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牛Nramp1基因表达载体的构建

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
文献综述第11-21页
 第一章 分支杆菌浸染机制与机体抗侵染机制研究第11-21页
   ·分支杆菌侵染机制第11-13页
     ·感染的形成第11-12页
     ·分支杆菌抗巨噬细胞杀伤机制第12-13页
   ·机体抵抗分支杆菌侵染机制第13-21页
     ·遗传因素与机体抵抗力的关系第14-16页
     ·参与对分支杆菌免疫应答的细胞第16-18页
     ·参与对分支杆菌免疫应答的细胞因子第18-21页
试验研究第21-49页
 第二章 牛NRAMP1 基因克隆与原核表达第21-31页
   ·材料第21-23页
     ·菌株和质粒第21页
     ·主要试剂第21-22页
     ·主要仪器第22页
     ·血液样品第22页
     ·引物合成第22-23页
   ·方法第23-27页
     ·感受态细胞的制备第23页
     ·总RNA 的提取第23页
     ·反转录反应第23-24页
     ·PCR 反应第24-25页
     ·目的DNA 回收第25页
     ·PCR 产物与克隆载体的连接与扩增第25页
     ·原核表达载体构建及鉴定第25-26页
     ·重组表达载体在大肠杆菌中的表达第26页
     ·Nramp1 原核表达产物的Western-blot 分析第26-27页
   ·结果第27-30页
     ·总RNA 的提取第27页
     ·目的片段的扩增第27-28页
     ·原核表达载体构建及鉴定第28-29页
     ·重组表达载体在大肠杆菌中的表达第29页
     ·表达产物的Western-blot 鉴定第29-30页
   ·讨论第30页
   ·小结第30-31页
 第三章 牛NRAMP1 真核表达载体的构建第31-41页
   ·材料第31-32页
     ·菌株和质粒第31页
     ·主要试剂第31页
     ·主要仪器第31页
     ·血液样品第31-32页
     ·引物合成第32页
   ·方法第32-35页
     ·Nramp1 真核表达载体的构建及鉴定第32-33页
     ·吞噬细胞特异性表达载体的构建与鉴定第33-35页
   ·结果第35-39页
     ·Nramp1 真核表达载体的构建及鉴定第35-37页
     ·吞噬细胞特异性表达载体的构建与鉴定第37-39页
     ·牛Nramp1 吞噬细胞特异性表达载体的构建与鉴定第39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-41页
 第四章 牛NRAMP1 N 端基因序列克隆与原核表达第41-49页
   ·材料第41-42页
     ·菌株和质粒第41页
     ·主要试剂第41页
     ·主要仪器第41页
     ·血液样品第41页
     ·引物合成第41-42页
   ·方法第42-43页
     ·总RNA 的提取第42页
     ·目的片段的克隆第42页
     ·原核表达载体构建及鉴定第42页
     ·重组表达载体在大肠杆菌中的表达第42-43页
     ·重组蛋白的纯化第43页
   ·试验结果第43-47页
     ·总RNA 的提取第43页
     ·目的片段的扩增第43-44页
     ·原核表达载体构建及鉴定第44-45页
     ·重组表达载体在大肠杆菌中的表达第45-47页
     ·重组蛋白的纯化第47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-57页
附录第57-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页

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