| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第15-26页 |
| 1.1 J亚群禽白血病病原学 | 第15-19页 |
| 1.1.1 ALV-J病毒结构 | 第16页 |
| 1.1.2 ALV-J流行病学 | 第16-17页 |
| 1.1.3 ALV-J致病性及危害 | 第17-18页 |
| 1.1.4 ALV-J的预防和诊断 | 第18-19页 |
| 1.2 病毒抗原表位及表位疫苗 | 第19-23页 |
| 1.2.1 病毒抗原表位的概念 | 第19页 |
| 1.2.2 病毒抗原表位的筛选 | 第19-21页 |
| 1.2.3 病毒抗原表位疫苗的研究背景 | 第21页 |
| 1.2.4 病毒抗原表位疫苗的分类 | 第21-22页 |
| 1.2.5 病毒抗原表位疫苗的设计 | 第22页 |
| 1.2.6 病毒重组多表位疫苗构建 | 第22-23页 |
| 1.3 ALV-J疫苗研究 | 第23页 |
| 1.4 其他病毒表位疫苗的应用 | 第23-24页 |
| 1.4.1 狂犬病病毒表位疫苗 | 第23-24页 |
| 1.4.2 HIV病毒表位疫苗 | 第24页 |
| 1.4.3 猪瘟病毒表位疫苗 | 第24页 |
| 1.5 病毒表位疫苗发展前景 | 第24-25页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-41页 |
| 2.1 材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 细胞 | 第26页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第26页 |
| 2.1.3 病毒及试验动物 | 第26页 |
| 2.1.4 试验试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.5 试验仪器 | 第27页 |
| 2.1.6 试验地点 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-41页 |
| 2.2.1 ALV-J抗原表位的筛选 | 第28页 |
| 2.2.2 多表位基因的串联合成 | 第28页 |
| 2.2.3 BL21(DE3)感受态细胞的制备 | 第28-31页 |
| 2.2.4 质粒转化 | 第31页 |
| 2.2.5 质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.2.6 质粒酶切鉴定 | 第32页 |
| 2.2.7 重组菌的诱导表达 | 第32页 |
| 2.2.8 挑选最佳重组表达菌 | 第32页 |
| 2.2.9 表位蛋白的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.10 表位蛋白的提取与纯化 | 第33页 |
| 2.2.11 表位蛋白的Westernblot验证 | 第33-34页 |
| 2.2.12 表位蛋白浓度测定 | 第34-35页 |
| 2.2.13 表位蛋白联合弗氏佐剂免疫动物免疫原性试验 | 第35-36页 |
| 2.2.13.1 抗体消长规律监测 | 第35页 |
| 2.2.13.2 动物生长情况监测 | 第35-36页 |
| 2.2.14 gp85质粒转化及酶切鉴定 | 第36页 |
| 2.2.15 gp85蛋白表达 | 第36页 |
| 2.2.16 gp85重组蛋白纯化、复性及鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.16.1 gp85重组蛋白纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.16.2 gp85重组蛋白复性 | 第37页 |
| 2.2.16.3 Westernblot检测gp85重组蛋白 | 第37页 |
| 2.2.17 表位疫苗动物保护试验 | 第37-40页 |
| 2.2.17.1 抗体消长规律监测 | 第38页 |
| 2.2.17.2 动物生长情况监测 | 第38页 |
| 2.2.17.3 动物排毒情况检测 | 第38页 |
| 2.2.17.4 鸡体组织病毒含量检测 | 第38-39页 |
| 2.2.17.5 病理组织学病变观察 | 第39-40页 |
| 2.2.18 间接免疫荧光法(IFA) | 第40页 |
| 2.2.19 体外病毒中和试验 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-59页 |
| 3.1 ALV-J抗原表位的获得 | 第41页 |
| 3.2 ALV-J多表位基因串联合成与鉴定 | 第41-43页 |
| 3.3 ALV-J表位集成基因最佳表达菌的选定及蛋白诱导表达 | 第43-44页 |
| 3.3.1 ALV-J表位集成基因最佳表达菌的选定 | 第43页 |
| 3.3.2 ALV-J表位集成基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第43-44页 |
| 3.4 重组蛋白的纯化及Westernblot检测结果 | 第44-45页 |
| 3.5 ALV-J表位集成蛋白浓度 | 第45页 |
| 3.6 表位集成疫苗免疫原性检测结果 | 第45-46页 |
| 3.6.1 抗体消长规律监测结果 | 第45-46页 |
| 3.6.2 鸡群生长情况监测结果 | 第46页 |
| 3.7 gp85质粒鉴定 | 第46-47页 |
| 3.8 gp85蛋白在大肠杆菌中表达及纯化蛋白WB检测分析 | 第47-48页 |
| 3.9 动物保护试验结果 | 第48-50页 |
| 3.9.1 抗体消长规律监测结果 | 第48-49页 |
| 3.9.2 鸡群生长情况监测结果 | 第49页 |
| 3.9.3 动物保护率 | 第49-50页 |
| 3.9.4 PCR检测动物带毒情况 | 第50页 |
| 3.10 病理组织学病变 | 第50-57页 |
| 3.10.1 42日龄病理组织学观察 | 第51-53页 |
| 3.10.2 56日龄病理组织学观察 | 第53-55页 |
| 3.10.3 70日龄病理组织学观察 | 第55-57页 |
| 3.11 间接免疫荧光法(IFA) | 第57页 |
| 3.12 病毒中和试验 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第72页 |
