| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 临床上常用的抗真菌药物现状 | 第11-13页 |
| 1.1.1 作用于真菌细胞膜的真菌抑制剂 | 第11-12页 |
| 1.1.2 抑制真菌核酸合成的真菌抑制剂 | 第12页 |
| 1.1.3 抗真菌药物抗药性产生的机制 | 第12-13页 |
| 1.2 以细胞壁为靶标的抗真菌药物的研究 | 第13-19页 |
| 1.2.1 抑制β-(1，3)葡聚糖合成酶的真菌抑制剂 | 第13-17页 |
| 1.2.1.1 β-(1,3)-葡聚糖合成酶 | 第13-14页 |
| 1.2.1.2 β-(1，3)葡聚糖合成酶抑制剂 | 第14-17页 |
| 1.2.1.2.1 脂环肽类 | 第14-15页 |
| 1.2.1.2.2 糖脂类 | 第15-16页 |
| 1.2.1.2.3 萜类 | 第16页 |
| 1.2.1.2.4 环肽类 | 第16-17页 |
| 1.2.2 抑制几丁质合成酶的真菌抑制剂 | 第17-18页 |
| 1.2.2.1 几丁质合成酶 | 第17页 |
| 1.2.2.2 几丁质合成酶抑制剂 | 第17-18页 |
| 1.2.3 甘露糖蛋白的抑制剂 | 第18页 |
| 1.2.4 β-(1,6)葡聚糖合成酶抑制剂 | 第18-19页 |
| 1.3 展望 | 第19页 |
| 参考文献 | 第19-23页 |
| 第二章 以酵母细胞葡聚糖合酶为靶标的真菌抑制剂初筛模型构建 | 第23-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-29页 |
| 2.1.1 材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1.1 菌种 | 第24页 |
| 2.1.1.2 培养基 | 第24页 |
| 2.1.1.3 质粒和引物 | 第24-25页 |
| 2.1.1.4 主要试剂和仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.2 方法 | 第26-29页 |
| 2.1.2.1 PCR合成FKS1 基因敲除片段 | 第26页 |
| 2.1.2.2 PCR产物纯化 | 第26-27页 |
| 2.1.2.3 醋酸锂法酵母转化 | 第27-28页 |
| 2.1.2.4 转化子鉴定 | 第28页 |
| 2.1.2.5 酵母对药物的敏感性测试 | 第28-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-33页 |
| 2.2.1 酵母FKS1 基因的敲除 | 第29-30页 |
| 2.2.2 ΔfkS1 菌株的验证 | 第30-31页 |
| 2.2.3 突变子的表型鉴定 | 第31-33页 |
| 2.3 讨论 | 第33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 第三章 以酵母细胞几丁质合酶为靶标的真菌抑制剂初筛模型构建 | 第35-48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-42页 |
| 3.1.1 材料 | 第36-38页 |
| 3.1.1.1 菌种 | 第36页 |
| 3.1.1.2 培养基 | 第36页 |
| 3.1.1.3 质粒和引物 | 第36-38页 |
| 3.1.1.4 主要试剂和仪器 | 第38页 |
| 3.1.2 方法 | 第38-42页 |
| 3.1.2.1 PCR合成基因敲除片段 | 第38-39页 |
| 3.1.2.2 PCR产物纯化 | 第39页 |
| 3.1.2.3 醋酸锂法酵母转化 | 第39-40页 |
| 3.1.2.4 转化子鉴定 | 第40-41页 |
| 3.1.2.5 酵母对药物的敏感性测试 | 第41-42页 |
| 3.2 结果与分析 | 第42-46页 |
| 3.2.1 chs1 基因敲除的酵母模型的构建 | 第42-43页 |
| 3.2.2 chs2 基因敲除的酵母模型的构建 | 第43-44页 |
| 3.2.3 chs3 基因敲除的酵母模型的构建 | 第44-45页 |
| 3.2.4 突变子的表型鉴定 | 第45-46页 |
| 3.3 讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-48页 |
| 第四章 以酵母细胞壁为靶标的初筛模型特异性分析 | 第48-63页 |
| 4.1 材料与方法 | 第48-52页 |
| 4.1.1 材料 | 第48-50页 |
| 4.1.1.1 实验菌株 | 第48-49页 |
| 4.1.1.2 培养基 | 第49页 |
| 4.1.1.3 主要试剂和仪器 | 第49-50页 |
| 4.1.2 方法 | 第50-52页 |
| 4.1.2.1 初筛模型对各种靶标药物的敏感性试验 | 第50页 |
| 4.1.2.2 山梨醇挽救实验 | 第50-51页 |
| 4.1.2.3 初筛模型几丁质含量的测定 | 第51页 |
| 4.1.2.4 初筛模型β-葡聚糖含量的测定 | 第51-52页 |
| 4.2 结果和分析 | 第52-60页 |
| 4.2.1 初筛模型对于不同靶标抗真菌药物的敏感性实验 | 第52-55页 |
| 4.2.2 山梨醇的挽救实验 | 第55-57页 |
| 4.2.3 初筛模型几丁质含量的分析 | 第57-59页 |
| 4.2.4 初筛模型β-葡聚糖含量的分析 | 第59-60页 |
| 4.3 讨论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 第五章 黄连醇提物对真菌几丁质合酶的抑制作用 | 第63-73页 |
| 5.1 材料与方法 | 第63-67页 |
| 5.1.1 材料 | 第63-64页 |
| 5.1.1.1 实验菌株 | 第63-64页 |
| 5.1.1.2 培养基 | 第64页 |
| 5.1.1.3 主要试剂和仪器 | 第64页 |
| 5.1.2 方法 | 第64-67页 |
| 5.1.2.1 黄连醇提物的制备 | 第64-65页 |
| 5.1.2.2 黄连醇提物对酵母在CFW抑制浓度下的生长挽救实验 | 第65页 |
| 5.1.2.3 几丁质合酶缺陷型酵母对黄连醇提物的敏感性实验 | 第65-66页 |
| 5.1.2.3.1 黄连醇提物对酵母的抑菌作用测定 | 第65页 |
| 5.1.2.3.2 黄连醇提物对酵母的最低抑制浓度（MIC）测定 | 第65-66页 |
| 5.1.2.4 黄连醇提物对酵母细胞几丁质合成的影响 | 第66-67页 |
| 5.2. 结果与分析 | 第67-70页 |
| 5.2.1 黄连醇提物能缓解CFW对酵母的抑制作用 | 第67页 |
| 5.2.2 几丁质合酶缺陷型酵母对黄连醇提物的敏感性 | 第67-69页 |
| 5.2.3 黄连醇提物处理后酵母细胞几丁质含量的变化 | 第69-70页 |
| 5.3 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| 第六章 总结与展望 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76页 |
