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荭草苷基于自噬网络调控的抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的分子机制研究

摘要第4-10页
ABSTRACT第10-16页
缩略语中英文对照第34-36页
第一章 绪论第36-54页
    一、细胞自噬的概述第37-42页
        1. 细胞自噬的定义和生理意义第37-38页
        2. 细胞自噬的分类第38-39页
        3. 细胞自噬的发生过程及相关分子机制第39-42页
    二、细胞自噬在心肌缺血再灌注损伤中的“双刃剑”作用及相关信号通路第42-48页
        1. 自噬在MIRI中的“双刃剑”作用第42-43页
        2. PI3K-Akt-mTOR通路对mTOR/自噬互反馈的关键调控作用第43-45页
        3. Beclin 1与Bcl-2/Bcl-XL的相互作用对自噬/凋亡互反馈的关键调控作用第45-48页
    三、本课题的研究背景、意义、前期研究基础及主要内容第48-54页
        1. 选题背景及意义第48-49页
        2. 前期研究基础第49-53页
        3. 研究的主要内容与技术手段第53-54页
第二章 荭草苷抗大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的药效学研究第54-76页
    引言第54-55页
    第一节 实验材料第55-58页
        一、实验动物第55页
        二、实验主要仪器和设备第55-56页
        三、主要药品及试剂第56-57页
        四、主要试剂的配制第57-58页
    第二节 实验方法第58-64页
        一、大鼠乳鼠心肌细胞的培养第58-59页
        二、心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的建立第59页
        三、实验分组第59页
        四、观察指标及检测方法第59-64页
    第三节 实验结果第64-70页
        一、大鼠乳鼠心肌细胞免疫荧光鉴定结果第64页
        二、光学显微镜下心肌细胞形态学观察结果第64-66页
        三、荭草苷对心肌细胞毒性实验结果第66页
        四、荭草苷对缺氧/复氧损伤心肌细胞活力的影响第66-67页
        五、荭草苷对缺氧/复氧损伤引起的心肌细胞心肌酶释放的影响第67-68页
        六、荭草苷对缺氧/复氧损伤引起的心肌细胞超微结构改变的影响第68-70页
    第四节 分析与讨论第70-74页
    第五节 小结第74-76页
第三章 荭草苷对缺氧/复氧损伤心肌细胞自噬与凋亡的影响第76-106页
    引言第76-77页
    第一节 实验材料第77-81页
        一、实验动物第77页
        二、实验主要仪器和设备第77-78页
        三、主要药品及试剂第78-80页
        四、主要试剂的配制第80-81页
    第二节 实验方法第81-91页
        一、大鼠乳鼠心肌细胞的培养第81-82页
        二、心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的建立第82页
        三、实验分组第82页
        四、观察指标及检测方法第82-91页
    第三节 实验结果第91-100页
        一、流式细胞仪检测心肌细胞凋亡第91-92页
        二、TUNEL法检测心肌细胞凋亡第92-93页
        三、Western Blot法检测心肌细胞Bcl-2和Bcl-XL的蛋白表达水平第93-95页
        四、电镜检测心肌细胞内自噬体第95-96页
        五、心肌细胞内LC3免疫荧光染色结果第96-98页
        六、Western Blot法检测心肌细胞内LC3和Beclin 1蛋白表达水平第98-100页
    第四节 分析与讨论第100-104页
    第五节 小结第104-106页
第四章 荭草苷基于mTOR相关信号通路的抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的分子机制研究第106-126页
    引言第106-107页
    第一节 实验材料第107-111页
        一、实验动物第107页
        二、实验主要仪器和设备第107-108页
        三、主要药品及试剂第108-110页
        四、主要试剂的配制第110-111页
    第二节 实验方法第111-116页
        一、大鼠乳鼠心肌细胞的培养第111页
        二、心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的建立第111页
        三、实验分组第111-112页
        四、观察指标及检测方法第112-116页
    第三节 实验结果第116-122页
        一、Western Blot法检测Akt及其磷酸化水平第116-118页
        二、Western Blot法检测mTOR、Raptor、p70S6K及其磷酸化水平第118-120页
        三、Western Blot法检测AMPK及其磷酸化水平第120-121页
        四、Western Blot法检测Rictor蛋白表达水平第121-122页
    第四节 分析与讨论第122-125页
    第五节 小结第125-126页
第五章 荭草苷基于Beclin 1/Bcl-2相互作用的抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的分子机制研究第126-154页
    引言第126-127页
    第一节 实验材料第127-132页
        一、实验动物第127页
        二、实验主要仪器和设备第127-128页
        三、主要药品及试剂第128-130页
        四、主要试剂的配制第130-132页
    第二节 实验方法第132-143页
        一、大鼠乳鼠心肌细胞的培养第132页
        二、心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的建立第132页
        三、实验分组第132页
        四、观察指标及检测方法第132-143页
    第三节 实验结果第143-151页
        一、实时荧光定量PCR法检测beclin 1基因的mRNA表达水平第143-146页
        二、Western Blot法检测Beclin 1、Bcl-2和Bcl-XL的磷酸化水平第146-150页
        三、免疫共沉淀法检测内质网上Beclin 1与Bcl-2的相互作用第150-151页
    第四节 分析与讨论第151-153页
    第五节 小结第153-154页
全文总结第154-158页
参考文献第158-174页
致谢第174-176页
攻读学位期间发表的学术论文目录第176页

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