| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 英文缩略语及注解 | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-20页 |
| 1.1 研究背景 | 第8-9页 |
| 1.1.1 帕金森症 | 第8页 |
| 1.1.2 帕金森症研究现状 | 第8-9页 |
| 1.2 PINK1研究背景 | 第9-11页 |
| 1.2.1 pink1基因简介 | 第9-10页 |
| 1.2.2 PINK1与帕金森症的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3 线粒体质量控制 | 第11-14页 |
| 1.3.1 线粒体质量控制简介 | 第11-12页 |
| 1.3.2 自噬简介 | 第12-14页 |
| 1.4 果蝇模式生物 | 第14-17页 |
| 1.4.1 果蝇作为模式生物的优势 | 第14页 |
| 1.4.2 果蝇遗传学重要工具 | 第14-15页 |
| 1.4.3 观察果蝇多巴胺神经元表型 | 第15-16页 |
| 1.4.4 果蝇翅膀表型 | 第16-17页 |
| 1.5 哺乳动物细胞模型的建立 | 第17页 |
| 1.6 CRISPR/Cas9的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.7 主要研究内容 | 第18-19页 |
| 1.8 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.1 材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 主要仪器、耗材 | 第20-21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-23页 |
| 2.2 主要实验步骤 | 第23-30页 |
| 2.2.1 DNA聚合酶链反应 | 第23-24页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶检测扩增产物 | 第24页 |
| 2.2.3 Western Blot流程 | 第24-25页 |
| 2.2.4 碱裂解法粗提质粒步骤 | 第25-26页 |
| 2.2.5 细胞培养及转染 | 第26-27页 |
| 2.2.6 果蝇饲养 | 第27-28页 |
| 2.2.7 果蝇大脑免疫流程 | 第28-30页 |
| 第三章 实验结果 | 第30-46页 |
| 3.1 GGF磷酸化位点的鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2 GGF磷酸化位点对GGF挽救pink1缺失引起的表型影响 | 第31-34页 |
| 3.2.1 观察果蝇多巴胺能神经元表型 | 第31-33页 |
| 3.2.2 观察果蝇翅膀表型 | 第33-34页 |
| 3.3 ggf基因对哺乳动物细胞系线粒体自噬的影响 | 第34-40页 |
| 3.3.1 ggf基因knock out重组载体构建 | 第34-36页 |
| 3.3.2 转染方法的比较 | 第36-37页 |
| 3.3.3 ggf基因的sgRNA位点打靶效率验证 | 第37-38页 |
| 3.3.4 ggf基因knock out单克隆细胞系的建立及鉴定 | 第38-40页 |
| 3.4 ggf基因knock out杂合细胞系的功能验证 | 第40-46页 |
| 3.4.1 GGF+/-杂合细胞系中GGF蛋白的表达量降低 | 第40-41页 |
| 3.4.2 GGF+/-细胞系可影响线粒体的形态 | 第41-42页 |
| 3.4.3 GGF+/-细胞系可影响线粒体的功能 | 第42-46页 |
| 第四章 结果讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 ggf磷酸化位点生物学意义 | 第46-47页 |
| 4.2 ggf基因knock out对细胞存活的影响 | 第47页 |
| 4.3 ggf基因knock out对线粒体质量控制的影响 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 个人简历 | 第56页 |
