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长链非编码RNA在吗啡成瘾及心肌缺血再灌注损伤中作用的初步探究

第一部分 长链非编码RNA参与吗啡成瘾的初步探究第7-45页
    中文摘要第7-9页
    ABSTRACT第9-12页
    缩略词表第12-13页
    前言第13-23页
        1. 吗啡第13-15页
            1.1 阿片类药物第13页
            1.2 吗啡及其副作用第13-15页
        2. lncRNA第15-21页
            2.1 lncRNA的特点第15-16页
            2.2 lncRNA的分类第16页
            2.3 lncRNA的宏观作用机制第16-18页
            2.4 lncRNA的生物学功能第18页
            2.5 lncRNA与生理病理第18页
            2.6 lncRNA与药物成瘾第18-20页
            2.7 lncRNA的研究技术和主要工具第20-21页
        3. 脑前额叶皮层和神经小胶质细胞第21-23页
    实验材料与方法第23-35页
        1. 实验材料第23页
        2. 试剂和耗材第23-24页
        3. 仪器设备第24页
        4. 主要溶液及试剂配方第24-26页
            4.1 BV2细胞培养用试剂第24-25页
            4.2 核酸电泳用试剂第25-26页
            4.3 DEPC水的配制第26页
        5. 实验方法第26-35页
            5.1 小鼠的饲养与管理第26页
            5.2 吗啡成瘾模型的建立第26-27页
            5.3 小鼠的脑部解剖及脑前额叶皮层的提取第27-28页
            5.4 RNA的提取第28-29页
            5.5 PCR实验第29-30页
            5.6 细胞培养第30-32页
            5.7 lncRNA芯片第32页
            5.8 统计学分析第32-35页
    实验结果第35-37页
        1. 吗啡依赖的小鼠体重减轻第35页
        2. 提取的吗啡成瘾小鼠脑前额叶皮层总RNA的质量符合后续实验要求第35页
        3. lncRNA芯片检测结果第35页
        4. 利用qRT-PCR法对脑前额叶皮层进行芯片结果的验证第35页
        5. 吗啡处理BV2细胞后提取的总RNA质量符合后续实验要求第35-36页
        6. BV2细胞系中qRT-PCR法对芯片结果的验证第36-37页
    讨论第37-39页
    附图第39-45页
第二部分 长链非编码RNA参与心肌缺血再灌注损伤的体外研究第45-77页
    中文摘要第45-47页
    ABSTRACT第47-49页
    缩略词表第49-51页
    前言第51-53页
    实验材料与方法第53-63页
        1. 实验材料第53页
        2. 试剂和耗材第53页
        3. 仪器设备第53-54页
        4. 主要溶液及试剂配方第54-57页
            4.1 H9c2细胞培养用试剂第54页
            4.2 SDS-PAGE用试剂第54-55页
            4.3 转膜用试剂第55-57页
        5. 实验方法第57-63页
            5.1 心肌缺血再灌注体外模型的建立第57页
            5.2 Western Blot实验第57-60页
            5.3 lncRNA高通量测序第60-63页
    实验结果第63-65页
        1. 缺氧再复氧后,细胞死亡增加第63页
        2. 缺氧再复氧诱导细胞凋亡第63页
        3. 缺氧再复氧明显诱导细胞自噬第63页
        4. 在缺氧处理8h时β-arrestin2和TLR-9蛋白表达水平较其它时间点变化大第63页
        5. 高通量测序检测出46个表达差异显著的mRNA转录本第63页
        6. 高通量测序检测出2个表达差异显著的已知lncRNA转录本第63页
        7. 高通量测序检测出1029个表达差异显著的新lncRNA转录本第63-64页
        8. 高通量测序检测出100个表达差异显著的基因及差异基因的KEGG生物通路富集分析和GO基因功能富集分析结果第64-65页
    讨论第65-67页
    附图第67-77页
第三部分 骨髓造血干细胞在约束应激引起的免疫抑制中的作用第77-101页
    中文摘要第77-79页
    ABSTRACT第79-81页
    缩略词表第81-83页
    前言第83-85页
    实验材料与方法第85-93页
        1. 实验材料第85页
        2. 试剂和耗材第85页
        3. 仪器设备第85页
        4. 主要溶液及试剂配方第85-86页
            4.1 造血干细胞和脾脏细胞提取过程中所需试剂第85-86页
            4.2 脾脏细胞培养用试剂第86页
            4.3 地塞米松储存液第86页
            4.4 PI单染实验用试剂第86页
        5. 实验方法第86-93页
            5.1 CD34+造血干细胞的提取第87-88页
            5.2 小鼠脾脏细胞的提取第88页
            5.3 CD34+造血干细胞的体内示踪实验第88-89页
            5.4 小鼠慢性约束应激模型的建立第89页
            5.5 脾脏细胞在体外与CD34+造血干细胞共培养第89页
            5.6 流式细胞术实验第89-93页
    实验结果第93-95页
        1. 约束应激3天,脾脏和骨髓中出现HSC细胞第93页
        2. 在体外HSC抑制脾脏细胞的坏死而非凋亡第93-95页
    讨论第95-97页
    附图第97-101页
参考文献第101-107页
致谢第107-109页
攻读学位期间发表的论文第109-110页
学位论文评阅及答辩情况表第110页

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