摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
文献综述 | 第11-21页 |
第一章 分支杆菌浸染机制与机体抗侵染机制研究 | 第11-21页 |
·分支杆菌侵染机制 | 第11-13页 |
·感染的形成 | 第11-12页 |
·分支杆菌抗巨噬细胞杀伤机制 | 第12-13页 |
·机体抵抗分支杆菌侵染机制 | 第13-21页 |
·遗传因素与机体抵抗力的关系 | 第14-16页 |
·参与对分支杆菌免疫应答的细胞 | 第16-18页 |
·参与对分支杆菌免疫应答的细胞因子 | 第18-21页 |
试验研究 | 第21-49页 |
第二章 牛NRAMP1 基因克隆与原核表达 | 第21-31页 |
·材料 | 第21-23页 |
·菌株和质粒 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·血液样品 | 第22页 |
·引物合成 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-27页 |
·感受态细胞的制备 | 第23页 |
·总RNA 的提取 | 第23页 |
·反转录反应 | 第23-24页 |
·PCR 反应 | 第24-25页 |
·目的DNA 回收 | 第25页 |
·PCR 产物与克隆载体的连接与扩增 | 第25页 |
·原核表达载体构建及鉴定 | 第25-26页 |
·重组表达载体在大肠杆菌中的表达 | 第26页 |
·Nramp1 原核表达产物的Western-blot 分析 | 第26-27页 |
·结果 | 第27-30页 |
·总RNA 的提取 | 第27页 |
·目的片段的扩增 | 第27-28页 |
·原核表达载体构建及鉴定 | 第28-29页 |
·重组表达载体在大肠杆菌中的表达 | 第29页 |
·表达产物的Western-blot 鉴定 | 第29-30页 |
·讨论 | 第30页 |
·小结 | 第30-31页 |
第三章 牛NRAMP1 真核表达载体的构建 | 第31-41页 |
·材料 | 第31-32页 |
·菌株和质粒 | 第31页 |
·主要试剂 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·血液样品 | 第31-32页 |
·引物合成 | 第32页 |
·方法 | 第32-35页 |
·Nramp1 真核表达载体的构建及鉴定 | 第32-33页 |
·吞噬细胞特异性表达载体的构建与鉴定 | 第33-35页 |
·结果 | 第35-39页 |
·Nramp1 真核表达载体的构建及鉴定 | 第35-37页 |
·吞噬细胞特异性表达载体的构建与鉴定 | 第37-39页 |
·牛Nramp1 吞噬细胞特异性表达载体的构建与鉴定 | 第39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第四章 牛NRAMP1 N 端基因序列克隆与原核表达 | 第41-49页 |
·材料 | 第41-42页 |
·菌株和质粒 | 第41页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·血液样品 | 第41页 |
·引物合成 | 第41-42页 |
·方法 | 第42-43页 |
·总RNA 的提取 | 第42页 |
·目的片段的克隆 | 第42页 |
·原核表达载体构建及鉴定 | 第42页 |
·重组表达载体在大肠杆菌中的表达 | 第42-43页 |
·重组蛋白的纯化 | 第43页 |
·试验结果 | 第43-47页 |
·总RNA 的提取 | 第43页 |
·目的片段的扩增 | 第43-44页 |
·原核表达载体构建及鉴定 | 第44-45页 |
·重组表达载体在大肠杆菌中的表达 | 第45-47页 |
·重组蛋白的纯化 | 第47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65页 |