中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
引言 | 第11-15页 |
第一部分 健脾益气方对肝癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响 | 第15-42页 |
第一节 人肝癌细胞SMMC-7721 EMT模型的制备 | 第15-25页 |
1 材料 | 第15-16页 |
1.1 人肝癌细胞株 | 第15页 |
1.2 主要试剂及材料 | 第15页 |
1.3 主要仪器设备 | 第15-16页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第16页 |
2 方法 | 第16-20页 |
2.1 细胞常规培养及处理 | 第16-18页 |
2.2 TGF-β1 的溶解 | 第18页 |
2.3 采用MTT法(四甲基偶氮唑盐比色法)观察TGF-β1 干预对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第18-19页 |
2.4 采用Transwell细胞体外侵袭实验观察TGF-β1 干预对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第19-20页 |
2.5 采用HE(苏木素-伊红)染色法观察SMMC-7721 EMT模型细胞形态 | 第20页 |
2.6 统计方法 | 第20页 |
3 结果 | 第20-23页 |
3.1 TGF-β1 干预对SMMC-7721 细胞增殖能力的影响 | 第20-21页 |
3.2 TGF-β1 干预对SMMC-7721 细胞侵袭能力的影响 | 第21-22页 |
3.3 SMMC-7721 EMT模型细胞形态学的改变 | 第22-23页 |
4 讨论 | 第23-25页 |
第二节 筛选最佳健脾益气方含药血清浓度 | 第25-31页 |
1 材料 | 第25-26页 |
1.1 实验动物 | 第25页 |
1.2 实验药物 | 第25页 |
1.3 主要试剂及材料 | 第25页 |
1.4 主要仪器设备 | 第25-26页 |
2 方法 | 第26-28页 |
2.1 健脾益气方含药血清的制备 | 第26页 |
2.2 MTT法检测细胞增殖抑制率 | 第26-27页 |
2.3 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭抑制率 | 第27页 |
2.4 统计方法 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-30页 |
3.1 健脾益气方含药血清对SMMC-7721 EMT模型细胞增殖的抑制作用 | 第28页 |
3.2 健脾益气方含药血清对SMMC-7721 EMT模型细胞侵袭的抑制作用 | 第28-30页 |
4 讨论 | 第30-31页 |
第三节 健脾益气方对SMMC-7721 EMT模型细胞增殖、侵袭和凋亡的影响 | 第31-42页 |
1 材料 | 第31-32页 |
1.1 主要试剂及材料 | 第31页 |
1.2 主要仪器设备 | 第31-32页 |
2 方法 | 第32-35页 |
2.1 WFA、Z-VAD-FMK储备液的制备 | 第32页 |
2.2 实验分组及处理 | 第32-33页 |
2.3 采用MTT法检测各实验组药物处理后肝癌细胞增殖能力的差异. | 第33页 |
2.4 采用Transwell细胞体外侵袭实验检测各实验组药物处理后肝癌细胞侵袭能力的差异 | 第33-34页 |
2.5 采用Annexin V + PI双染色法通过流式细胞仪对可能存在的细胞凋亡现象和细胞存活比例进行检测 | 第34页 |
2.6 统计方法 | 第34-35页 |
3 结果 | 第35-37页 |
健脾益气方含药血清对EMT模型细胞增殖、侵袭及凋亡的影响 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-41页 |
5 小结 | 第41-42页 |
第二部分 健脾益气方下调Vimentin对肝癌细胞Caspase-3 凋亡途径的影响 | 第42-53页 |
1 材料 | 第42-44页 |
1.1 主要试剂及材料 | 第42页 |
1.2 主要仪器设备 | 第42-43页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-47页 |
2.1 Western blot检测各实验组Vimentin、Caspase-3 与PARP-1 的蛋白水平 | 第44-47页 |
2.2 统计方法 | 第47页 |
3 结果 | 第47-50页 |
健脾益气方含药血清对EMT模型细胞Vimentin、Caspase-3 与PARP-1蛋白水平的影响 | 第47-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
5 小结 | 第52-53页 |
第三部分 健脾益气方下调Vimentin对肝癌细胞NLRP3/Caspase-1 炎症信号的影响 | 第53-62页 |
1 材料 | 第53-55页 |
1.1 主要试剂及材料 | 第53-54页 |
1.2 主要仪器设备 | 第54页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第54-55页 |
2 方法 | 第55-57页 |
2.1 Western blot检测各实验组Vimentin、NLRP3与Caspase-1 的蛋白水平 | 第55-57页 |
2.2 统计方法 | 第57页 |
3 结果 | 第57-59页 |
健脾益气方含药血清对EMT模型细胞Vimentin、NLRP3与Caspase-1蛋白水平的影响 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-61页 |
5 小结 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
创新点与展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
缩略词表 | 第70-71页 |
综述 | 第71-81页 |
参考文献 | 第76-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 | 第82页 |