| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 引言 | 第13页 |
| 第一章 斑马鱼中E2F5基因的研究 | 第13-47页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 斑马鱼的性腺发育 | 第14-17页 |
| 1.1.1 斑马鱼原始生殖细胞的迁移 | 第14-15页 |
| 1.1.2 斑马鱼性腺的分化 | 第15页 |
| 1.1.3 斑马鱼卵母细胞的发育 | 第15-16页 |
| 1.1.4 斑马鱼精巢的发育 | 第16-17页 |
| 1.2 E2F家族 | 第17-22页 |
| 1.2.1 E2F对细胞增殖的调节 | 第17-19页 |
| 1.2.2 E2F促进细胞增殖 | 第19页 |
| 1.2.3 E2F的抑制激活模式 | 第19-20页 |
| 1.2.4 激活抑制模型 | 第20-21页 |
| 1.2.5 细胞周期再起始需要E2F的转录激活结构 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-32页 |
| 2.1 材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 所使用的菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 所用试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 培养基和试剂的配置 | 第22-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 斑马鱼的饲养 | 第24-25页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.3 反转录cDNA | 第25页 |
| 2.2.4 感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| 2.2.5 RT-PCR | 第26-27页 |
| 2.2.6 质粒的提取 | 第27页 |
| 2.2.7 转录模板的纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.8 探针合成 | 第28页 |
| 2.2.9 整体原位杂交 | 第28-31页 |
| 2.2.10 冰冻切片 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-39页 |
| 3.1 鉴定NM_205615.1 | 第32-33页 |
| 3.2 分析斑马鱼E2F5基因和蛋白质结构 | 第33-36页 |
| 3.3 斑马鱼E2F5的表达模式 | 第36-39页 |
| 4 讨论 | 第39-47页 |
| 4.1 E2F5的结构和进化 | 第39-41页 |
| 4.2 E2F5的表达 | 第41-47页 |
| 4.2.1 E2F5在卵母细胞中的定位 | 第41-43页 |
| 4.2.2 E2F5在卵子发生中潜在的作用 | 第43-47页 |
| 第二章 斑马鱼ApoE对神经发育的影响 | 第47-93页 |
| 1 前言 | 第47-63页 |
| 1.1 阿尔茨海默氏病概述 | 第47-50页 |
| 1.1.1 阿尔茨海默氏病的致病原因 | 第48-49页 |
| 1.1.2 阿尔茨海默氏病的病例特征 | 第49页 |
| 1.1.3 阿尔茨海默氏病和apoE | 第49-50页 |
| 1.2 ApoE在阿尔茨海默氏病中的研究进展 | 第50-55页 |
| 1.2.1 ApoE在Aβ聚集中的作用 | 第50-51页 |
| 1.2.2 体外ApoE与Aβ结合实验 | 第51页 |
| 1.2.3 体外Aβ聚集研究 | 第51页 |
| 1.2.4 ApoE样品制备的不同 | 第51页 |
| 1.2.5 Aβ40和Aβ42 | 第51-52页 |
| 1.2.6 活体动物实验 | 第52页 |
| 1.2.7 ApoE在Aβ清除中的作用 | 第52-53页 |
| 1.2.8 ApoE在AD患者中的表达水平和在对照组中的表达水平 | 第53页 |
| 1.2.9 脑脊髓液中不同apoE基因型间的表达水平的区别 | 第53-54页 |
| 1.2.10 脑实质中apoE各基因型的表达水平 | 第54页 |
| 1.2.11 小鼠中研究apoE的表达 | 第54-55页 |
| 1.3 ApoE受体 | 第55-58页 |
| 1.3.1 低密度脂蛋白受体 | 第55页 |
| 1.3.2 ApoE受体2 | 第55-56页 |
| 1.3.3 脂蛋白受体相关蛋白1 | 第56页 |
| 1.3.4 LR11 | 第56-57页 |
| 1.3.5 ATP结合盒转运子A1 | 第57页 |
| 1.3.6 APP和ApoE受体的相似性 | 第57-58页 |
| 1.4 ApoE对神经的影响 | 第58-62页 |
| 1.4.1 体外实验中ApoE对突触可塑性和认知行为的作用 | 第58-59页 |
| 1.4.2 ApoE的神经毒性 | 第59-60页 |
| 1.4.3 不同apoE基因型对Tau的作用 | 第60页 |
| 1.4.4 ApoE在神经炎症中的作用 | 第60-61页 |
| 1.4.5 不同apoE基因型和神经炎症 | 第61页 |
| 1.4.6 ApoE在大脑代谢中的作用 | 第61-62页 |
| 1.5 斑马鱼作为阿尔茨海默氏病的研究模型 | 第62-63页 |
| 2 材料和方法 | 第63-70页 |
| 2.1 材料 | 第63-65页 |
| 2.1.1 引物 | 第63页 |
| 2.1.2 Morpholino | 第63-64页 |
| 2.1.3 试剂 | 第64-65页 |
| 2.1.4 仪器 | 第65页 |
| 2.2 方法 | 第65-70页 |
| 2.2.1 显微注射 | 第65-66页 |
| 2.2.2 Western Blot | 第66-68页 |
| 2.2.3 免疫组化 | 第68-69页 |
| 2.2.4 透射电镜切片与观察 | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-86页 |
| 3.1 斑马鱼中存在两个apoE的转录本 | 第70-73页 |
| 3.2 ApoEa在斑马鱼早期发育中的mRNA表达 | 第73-74页 |
| 3.3 ApoEa knockdown | 第74-86页 |
| 3.3.1 ApoEa蛋白质表达被特异地抑制了 | 第75-76页 |
| 3.3.2 ApoEa影响了运动神经元的切向迁移 | 第76-77页 |
| 3.3.3 ApoEa影响了Vp和Ⅶ运动神经元轴突的生长 | 第77-80页 |
| 3.3.4 ApoEa对脊髓神经的背部神经轴突生长的影响 | 第80-83页 |
| 3.3.5 ApoEa knockdown对髓鞘的影响 | 第83-86页 |
| 4 讨论 | 第86-90页 |
| 4.1 ApoEa的表达情况 | 第86-87页 |
| 4.2 ApoEa Morpholino的特异性 | 第87-89页 |
| 4.3 小鼠apoE缺失对神经的影响 | 第89-90页 |
| 5 下一步研究设想 | 第90-93页 |
| 5.1 ApoEa缺失对神经轴突生长缺陷的分子机制 | 第90-92页 |
| 5.2 检测髓鞘的变化 | 第92-93页 |
| 总结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-113页 |
| 攻博期间发表的科研成果 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 缩略词 | 第115页 |
