 第30-35页 |
| 2.2.1.1 取材 | 第30页 |
| 2.2.1.2 总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.1.3 cDNA第一链的合成 | 第31页 |
| 2.2.1.4 PCR扩增 | 第31-32页 |
| 2.2.1.5 DNA片段的琼脂糖凝胶回收 | 第32-33页 |
| 2.2.1.6 连接反应 | 第33页 |
| 2.2.1.7 连接产物的转化 | 第33页 |
| 2.2.1.8 重组质粒的筛选与测序 | 第33-34页 |
| 2.2.1.9 序列比对 | 第34页 |
| 2.2.1.10 质粒提取 | 第34-35页 |
| 2.2.2 兔抗BmApt多克隆抗体的制备 | 第35-41页 |
| 2.2.2.1 抗原片段的选择与PCR扩增 | 第35页 |
| 2.2.2.2 原核表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 2.2.2.3 重组质粒的原核表达 | 第37页 |
| 2.2.2.4 SDS-PAGE电泳 | 第37-38页 |
| 2.2.2.5 包涵体蛋白的变性纯化 | 第38-40页 |
| 2.2.2.6 动物免疫 | 第40页 |
| 2.2.2.7 ELISA效价检测 | 第40页 |
| 2.2.2.8 Westernblot效价检测 | 第40-41页 |
| 2.2.3 免疫荧光染色 | 第41-42页 |
| 2.2.4 Bmapt的RNAi分析 | 第42-44页 |
| 2.2.4.1 siRNA干涉片段的设计和准备 | 第42页 |
| 2.2.4.2 显微注射 | 第42页 |
| 2.2.4.3 免疫荧光染色 | 第42页 |
| 2.2.4.4 qPCR | 第42-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-58页 |
| 3.1 Bmapt基因的克隆及进化分析 | 第44-46页 |
| 3.1.1 Bmapt的克隆 | 第44页 |
| 3.1.2 BmApt结构分析 | 第44-45页 |
| 3.1.3 BmApt进化分析 | 第45-46页 |
| 3.2 BmApt的抗体制备 | 第46-48页 |
| 3.2.1 表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.2.2 重组蛋白的原核表达及蛋白纯化 | 第47-48页 |
| 3.2.3 BmApt抗体效价检测 | 第48页 |
| 3.3 BmApt的蛋白表达定位 | 第48-55页 |
| 3.3.1 BmApt在家蚕神经系统的表达 | 第48-49页 |
| 3.3.2 BmApt在气管、脂肪体的表达 | 第49-50页 |
| 3.3.3 BmApt在丝腺的表达 | 第50-55页 |
| 3.4 Bmapt基因的RNAi | 第55-58页 |
| 3.4.1 Bmapt基因的RNAi表型 | 第55-56页 |
| 3.4.2 BmApt调控Bmnetrin和Bmfrazzled的表达 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 4.1 家蚕BmApt的序列分析 | 第58页 |
| 4.2 家蚕BmApt在丝腺的功能分析 | 第58页 |
| 4.3 家蚕BmApt在神经系统的功能分析 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第70页 |