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天府肉鸭α干扰素的原核表达及抗病毒活性研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第一章 文献综述第12-25页
 1 干扰素概述第12页
 2 干扰素的种类及结构第12-14页
 3 干扰素的生物学活性及其机制第14-19页
   ·干扰素的抗病毒作用机理第14-16页
   ·干扰素的免疫调节机理第16-17页
   ·干扰素抗肿瘤作用及机理第17-18页
   ·干扰素与神经内分泌之间的相互作用第18-19页
 4 病毒对干扰素的抵抗第19-20页
 5 禽类干扰素研究进展第20-23页
 6 研究目的及意义第23-25页
第二章 天府肉鸭α干扰素基因的T克隆及生物信息学分析第25-50页
 1 材料第25-26页
   ·菌株/载体/实验动物第25页
   ·主要试剂及配制第25-26页
   ·主要仪器设备第26页
 2 实验方法第26-32页
   ·引物设计第26-27页
   ·鸭外周血有核细胞的分离培养及细胞总RNA的提取第27-28页
   ·鸭IFN-α基因的扩增第28-29页
   ·扩增产物的纯化第29页
   ·PCR纯化产物与克隆载体的连接第29页
   ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第29-30页
   ·转化第30页
   ·鸭IFN-α基因阳性重组子的鉴定第30-32页
 3 结果第32-46页
   ·鸭IFN-α基因的扩增第32-33页
   ·鸭IFN-α基因克隆质粒pMD18-T-DuIFNα的鉴定第33页
   ·生物信息学分析第33-46页
 4 讨论第46-50页
   ·RNA提取第46页
   ·生物信息学分析第46-48页
   ·密码子偏嗜性分析第48-50页
第三章 鸭IFN-α基因的原核表达及抗病毒活性研究第50-76页
 1 材料第50-53页
   ·菌株/毒株/载体/试验动物第50页
   ·主要试剂及配制第50-52页
   ·主要仪器第52-53页
 2 实验方法第53-63页
   ·天府肉鸭IFN-α基因的亚克隆第53-55页
   ·重组蛋白的表达第55-58页
   ·鸭IFN-α成熟蛋白的纯化第58-59页
   ·多克隆抗体的制备及效价检测第59-60页
   ·免疫兔血清的Western Blotting检测第60页
   ·抗体IgG的粗提和纯化第60-61页
   ·重组鸭α干扰素包涵体溶解蛋白的复性第61页
   ·重组鸭α干扰素活性测定第61-63页
 3 结果第63-71页
   ·天府肉鸭IFN-α基因的亚克隆第63-64页
   ·重组蛋白在大肠杆菌中的表达及条件优化第64-66页
   ·鸭IFN-α成熟蛋白的纯化第66-67页
   ·兔抗鸭α干扰素成熟蛋白多克隆抗体效价检测第67-68页
   ·抗体IgG的粗提和纯化第68-69页
   ·天府肉鸭α干扰素成熟蛋白的抗病毒活性研究第69-71页
 4 讨论第71-76页
   ·表达载体、宿主菌的选择和融合表达的意义第71页
   ·重组蛋白的表达、纯化第71-74页
   ·天府肉鸭α干扰素成熟蛋白的复性第74-75页
   ·天府肉鸭α干扰素成熟蛋白的抗病毒活性研究第75-76页
结论第76-77页
参考文献第77-83页
附录第83-84页
致谢第84页

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