第一部分 长链非编码RNA参与吗啡成瘾的初步探究 | 第7-45页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-23页 |
1. 吗啡 | 第13-15页 |
1.1 阿片类药物 | 第13页 |
1.2 吗啡及其副作用 | 第13-15页 |
2. lncRNA | 第15-21页 |
2.1 lncRNA的特点 | 第15-16页 |
2.2 lncRNA的分类 | 第16页 |
2.3 lncRNA的宏观作用机制 | 第16-18页 |
2.4 lncRNA的生物学功能 | 第18页 |
2.5 lncRNA与生理病理 | 第18页 |
2.6 lncRNA与药物成瘾 | 第18-20页 |
2.7 lncRNA的研究技术和主要工具 | 第20-21页 |
3. 脑前额叶皮层和神经小胶质细胞 | 第21-23页 |
实验材料与方法 | 第23-35页 |
1. 实验材料 | 第23页 |
2. 试剂和耗材 | 第23-24页 |
3. 仪器设备 | 第24页 |
4. 主要溶液及试剂配方 | 第24-26页 |
4.1 BV2细胞培养用试剂 | 第24-25页 |
4.2 核酸电泳用试剂 | 第25-26页 |
4.3 DEPC水的配制 | 第26页 |
5. 实验方法 | 第26-35页 |
5.1 小鼠的饲养与管理 | 第26页 |
5.2 吗啡成瘾模型的建立 | 第26-27页 |
5.3 小鼠的脑部解剖及脑前额叶皮层的提取 | 第27-28页 |
5.4 RNA的提取 | 第28-29页 |
5.5 PCR实验 | 第29-30页 |
5.6 细胞培养 | 第30-32页 |
5.7 lncRNA芯片 | 第32页 |
5.8 统计学分析 | 第32-35页 |
实验结果 | 第35-37页 |
1. 吗啡依赖的小鼠体重减轻 | 第35页 |
2. 提取的吗啡成瘾小鼠脑前额叶皮层总RNA的质量符合后续实验要求 | 第35页 |
3. lncRNA芯片检测结果 | 第35页 |
4. 利用qRT-PCR法对脑前额叶皮层进行芯片结果的验证 | 第35页 |
5. 吗啡处理BV2细胞后提取的总RNA质量符合后续实验要求 | 第35-36页 |
6. BV2细胞系中qRT-PCR法对芯片结果的验证 | 第36-37页 |
讨论 | 第37-39页 |
附图 | 第39-45页 |
第二部分 长链非编码RNA参与心肌缺血再灌注损伤的体外研究 | 第45-77页 |
中文摘要 | 第45-47页 |
ABSTRACT | 第47-49页 |
缩略词表 | 第49-51页 |
前言 | 第51-53页 |
实验材料与方法 | 第53-63页 |
1. 实验材料 | 第53页 |
2. 试剂和耗材 | 第53页 |
3. 仪器设备 | 第53-54页 |
4. 主要溶液及试剂配方 | 第54-57页 |
4.1 H9c2细胞培养用试剂 | 第54页 |
4.2 SDS-PAGE用试剂 | 第54-55页 |
4.3 转膜用试剂 | 第55-57页 |
5. 实验方法 | 第57-63页 |
5.1 心肌缺血再灌注体外模型的建立 | 第57页 |
5.2 Western Blot实验 | 第57-60页 |
5.3 lncRNA高通量测序 | 第60-63页 |
实验结果 | 第63-65页 |
1. 缺氧再复氧后,细胞死亡增加 | 第63页 |
2. 缺氧再复氧诱导细胞凋亡 | 第63页 |
3. 缺氧再复氧明显诱导细胞自噬 | 第63页 |
4. 在缺氧处理8h时β-arrestin2和TLR-9蛋白表达水平较其它时间点变化大 | 第63页 |
5. 高通量测序检测出46个表达差异显著的mRNA转录本 | 第63页 |
6. 高通量测序检测出2个表达差异显著的已知lncRNA转录本 | 第63页 |
7. 高通量测序检测出1029个表达差异显著的新lncRNA转录本 | 第63-64页 |
8. 高通量测序检测出100个表达差异显著的基因及差异基因的KEGG生物通路富集分析和GO基因功能富集分析结果 | 第64-65页 |
讨论 | 第65-67页 |
附图 | 第67-77页 |
第三部分 骨髓造血干细胞在约束应激引起的免疫抑制中的作用 | 第77-101页 |
中文摘要 | 第77-79页 |
ABSTRACT | 第79-81页 |
缩略词表 | 第81-83页 |
前言 | 第83-85页 |
实验材料与方法 | 第85-93页 |
1. 实验材料 | 第85页 |
2. 试剂和耗材 | 第85页 |
3. 仪器设备 | 第85页 |
4. 主要溶液及试剂配方 | 第85-86页 |
4.1 造血干细胞和脾脏细胞提取过程中所需试剂 | 第85-86页 |
4.2 脾脏细胞培养用试剂 | 第86页 |
4.3 地塞米松储存液 | 第86页 |
4.4 PI单染实验用试剂 | 第86页 |
5. 实验方法 | 第86-93页 |
5.1 CD34+造血干细胞的提取 | 第87-88页 |
5.2 小鼠脾脏细胞的提取 | 第88页 |
5.3 CD34+造血干细胞的体内示踪实验 | 第88-89页 |
5.4 小鼠慢性约束应激模型的建立 | 第89页 |
5.5 脾脏细胞在体外与CD34+造血干细胞共培养 | 第89页 |
5.6 流式细胞术实验 | 第89-93页 |
实验结果 | 第93-95页 |
1. 约束应激3天,脾脏和骨髓中出现HSC细胞 | 第93页 |
2. 在体外HSC抑制脾脏细胞的坏死而非凋亡 | 第93-95页 |
讨论 | 第95-97页 |
附图 | 第97-101页 |
参考文献 | 第101-107页 |
致谢 | 第107-109页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第109-110页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第110页 |