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拟南芥叶绿素荧光相关突变体E1991的图位克隆及基因功能分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩写词(Abbreviation)第8-12页
1 前言第12-23页
    1.1 叶绿体的发育研究进展第12-13页
        1.1.1 叶绿体研究概述第12页
        1.1.2 多因素影响叶绿体发育第12-13页
    1.2 叶绿素的代谢第13-17页
        1.2.1 叶绿素的合成代谢第13-14页
        1.2.2 叶绿素的分解代谢第14-16页
        1.2.3 光合色素与植物衰老第16-17页
    1.3 光系统与能量代谢第17-19页
        1.3.1 光系统Ⅰ与光系统Ⅱ第17-18页
        1.3.2 非光化学淬灭第18-19页
    1.4 叶绿素荧光参数的研究进展第19-23页
        1.4.1 叶绿素荧光机理和测量第19-20页
        1.4.2 叶绿素荧光参数的生物学意义第20-23页
2 立题依据第23-24页
3 材料与方法第24-42页
    3.1 常用仪器第24页
    3.2 实验材料、载体和菌株第24-25页
        3.2.1 植物实验材料第24页
        3.2.2 实验载体与菌株第24-25页
    3.3 实验药品和试剂第25页
    3.4 常用培养基和溶液的配制第25-27页
        3.4.1 常用培养基的配制第25-26页
        3.4.2 溶液的配制第26-27页
        3.4.3 抗生素的配制第27页
    3.5 实验方法第27-42页
        3.5.1 拟南芥的培养第27-28页
        3.5.2 拟南芥的杂交第28页
        3.5.3 拟南芥DNA的提取第28-29页
        3.5.4 可溶性蛋白提取和含量的测定第29页
        3.5.5 可溶性总糖提取和含量的测定第29-30页
        3.5.6 叶绿素提取和含量的测定第30页
        3.5.7 Trizol法提取拟南芥RNA第30-31页
        3.5.8 反转录制备拟南芥cDNA第31页
        3.5.9 PCR引物的设计第31-33页
        3.5.10 载体构建与重组质粒的鉴定第33-34页
        3.5.11 琼脂糖凝胶的配制与回收第34-35页
        3.5.12 T-DNA插入突变体的纯合鉴定第35页
        3.5.13 大肠杆菌感受态细胞的制备第35-36页
        3.5.14 质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞第36-37页
        3.5.15 农杆菌感受态细胞的制备第37页
        3.5.16 质粒DNA转化农杆菌感受态细胞第37页
        3.5.17 重组菌落与质粒的鉴定第37-38页
        3.5.18 质粒DNA的小量提取第38页
        3.5.19 农杆菌侵染第38页
        3.5.20 转基因植株的筛选第38-39页
        3.5.21 GUS染色方法第39页
        3.5.22 图位克隆第39-40页
        3.5.23 瞬转第40-42页
4 结果与分析第42-55页
    4.1 突变体的获得第42页
    4.2 突变体的遗传学分析第42-43页
    4.3 突变体的图位克隆第43-46页
        4.3.1 F2代分离群体的构建第43-44页
        4.3.2 基因粗定位结果第44页
        4.3.3 基因细定位结果第44-45页
        4.3.4 基因测序结果第45-46页
        4.3.5 Salk line突变体表型分析第46页
    4.4 突变体E1991的发育表型第46-49页
        4.4.1 E1991突变体与Col-0 野生型叶绿素含量的测定第46-47页
        4.4.2 E1991突变体与Col-0 野生型可溶性蛋白含量的测定第47页
        4.4.3 E1991突变体与Col-0 野生型可溶性总糖含量的测定第47-48页
        4.4.4 ABA处理下的萌发差异第48-49页
        4.4.5 相关基因的表达分析第49页
    4.5 回补载体的构建与回补植株的筛选第49-51页
        4.5.1 回补载体E1991::pCAMBIA1300-COM的构建第49-50页
        4.5.2 回补植株的筛选第50页
        4.5.3 回补植株的表型分析第50-51页
    4.6 超表达载体E1991::p-S1300+的构建第51页
    4.7 E1991::GFP载体的构建第51-53页
        4.7.1 E1991::pHBT-GFP-NOS载体的构建及原生质体转化第51-52页
        4.7.2 E1991::S1300+-GFP载体的构建及原生质体转化第52-53页
    4.8 E1991::pCAMBIA1391-GUS载体的构建第53页
    4.9 蛋白原核表达载体的构建第53-55页
5 讨论第55-57页
结论第57-58页
参考文献第58-65页
致谢第65-66页

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