中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
第1章 绪论 | 第19-37页 |
1.1 iPLA_2β 及其研究现状 | 第19-22页 |
1.1.1 iPLA_2β 概述 | 第19页 |
1.1.2 iPLA_2β 的组织分布和亚细胞学定位 | 第19-20页 |
1.1.3 iPLA_2β 的毒理学及生物学功能 | 第20-22页 |
1.2 肝损伤及iPLA_2β 对肝损伤的保护作用 | 第22-29页 |
1.2.1 肝损伤概述 | 第22-23页 |
1.2.2 肝损伤的危险因素 | 第23-24页 |
1.2.3 肝损伤的相关机制 | 第24-26页 |
1.2.4 Con A诱导的免疫性肝损伤模型 | 第26-28页 |
1.2.5 iPLA_2β 在肝损伤中的保护作用 | 第28-29页 |
1.3 肠损伤及iPLA_2β 在肠损伤中的保护作用 | 第29-34页 |
1.3.1 肠损伤概述 | 第29页 |
1.3.2 肠损伤的危险因素 | 第29-32页 |
1.3.3 肠损伤的相关机制 | 第32-33页 |
1.3.4 DSS诱导的免疫性肠损伤模型 | 第33页 |
1.3.5 iPLA_2β 在肠损伤中的保护作用 | 第33-34页 |
1.4 胆汁酸循环与免疫性肝肠损伤 | 第34-37页 |
1.4.1 胆汁酸及其种类 | 第34页 |
1.4.2 胆汁酸转运与肝肠损伤 | 第34-37页 |
第2章 材料和方法 | 第37-63页 |
2.1 试剂和仪器 | 第37-41页 |
2.1.1 主要试剂 | 第37-39页 |
2.1.2 主要耗材 | 第39-40页 |
2.1.3 主要仪器 | 第40-41页 |
2.2 实验动物与处理 | 第41页 |
2.3 动物实验模型的建立 | 第41-42页 |
2.3.1 Con A诱导的免疫性肝损伤模型的建立 | 第41页 |
2.3.2 DSS诱导的免疫性肠损伤模型的建立 | 第41-42页 |
2.4 血清中肝功能指标的检测 | 第42-43页 |
2.5 HE染色对肝脏及肠组织损伤的检测 | 第43-44页 |
2.5.1 HE染色 | 第43-44页 |
2.5.2 肠损伤等级的组织学评定 | 第44页 |
2.6 苦味酸-天狼星红染色法对肝脏纤维化的检测 | 第44-45页 |
2.7 阿利辛蓝过碘酸雪夫染色法对肠道黏液层损伤的检测 | 第45-46页 |
2.8 免疫组织化学法对组织损伤的检测 | 第46-48页 |
2.8.1 增殖检测 | 第46-47页 |
2.8.2 肝脏纤维化检测 | 第47页 |
2.8.3 小肠上皮细胞凋亡检测 | 第47页 |
2.8.4 胆管损伤的检测 | 第47页 |
2.8.5 炎症检测 | 第47-48页 |
2.8.6 免疫组织化学染色步骤 | 第48页 |
2.9 Western blot法对蛋白质的定量检测 | 第48-52页 |
2.9.1 Western blot法检测原理 | 第48-49页 |
2.9.2 试剂配制 | 第49-51页 |
2.9.3 蛋白质的提取和定量 | 第51页 |
2.9.4 Western blot实验步骤 | 第51-52页 |
2.10 实时荧光定量PCR对基因表达的分析 | 第52-55页 |
2.10.1 动物组织总RNA的提取 | 第53页 |
2.10.2 动物组织总RNA的质量检测及定量分析 | 第53-54页 |
2.10.3 cDNA的合成 | 第54页 |
2.10.4 实时荧光定量PCR反应体系及程序 | 第54-55页 |
2.11 酶联免疫吸附试验测定内毒素含量 | 第55-56页 |
2.12 iPLA_2酶活性的测定 | 第56-58页 |
2.12.1 iPLA_2酶活性的测定原理 | 第56页 |
2.12.2 相关试剂准备及配制 | 第56-57页 |
2.12.3 样品的准备 | 第57页 |
2.12.4 酶活性的检测 | 第57-58页 |
2.13 LC-MS/MS胆汁酸谱的测定 | 第58-60页 |
2.13.1 相关试剂准备及配制 | 第58页 |
2.13.2 LC-MS/MS的分离条件 | 第58页 |
2.13.3 标准品和标准曲线的准备 | 第58-59页 |
2.13.4 样品中胆汁酸的提取 | 第59-60页 |
2.14 LC-MS/MS磷脂含量的测定 | 第60-61页 |
2.14.1 相关试剂准备及配制 | 第60页 |
2.14.2 LC-MS/MS的分离条件 | 第60-61页 |
2.14.3 脂质的提取 | 第61页 |
2.15 统计分析 | 第61-63页 |
第3章 实验结果 | 第63-109页 |
3.1 iPLA_2β 在Con A诱导的肝损伤及肠损伤中的作用及其机制 | 第63-91页 |
3.1.1 iPLA_2β 在Con A诱导的免疫性肝损伤中的保护作用 | 第63-68页 |
3.1.2 iPLA_2β 在Con A诱导的小肠损伤中的保护作用 | 第68-82页 |
3.1.3 iPLA_2β 保护Con A染毒后的胆汁酸代谢平衡及正常转运 | 第82-91页 |
3.2 iPLA_2β 在DSS诱导的肠损伤中的作用及其机制 | 第91-109页 |
3.2.1 iPLA_2β 在人结肠组织的表达与定位 | 第91-92页 |
3.2.2 DSS致小鼠肠iPLA_2β 表达的变化 | 第92-94页 |
3.2.3 iPLA_2β 在DSS诱导的结肠损伤中的保护作用 | 第94-106页 |
3.2.4 iPLA_2β 在DSS诱导的回肠损伤中的保护作用 | 第106-109页 |
第4章 讨论 | 第109-119页 |
4.1 外源化学物致免疫性肝损伤的毒作用机制和iPLA_2β 的保护作用 | 第110-114页 |
4.2 外源化学物致免疫性肠损伤的毒作用机制和iPLA_2β 的保护作用 | 第114-119页 |
第5章 结论 | 第119-121页 |
创新 点 | 第121-123页 |
参考文献 | 第123-143页 |
作者简介及攻读博士期间取得的学术成果 | 第143-145页 |
致谢 | 第145-147页 |