| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第1章 引言 | 第11-22页 |
| 1.1 肠出血性大肠杆菌及检测技术研究概况 | 第11-16页 |
| 1.1.1 肠出血性大肠杆菌的特点及危害 | 第11-12页 |
| 1.1.2 肠出血性大肠杆菌的检测技术研究概况 | 第12-16页 |
| 1.2 适配体SELEX技术研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 SELEX技术以及适配体简介 | 第16页 |
| 1.2.2 适配体的特点 | 第16-17页 |
| 1.2.3 适配体的筛选方法 | 第17-19页 |
| 1.2.4 适配体的应用 | 第19-20页 |
| 1.3 立题意义与研究内容 | 第20-22页 |
| 1.3.1 课题的立题意义 | 第20-21页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-35页 |
| 2.1 实验材料与主要试剂 | 第22-25页 |
| 2.1.1 随机ssDNA文库及引物的合成 | 第22页 |
| 2.1.2 实验所用菌株 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂及溶液配制 | 第22-25页 |
| 2.2 实验仪器 | 第25页 |
| 2.3 实验原理 | 第25-26页 |
| 2.3.1 全菌消减SELEX技术原理 | 第25-26页 |
| 2.3.2 基于适配体的纳米磁颗粒荧光探针检测方法的原理 | 第26页 |
| 2.4 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.4.1 E.coli O157:H7 ssDNA适配体的筛选 | 第26-31页 |
| 2.4.2 E.coli O157:H7适配体序列分析 | 第31-33页 |
| 2.4.3 基于适配体的E.coli O157:H7检测方法的建立 | 第33-35页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第35-50页 |
| 3.1 E.coli O157:H7ssDNA适配体的筛选研究 | 第35-38页 |
| 3.1.1 引物特异性以及内源性干扰验证 | 第35页 |
| 3.1.2 全菌消减SELEX筛选条件的优化 | 第35页 |
| 3.1.3 肠出血性大肠杆菌O157:H7各轮筛选结果验证 | 第35-36页 |
| 3.1.4 肠出血性大肠杆菌O157:H7各轮筛选次级ssDNA制备 | 第36页 |
| 3.1.5 各轮筛选效率监测 | 第36-37页 |
| 3.1.6 重组质粒的粘端连接的转化结果 | 第37-38页 |
| 3.2 肠出血性大肠杆菌O157:H7适配体结构、亲和力与特异性分析 | 第38-47页 |
| 3.2.1 肠出血性大肠杆菌O157:H7适配体的同源性与二级结构分析 | 第38-43页 |
| 3.2.2 肠出血性大肠杆菌O157:H7适配体亲和性分析 | 第43-45页 |
| 3.2.3 肠出血性大肠杆菌O157:H7适配体的特异性分析 | 第45-47页 |
| 3.3 基于适配体的E.coli O157:H7检测 | 第47-50页 |
| 3.3.1 纳米磁珠与适配体A46偶联结果验证 | 第47页 |
| 3.3.2 基于适配体的E.coli O157:H7荧光检测线性关系和范围 | 第47-48页 |
| 3.3.3 实际样品中E.coli O157:H7加标回收检测 | 第48-50页 |
| 第4章 结论与展望 | 第50-52页 |
| 4.1 主要结论 | 第50页 |
| 4.2 不足与展望 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附图 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 综述 核酸适配体在微生物检测中的应用 | 第64-72页 |
| 参考文献 | 第69-72页 |
