| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第16-31页 |
| 1.1 光动力疗法 | 第16-21页 |
| 1.1.1 概述 | 第16页 |
| 1.1.2 光敏剂的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.1.3 光照条件的选择 | 第18-19页 |
| 1.1.4 肿瘤的缺氧情况 | 第19页 |
| 1.1.5 光敏剂的基本作用原理 | 第19-20页 |
| 1.1.6 光敏活性化合物的定位和靶区 | 第20-21页 |
| 1.2 基于Warburg效应的分子机制研究 | 第21-23页 |
| 1.2.1 糖酵解的历史 | 第21-22页 |
| 1.2.2 代谢亚型的转换促进了Warburg效应 | 第22页 |
| 1.2.3 Warburg效应的基因调控 | 第22页 |
| 1.2.4 无效循环中ATP消耗促进Warburg效应 | 第22-23页 |
| 1.2.5 线粒体障碍与Warburg效应 | 第23页 |
| 1.3 MicroRNA在肿瘤中的作用 | 第23-26页 |
| 1.3.1 MiRNA的特征 | 第24页 |
| 1.3.2 MiRNA的合成机制 | 第24页 |
| 1.3.3 MiRNA的作用机制 | 第24-25页 |
| 1.3.4 MiRNA与癌症 | 第25-26页 |
| 1.4 LncRNA在肿瘤中的作用 | 第26-28页 |
| 1.4.1 LncRNA的来源及类型 | 第26-27页 |
| 1.4.2 LncRNA的生物学机制 | 第27页 |
| 1.4.3 LncRNA与miRNA之间相互的作用 | 第27-28页 |
| 1.5 研究目标、内容、创新点和意义 | 第28-31页 |
| 1.5.1 研究目标 | 第28页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第28-29页 |
| 1.5.3 研究意义和创新点 | 第29-31页 |
| 第2章 新型光敏活性化合物筛选模型的建立 | 第31-36页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 材料与方法 | 第31-34页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第31页 |
| 2.2.2 化合物 | 第31页 |
| 2.2.3 化合物的光动力处理 | 第31-32页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.5 主要仪器 | 第33页 |
| 2.2.6 MTT法测定细胞毒性 | 第33-34页 |
| 2.2.7 统计分析 | 第34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-35页 |
| 2.3.1 金丝桃素对MCF7乳腺癌细胞株存活率的影响 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 第3章 羰非那烯类衍生物对肿瘤细胞增殖抑制的光敏活性筛选 | 第36-43页 |
| 3.1 引言 | 第36-37页 |
| 3.2 材料与方法 | 第37-38页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第37页 |
| 3.2.2 化合物 | 第37页 |
| 3.2.3 化合物的光动力处理 | 第37页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第37页 |
| 3.2.5 主要仪器 | 第37页 |
| 3.2.6 MTT法测定细胞毒性 | 第37-38页 |
| 3.2.7 统计分析 | 第38页 |
| 3.3 实验结果 | 第38-41页 |
| 3.3.1 羰非那烯类衍生物对MCF7乳腺癌细胞株存活率的影响 | 第38-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第4章 新型光敏活性化合物3B的体外抗肿瘤活性研究 | 第43-54页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 材料与方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第43页 |
| 4.2.2 化合物 | 第43-44页 |
| 4.2.3 化合物的光动力处理 | 第44页 |
| 4.2.4 主要试剂 | 第44页 |
| 4.2.5 主要仪器 | 第44-45页 |
| 4.2.6 MTT法测定细胞毒性 | 第45页 |
| 4.2.7 统计分析 | 第45页 |
| 4.3 实验结果 | 第45-52页 |
| 4.3.1 新型光敏活性化合物3B对不同种细胞株存活率的影响 | 第45-49页 |
| 4.3.2 新型光敏活性化合物3B对MCF7乳腺癌细胞抑制作用的时间依赖性 | 第49-51页 |
| 4.3.3 新型光敏活性化合物3B对MCF7乳腺癌细胞抑制作用的光剂量依赖性 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第5章 新型光敏活性化合物3B诱导肿瘤细胞凋亡的药效学及分子机理研究 | 第54-70页 |
| 5.1 引言 | 第54-55页 |
| 5.2 材料与方法 | 第55-62页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第55-56页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第56页 |
| 5.2.3 主要试剂的配制 | 第56-58页 |
| 5.2.4 细胞株的培养 | 第58页 |
| 5.2.5 化合物的光动力处理 | 第58-59页 |
| 5.2.6 激光共聚焦显微镜亚细胞定位检测 | 第59页 |
| 5.2.7 Hoechst 33258染色实验对凋亡细胞形态的观察 | 第59页 |
| 5.2.8 Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡 | 第59页 |
| 5.2.9 细胞总蛋白的提取及Western blot实验 | 第59-60页 |
| 5.2.10 细胞总RNA的提取以及实时荧光PCR的检测 | 第60-62页 |
| 5.2.11 引物序列 | 第62页 |
| 5.2.12 统计分析 | 第62页 |
| 5.3 实验结果 | 第62-68页 |
| 5.3.1 新型光敏活性化合物3B对MCF7细胞的亚细胞定位情况 | 第62-63页 |
| 5.3.2 新型光敏活性化合物3B对MCF7细胞形态的影响 | 第63-65页 |
| 5.3.3 新型光敏活性化合物3B对MCF7细胞凋亡率的影响 | 第65-66页 |
| 5.3.4 新型光敏活性化合物3B对线粒体细胞凋亡通路相关蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
| 5.3.5 新型光敏活性化合物3B对线粒体凋亡途径相关基因mRNA水平的影响 | 第67-68页 |
| 5.4 讨论 | 第68-70页 |
| 第6章 新型光敏活性化合物3B对肿瘤细胞糖酵解效应的影响 | 第70-81页 |
| 6.1 引言 | 第70-71页 |
| 6.2 材料与方法 | 第71-75页 |
| 6.2.1 主要试剂 | 第71页 |
| 6.2.2 主要仪器 | 第71-72页 |
| 6.2.3 细胞株的培养 | 第72页 |
| 6.2.4 化合物的光动力处理 | 第72页 |
| 6.2.5 光动力作用下ROS生成量的检测 | 第72页 |
| 6.2.6 光动力作用下ATP的检测 | 第72-73页 |
| 6.2.7 光动力作用下葡萄糖的检测 | 第73页 |
| 6.2.8 光动力作用下LDH的检测 | 第73-74页 |
| 6.2.9 光动力作用下乳酸的检测 | 第74页 |
| 6.2.10 IL-1β,IL-6炎症因子的检测 | 第74页 |
| 6.2.11 Western blot实验检测蛋白表达 | 第74页 |
| 6.2.12 统计分析 | 第74-75页 |
| 6.3 实验结果 | 第75-79页 |
| 6.3.1 新型光敏活性化合物3B对ROS水平的影响 | 第75页 |
| 6.3.2 新型光敏活性化合物3B对糖酵解水平的影响 | 第75-76页 |
| 6.3.3 新型光敏活性化合物3B对炎症细胞因子的影响 | 第76-77页 |
| 6.3.4 新型光敏活性化合物3B对炎症细胞通路的影响 | 第77-79页 |
| 6.4 讨论 | 第79-81页 |
| 第7章 新型光敏活性化合物3B调控MIRNA的作用研究 | 第81-92页 |
| 7.1 引言 | 第81页 |
| 7.2 材料与方法 | 第81-85页 |
| 7.2.1 主要试剂 | 第81-82页 |
| 7.2.2 主要仪器 | 第82-83页 |
| 7.2.3 细胞株的培养 | 第83页 |
| 7.2.4 化合物的光动力处理 | 第83页 |
| 7.2.5 生物信息学预测SOCS1相关的miRNA | 第83页 |
| 7.2.6 化合物作用后的miRNA的提取及q-PCR实验 | 第83-84页 |
| 7.2.7 引物序列 | 第84页 |
| 7.2.8 肿瘤细胞的瞬时转染 | 第84-85页 |
| 7.2.9 ATP,乳酸,乳酸脱氢酶,葡萄糖的检测 | 第85页 |
| 7.2.10 IL-1β,IL-6炎症因子的检测 | 第85页 |
| 7.2.11 Western blot实验检测蛋白表达 | 第85页 |
| 7.2.12 统计分析 | 第85页 |
| 7.3 实验结果 | 第85-90页 |
| 7.3.1 新型光敏活性化合物3B对miRNA的作用 | 第85-86页 |
| 7.3.2 MiR-155-5p通过作用于SOCS1的3'-UTR调控其表达 | 第86-87页 |
| 7.3.3 新型光敏活性化合物3B通过干扰miR-155-5p影响糖酵解作用 | 第87-88页 |
| 7.3.4 新型光敏活性化合物3B通过干扰miR-155-5p影响炎症因子及炎症通路作用 | 第88-90页 |
| 7.4 讨论 | 第90-92页 |
| 第8章 新型光敏活性化合物3B对荷瘤小鼠体内抑瘤作用的研究 | 第92-100页 |
| 8.1 引言 | 第92页 |
| 8.2 材料与方法 | 第92-94页 |
| 8.2.1 细胞株的培养 | 第92页 |
| 8.2.2 荷瘤小鼠皮下成瘤实验 | 第92页 |
| 8.2.3 H&E染色实验 | 第92页 |
| 8.2.4 TUNEL检测 | 第92-93页 |
| 8.2.5 免疫组化实验 | 第93-94页 |
| 8.2.6 实验动物 | 第94页 |
| 8.2.7 统计分析 | 第94页 |
| 8.3 实验结果 | 第94-99页 |
| 8.3.1 荷瘤小鼠的体内抗肿瘤研究 | 第94-96页 |
| 8.3.2 H&E染色检验化合物对小鼠主要器官的毒副作用 | 第96-97页 |
| 8.3.3 H&E染色检验化合物对小鼠肿瘤的毒副作用 | 第97页 |
| 8.3.4 TUNEL染色检测肿瘤组织的凋亡情况 | 第97-98页 |
| 8.3.5 免疫组化实验检测肿瘤组织中的蛋白水平 | 第98-99页 |
| 8.4 讨论 | 第99-100页 |
| 第9章 新型光敏活性化合物3B的分子对接研究 | 第100-105页 |
| 9.1 引言 | 第100-101页 |
| 9.2 材料与方法 | 第101页 |
| 9.2.1 分子对接 | 第101页 |
| 9.2.2 细胞株的培养 | 第101页 |
| 9.2.3 LncRNA的提取及q-PCR的检测 | 第101页 |
| 9.2.4 引物序列 | 第101页 |
| 9.2.5 统计分析 | 第101页 |
| 9.3 实验结果 | 第101-104页 |
| 9.3.1 新型光敏活性化合物3B与蛋白受体的作用 | 第101-103页 |
| 9.3.2 新型光敏活性化合物3B对lnc-ATB的影响 | 第103-104页 |
| 9.4 讨论 | 第104-105页 |
| 第10章 胃癌病例中异常表达LNCRNA的研究 | 第105-109页 |
| 10.1 引言 | 第105页 |
| 10.2 材料与方法 | 第105-106页 |
| 10.2.1 人胃癌及正常组织标本的收集和保存 | 第105-106页 |
| 10.2.2 人胃癌及正常组织标本总RNA及lncRNA的提取 | 第106页 |
| 10.2.3 实时定量PCR检测人胃癌及正常组织样本中的lncRNA | 第106页 |
| 10.2.4 统计分析 | 第106页 |
| 10.3 实验结果 | 第106-107页 |
| 10.3.1 Lnc-ATB在20例人胃癌病例组织中的表达量 | 第106-107页 |
| 10.3.2 Lnc-ATB表达量与人胃癌患者临床病理特征的相关性 | 第107页 |
| 10.4 讨论 | 第107-109页 |
| 第11章 LNCRNA对肿瘤细胞增殖抑制的影响 | 第109-117页 |
| 11.1 引言 | 第109页 |
| 11.2 材料与方法 | 第109-110页 |
| 11.2.1 细胞株的培养 | 第109页 |
| 11.2.2 Lnc-ATB过表达质粒和敲低质粒的构建 | 第109页 |
| 11.2.3 实时荧光定量PCR法检测细胞内lnc-ATB的表达量 | 第109-110页 |
| 11.2.4 MTT实验检测细胞体外增殖能力 | 第110页 |
| 11.2.5 流式细胞术检测细胞周期 | 第110页 |
| 11.2.6 EdU染色实验 | 第110页 |
| 11.2.7 蛋白质印迹法检测lnc-ATB对相关通路的影响 | 第110页 |
| 11.2.8 统计分析 | 第110页 |
| 11.3 实验结果 | 第110-115页 |
| 11.3.1 Lnc-ATB对人胃癌细胞体外增殖能力的作用 | 第110-112页 |
| 11.3.2 Lnc-ATB对细胞周期的影响 | 第112-114页 |
| 11.3.3 Lnc-ATB对TGF-β通路及细胞周期相关蛋白的影响 | 第114-115页 |
| 11.4 讨论 | 第115-117页 |
| 第12章 LNCRNA调控MIRNA对肿瘤细胞增殖抑制的分子机理研究 | 第117-124页 |
| 12.1 引言 | 第117页 |
| 12.2 材料与方法 | 第117-118页 |
| 12.2.1 细胞株的培养 | 第117页 |
| 12.2.2 生物信息学预测 | 第117页 |
| 12.2.3 实时荧光定量PCR检测lnc-ATB及miR-141-3p的含量 | 第117页 |
| 12.2.4 引物序列 | 第117-118页 |
| 12.2.5 Western blot检测干扰miR-141-3p对肿瘤细胞相关通路的影响 | 第118页 |
| 12.2.6 统计分析 | 第118页 |
| 12.3 实验结果 | 第118-122页 |
| 12.3.1 与lnc-ATB相关的miRNA的预测 | 第118-119页 |
| 12.3.2 Lnc-ATB与miR-141-3p的相互作用 | 第119-120页 |
| 12.3.3 MiR-141-3p通过作用于3'UTR调控靶基因TGF-β2的表达 | 第120-122页 |
| 12.3.4 Lnc-ATB和miR-141-3p对相关通路的影响 | 第122页 |
| 12.4 讨论 | 第122-124页 |
| 第13章 结论 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第149页 |
