| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 英文缩写符号 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-14页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 醛酮还原酶超家族AKR | 第10-12页 |
| 1.2.1 醛酮还原酶AKR族的分型与命名 | 第10-11页 |
| 1.2.2 醛酮还原酶AKR的构型 | 第11页 |
| 1.2.3 醛酮还原酶AKR族与疾病 | 第11-12页 |
| 1.3 课题研究的目的与意义 | 第12-14页 |
| 第二章 实验用细胞的培养 | 第14-20页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2.1.4 溶液的配制 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-18页 |
| 2.2.1 贴壁细胞的培养 | 第16-18页 |
| 2.3 实验结果 | 第18页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第18-19页 |
| 2.5 小结 | 第19-20页 |
| 第三章 AKR1C3在四种细胞中mRNA水平的鉴定 | 第20-31页 |
| 3.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第21页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第21-22页 |
| 3.1.3 实时荧光定量PCR所用引物 | 第22页 |
| 3.1.4 溶液的配制 | 第22-23页 |
| 3.2 实验方法 | 第23-26页 |
| 3.2.1 细胞总RNA的提取与鉴定 | 第23-24页 |
| 3.2.2 cDNA的合成与鉴定 | 第24-26页 |
| 3.2.3 实时荧光定量PCR | 第26页 |
| 3.3 实验结果 | 第26-29页 |
| 3.3.1 细胞总RNA的提取与鉴定 | 第26-27页 |
| 3.3.2 cDNA的琼脂糖凝胶电泳的鉴定结果 | 第27-28页 |
| 3.3.3 实时荧光定量PCR结果 | 第28-29页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第29-30页 |
| 3.5 小结 | 第30-31页 |
| 第四章 AKR1C3在四种细胞中蛋白水平的鉴定 | 第31-46页 |
| 4.1 实验材料 | 第33-35页 |
| 4.1.1 细胞及菌株 | 第33页 |
| 4.1.2 实验动物 | 第33页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第33-34页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第34-35页 |
| 4.1.5 溶液的配置 | 第35页 |
| 4.2 实验方法 | 第35-41页 |
| 4.2.1 AKR1C3鼠多克隆抗体的制备 | 第35-39页 |
| 4.2.2 BCA法定量检测细胞中总蛋白含量 | 第39-41页 |
| 4.2.3 ELISA间接法测细胞中AKR1C3蛋白含量 | 第41页 |
| 4.3 实验结果 | 第41-45页 |
| 4.3.1 AKR1C3鼠多克隆抗体效价测定 | 第41-43页 |
| 4.3.2 BCA法定量检测细胞中总蛋白含量 | 第43-44页 |
| 4.3.3 ELISA间接法测细胞中AKR1C3蛋白含量 | 第44-45页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第45页 |
| 4.5 小结 | 第45-46页 |
| 第五章 AKR1C3酶抑制剂的筛选 | 第46-53页 |
| 5.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第46页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第46页 |
| 5.1.3 溶液的配制 | 第46-47页 |
| 5.2 实验内容 | 第47-48页 |
| 5.2.1 AKR1C3蛋白酶的表达与纯化 | 第47页 |
| 5.2.2 醛酮还原酶AKR1C3抑制剂的筛选 | 第47-48页 |
| 5.3 实验结果 | 第48-52页 |
| 5.3.1 醛酮还原酶AKR1C3纯化结果 | 第48-50页 |
| 5.3.2 醛酮还原酶AKR1C3抑制剂的筛选 | 第50-52页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第52页 |
| 5.5 小结 | 第52-53页 |
| 第六章 肝癌细胞抑制剂的筛选 | 第53-58页 |
| 6.1 实验材料 | 第53-55页 |
| 6.1.1 主要试剂 | 第53页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第53-54页 |
| 6.1.3 实验细胞 | 第54页 |
| 6.1.4 溶液的配制 | 第54-55页 |
| 6.2 实验内容 | 第55页 |
| 6.2.1 细胞培养 | 第55页 |
| 6.2.2 MTT细胞毒理实验 | 第55页 |
| 6.3 实验结果 | 第55-57页 |
| 6.3.1 不同抑制剂对肝癌细胞的抑制率 | 第55-57页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第57页 |
| 6.5 小结 | 第57-58页 |
| 总结 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
