摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩写词(Abbreviation) | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 叶绿体的发育研究进展 | 第12-13页 |
1.1.1 叶绿体研究概述 | 第12页 |
1.1.2 多因素影响叶绿体发育 | 第12-13页 |
1.2 叶绿素的代谢 | 第13-17页 |
1.2.1 叶绿素的合成代谢 | 第13-14页 |
1.2.2 叶绿素的分解代谢 | 第14-16页 |
1.2.3 光合色素与植物衰老 | 第16-17页 |
1.3 光系统与能量代谢 | 第17-19页 |
1.3.1 光系统Ⅰ与光系统Ⅱ | 第17-18页 |
1.3.2 非光化学淬灭 | 第18-19页 |
1.4 叶绿素荧光参数的研究进展 | 第19-23页 |
1.4.1 叶绿素荧光机理和测量 | 第19-20页 |
1.4.2 叶绿素荧光参数的生物学意义 | 第20-23页 |
2 立题依据 | 第23-24页 |
3 材料与方法 | 第24-42页 |
3.1 常用仪器 | 第24页 |
3.2 实验材料、载体和菌株 | 第24-25页 |
3.2.1 植物实验材料 | 第24页 |
3.2.2 实验载体与菌株 | 第24-25页 |
3.3 实验药品和试剂 | 第25页 |
3.4 常用培养基和溶液的配制 | 第25-27页 |
3.4.1 常用培养基的配制 | 第25-26页 |
3.4.2 溶液的配制 | 第26-27页 |
3.4.3 抗生素的配制 | 第27页 |
3.5 实验方法 | 第27-42页 |
3.5.1 拟南芥的培养 | 第27-28页 |
3.5.2 拟南芥的杂交 | 第28页 |
3.5.3 拟南芥DNA的提取 | 第28-29页 |
3.5.4 可溶性蛋白提取和含量的测定 | 第29页 |
3.5.5 可溶性总糖提取和含量的测定 | 第29-30页 |
3.5.6 叶绿素提取和含量的测定 | 第30页 |
3.5.7 Trizol法提取拟南芥RNA | 第30-31页 |
3.5.8 反转录制备拟南芥cDNA | 第31页 |
3.5.9 PCR引物的设计 | 第31-33页 |
3.5.10 载体构建与重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
3.5.11 琼脂糖凝胶的配制与回收 | 第34-35页 |
3.5.12 T-DNA插入突变体的纯合鉴定 | 第35页 |
3.5.13 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
3.5.14 质粒DNA转化大肠杆菌感受态细胞 | 第36-37页 |
3.5.15 农杆菌感受态细胞的制备 | 第37页 |
3.5.16 质粒DNA转化农杆菌感受态细胞 | 第37页 |
3.5.17 重组菌落与质粒的鉴定 | 第37-38页 |
3.5.18 质粒DNA的小量提取 | 第38页 |
3.5.19 农杆菌侵染 | 第38页 |
3.5.20 转基因植株的筛选 | 第38-39页 |
3.5.21 GUS染色方法 | 第39页 |
3.5.22 图位克隆 | 第39-40页 |
3.5.23 瞬转 | 第40-42页 |
4 结果与分析 | 第42-55页 |
4.1 突变体的获得 | 第42页 |
4.2 突变体的遗传学分析 | 第42-43页 |
4.3 突变体的图位克隆 | 第43-46页 |
4.3.1 F2代分离群体的构建 | 第43-44页 |
4.3.2 基因粗定位结果 | 第44页 |
4.3.3 基因细定位结果 | 第44-45页 |
4.3.4 基因测序结果 | 第45-46页 |
4.3.5 Salk line突变体表型分析 | 第46页 |
4.4 突变体E1991的发育表型 | 第46-49页 |
4.4.1 E1991突变体与Col-0 野生型叶绿素含量的测定 | 第46-47页 |
4.4.2 E1991突变体与Col-0 野生型可溶性蛋白含量的测定 | 第47页 |
4.4.3 E1991突变体与Col-0 野生型可溶性总糖含量的测定 | 第47-48页 |
4.4.4 ABA处理下的萌发差异 | 第48-49页 |
4.4.5 相关基因的表达分析 | 第49页 |
4.5 回补载体的构建与回补植株的筛选 | 第49-51页 |
4.5.1 回补载体E1991::pCAMBIA1300-COM的构建 | 第49-50页 |
4.5.2 回补植株的筛选 | 第50页 |
4.5.3 回补植株的表型分析 | 第50-51页 |
4.6 超表达载体E1991::p-S1300+的构建 | 第51页 |
4.7 E1991::GFP载体的构建 | 第51-53页 |
4.7.1 E1991::pHBT-GFP-NOS载体的构建及原生质体转化 | 第51-52页 |
4.7.2 E1991::S1300+-GFP载体的构建及原生质体转化 | 第52-53页 |
4.8 E1991::pCAMBIA1391-GUS载体的构建 | 第53页 |
4.9 蛋白原核表达载体的构建 | 第53-55页 |
5 讨论 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
致谢 | 第65-66页 |