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iPLA2β对于ConA和DSS诱导的免疫性肝损伤和肠损伤的保护作用及其机制的研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-10页
第1章 绪论第19-37页
    1.1 iPLA_2β 及其研究现状第19-22页
        1.1.1 iPLA_2β 概述第19页
        1.1.2 iPLA_2β 的组织分布和亚细胞学定位第19-20页
        1.1.3 iPLA_2β 的毒理学及生物学功能第20-22页
    1.2 肝损伤及iPLA_2β 对肝损伤的保护作用第22-29页
        1.2.1 肝损伤概述第22-23页
        1.2.2 肝损伤的危险因素第23-24页
        1.2.3 肝损伤的相关机制第24-26页
        1.2.4 Con A诱导的免疫性肝损伤模型第26-28页
        1.2.5 iPLA_2β 在肝损伤中的保护作用第28-29页
    1.3 肠损伤及iPLA_2β 在肠损伤中的保护作用第29-34页
        1.3.1 肠损伤概述第29页
        1.3.2 肠损伤的危险因素第29-32页
        1.3.3 肠损伤的相关机制第32-33页
        1.3.4 DSS诱导的免疫性肠损伤模型第33页
        1.3.5 iPLA_2β 在肠损伤中的保护作用第33-34页
    1.4 胆汁酸循环与免疫性肝肠损伤第34-37页
        1.4.1 胆汁酸及其种类第34页
        1.4.2 胆汁酸转运与肝肠损伤第34-37页
第2章 材料和方法第37-63页
    2.1 试剂和仪器第37-41页
        2.1.1 主要试剂第37-39页
        2.1.2 主要耗材第39-40页
        2.1.3 主要仪器第40-41页
    2.2 实验动物与处理第41页
    2.3 动物实验模型的建立第41-42页
        2.3.1 Con A诱导的免疫性肝损伤模型的建立第41页
        2.3.2 DSS诱导的免疫性肠损伤模型的建立第41-42页
    2.4 血清中肝功能指标的检测第42-43页
    2.5 HE染色对肝脏及肠组织损伤的检测第43-44页
        2.5.1 HE染色第43-44页
        2.5.2 肠损伤等级的组织学评定第44页
    2.6 苦味酸-天狼星红染色法对肝脏纤维化的检测第44-45页
    2.7 阿利辛蓝过碘酸雪夫染色法对肠道黏液层损伤的检测第45-46页
    2.8 免疫组织化学法对组织损伤的检测第46-48页
        2.8.1 增殖检测第46-47页
        2.8.2 肝脏纤维化检测第47页
        2.8.3 小肠上皮细胞凋亡检测第47页
        2.8.4 胆管损伤的检测第47页
        2.8.5 炎症检测第47-48页
        2.8.6 免疫组织化学染色步骤第48页
    2.9 Western blot法对蛋白质的定量检测第48-52页
        2.9.1 Western blot法检测原理第48-49页
        2.9.2 试剂配制第49-51页
        2.9.3 蛋白质的提取和定量第51页
        2.9.4 Western blot实验步骤第51-52页
    2.10 实时荧光定量PCR对基因表达的分析第52-55页
        2.10.1 动物组织总RNA的提取第53页
        2.10.2 动物组织总RNA的质量检测及定量分析第53-54页
        2.10.3 cDNA的合成第54页
        2.10.4 实时荧光定量PCR反应体系及程序第54-55页
    2.11 酶联免疫吸附试验测定内毒素含量第55-56页
    2.12 iPLA_2酶活性的测定第56-58页
        2.12.1 iPLA_2酶活性的测定原理第56页
        2.12.2 相关试剂准备及配制第56-57页
        2.12.3 样品的准备第57页
        2.12.4 酶活性的检测第57-58页
    2.13 LC-MS/MS胆汁酸谱的测定第58-60页
        2.13.1 相关试剂准备及配制第58页
        2.13.2 LC-MS/MS的分离条件第58页
        2.13.3 标准品和标准曲线的准备第58-59页
        2.13.4 样品中胆汁酸的提取第59-60页
    2.14 LC-MS/MS磷脂含量的测定第60-61页
        2.14.1 相关试剂准备及配制第60页
        2.14.2 LC-MS/MS的分离条件第60-61页
        2.14.3 脂质的提取第61页
    2.15 统计分析第61-63页
第3章 实验结果第63-109页
    3.1 iPLA_2β 在Con A诱导的肝损伤及肠损伤中的作用及其机制第63-91页
        3.1.1 iPLA_2β 在Con A诱导的免疫性肝损伤中的保护作用第63-68页
        3.1.2 iPLA_2β 在Con A诱导的小肠损伤中的保护作用第68-82页
        3.1.3 iPLA_2β 保护Con A染毒后的胆汁酸代谢平衡及正常转运第82-91页
    3.2 iPLA_2β 在DSS诱导的肠损伤中的作用及其机制第91-109页
        3.2.1 iPLA_2β 在人结肠组织的表达与定位第91-92页
        3.2.2 DSS致小鼠肠iPLA_2β 表达的变化第92-94页
        3.2.3 iPLA_2β 在DSS诱导的结肠损伤中的保护作用第94-106页
        3.2.4 iPLA_2β 在DSS诱导的回肠损伤中的保护作用第106-109页
第4章 讨论第109-119页
    4.1 外源化学物致免疫性肝损伤的毒作用机制和iPLA_2β 的保护作用第110-114页
    4.2 外源化学物致免疫性肠损伤的毒作用机制和iPLA_2β 的保护作用第114-119页
第5章 结论第119-121页
创新 点第121-123页
参考文献第123-143页
作者简介及攻读博士期间取得的学术成果第143-145页
致谢第145-147页

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