| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-25页 |
| 1.1 真菌细胞色素P450研究进展 | 第10-14页 |
| 1.1.1 真菌细胞色素P450基因多样性研究 | 第10-11页 |
| 1.1.2 真菌细胞色素P450功能分析 | 第11-12页 |
| 1.1.3 真菌细胞色素P450数据库 | 第12-13页 |
| 1.1.4 真菌的细胞色素P450酶系统 | 第13-14页 |
| 1.2 细胞色素CYP51研究进展 | 第14-21页 |
| 1.2.1 细胞色素CYP51简概 | 第14-15页 |
| 1.2.2 CYP51家族保守性结构研究 | 第15-19页 |
| 1.2.3 CYP51晶体结构解析 | 第19-21页 |
| 1.3 CYP51与真菌耐药性分析研究 | 第21-24页 |
| 1.3.1 DMIs的耐药性机制 | 第22-23页 |
| 1.3.2 新型杀菌剂的研发 | 第23-24页 |
| 1.4 本文的研究目的、内容及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 PD-CYP51突变体构建及与杀菌剂结合光谱特性分析 | 第25-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂和商品化杀菌剂 | 第25页 |
| 2.1.3 培养基及仪器 | 第25页 |
| 2.1.4 主要的缓冲液 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 Pd-CYP51的三维结构的模建与分子对接 | 第25-26页 |
| 2.2.2 Pd-CYP51的定点突变 | 第26-28页 |
| 2.2.3 重组Pd-CYP51及突变体的活性测定与结合光谱分析 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-41页 |
| 2.3.1 Pd-CYP51三维结构的同源模建和分子对接 | 第28-30页 |
| 2.3.2 Pd-CYP51定点突变分析 | 第30-33页 |
| 2.3.3 Pd-CYP51突变体的含量与活性测定 | 第33-38页 |
| 2.3.4 未突变和突变体蛋白与烯唑醇结合光谱分析比较 | 第38-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 柑橘绿霉菌的新型先导化合物的筛选 | 第42-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.1.1 菌种 | 第42页 |
| 3.1.2 化学试剂及先导化合物 | 第42页 |
| 3.1.3 常用培养基和缓冲液 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42页 |
| 3.2.1 不同化合物对柑橘绿霉菌的抑菌率测定 | 第42页 |
| 3.2.2 重组Pd-CYP51蛋白的制备 | 第42页 |
| 3.2.3 重组Pd-CYP51的蛋白含量及活性的测定 | 第42页 |
| 3.2.4 重组Pd-CYP51与化合物的结合光谱分析 | 第42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-56页 |
| 3.3.1 商品化杀菌剂对柑橘绿霉菌的抑菌率EC50值测定 | 第42-44页 |
| 3.3.2 LWJ系列先导化合物对柑橘绿霉菌的抑菌率分析 | 第44-51页 |
| 3.3.3 商品化杀菌剂与Pd-CYP51的结合光谱分析 | 第51-53页 |
| 3.3.4 LWJ系列先导化合物与柑橘绿霉菌CYP51的结合光谱分析 | 第53-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-57页 |
| 小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 硕士期间发表论文 | 第66页 |
| 衷心感谢以下基金资助 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
