摘要 | 第4-10页 |
ABSTRACT | 第10-16页 |
缩略语中英文对照 | 第34-36页 |
第一章 绪论 | 第36-54页 |
一、细胞自噬的概述 | 第37-42页 |
1. 细胞自噬的定义和生理意义 | 第37-38页 |
2. 细胞自噬的分类 | 第38-39页 |
3. 细胞自噬的发生过程及相关分子机制 | 第39-42页 |
二、细胞自噬在心肌缺血再灌注损伤中的“双刃剑”作用及相关信号通路 | 第42-48页 |
1. 自噬在MIRI中的“双刃剑”作用 | 第42-43页 |
2. PI3K-Akt-mTOR通路对mTOR/自噬互反馈的关键调控作用 | 第43-45页 |
3. Beclin 1与Bcl-2/Bcl-XL的相互作用对自噬/凋亡互反馈的关键调控作用 | 第45-48页 |
三、本课题的研究背景、意义、前期研究基础及主要内容 | 第48-54页 |
1. 选题背景及意义 | 第48-49页 |
2. 前期研究基础 | 第49-53页 |
3. 研究的主要内容与技术手段 | 第53-54页 |
第二章 荭草苷抗大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的药效学研究 | 第54-76页 |
引言 | 第54-55页 |
第一节 实验材料 | 第55-58页 |
一、实验动物 | 第55页 |
二、实验主要仪器和设备 | 第55-56页 |
三、主要药品及试剂 | 第56-57页 |
四、主要试剂的配制 | 第57-58页 |
第二节 实验方法 | 第58-64页 |
一、大鼠乳鼠心肌细胞的培养 | 第58-59页 |
二、心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的建立 | 第59页 |
三、实验分组 | 第59页 |
四、观察指标及检测方法 | 第59-64页 |
第三节 实验结果 | 第64-70页 |
一、大鼠乳鼠心肌细胞免疫荧光鉴定结果 | 第64页 |
二、光学显微镜下心肌细胞形态学观察结果 | 第64-66页 |
三、荭草苷对心肌细胞毒性实验结果 | 第66页 |
四、荭草苷对缺氧/复氧损伤心肌细胞活力的影响 | 第66-67页 |
五、荭草苷对缺氧/复氧损伤引起的心肌细胞心肌酶释放的影响 | 第67-68页 |
六、荭草苷对缺氧/复氧损伤引起的心肌细胞超微结构改变的影响 | 第68-70页 |
第四节 分析与讨论 | 第70-74页 |
第五节 小结 | 第74-76页 |
第三章 荭草苷对缺氧/复氧损伤心肌细胞自噬与凋亡的影响 | 第76-106页 |
引言 | 第76-77页 |
第一节 实验材料 | 第77-81页 |
一、实验动物 | 第77页 |
二、实验主要仪器和设备 | 第77-78页 |
三、主要药品及试剂 | 第78-80页 |
四、主要试剂的配制 | 第80-81页 |
第二节 实验方法 | 第81-91页 |
一、大鼠乳鼠心肌细胞的培养 | 第81-82页 |
二、心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的建立 | 第82页 |
三、实验分组 | 第82页 |
四、观察指标及检测方法 | 第82-91页 |
第三节 实验结果 | 第91-100页 |
一、流式细胞仪检测心肌细胞凋亡 | 第91-92页 |
二、TUNEL法检测心肌细胞凋亡 | 第92-93页 |
三、Western Blot法检测心肌细胞Bcl-2和Bcl-XL的蛋白表达水平 | 第93-95页 |
四、电镜检测心肌细胞内自噬体 | 第95-96页 |
五、心肌细胞内LC3免疫荧光染色结果 | 第96-98页 |
六、Western Blot法检测心肌细胞内LC3和Beclin 1蛋白表达水平 | 第98-100页 |
第四节 分析与讨论 | 第100-104页 |
第五节 小结 | 第104-106页 |
第四章 荭草苷基于mTOR相关信号通路的抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的分子机制研究 | 第106-126页 |
引言 | 第106-107页 |
第一节 实验材料 | 第107-111页 |
一、实验动物 | 第107页 |
二、实验主要仪器和设备 | 第107-108页 |
三、主要药品及试剂 | 第108-110页 |
四、主要试剂的配制 | 第110-111页 |
第二节 实验方法 | 第111-116页 |
一、大鼠乳鼠心肌细胞的培养 | 第111页 |
二、心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的建立 | 第111页 |
三、实验分组 | 第111-112页 |
四、观察指标及检测方法 | 第112-116页 |
第三节 实验结果 | 第116-122页 |
一、Western Blot法检测Akt及其磷酸化水平 | 第116-118页 |
二、Western Blot法检测mTOR、Raptor、p70S6K及其磷酸化水平 | 第118-120页 |
三、Western Blot法检测AMPK及其磷酸化水平 | 第120-121页 |
四、Western Blot法检测Rictor蛋白表达水平 | 第121-122页 |
第四节 分析与讨论 | 第122-125页 |
第五节 小结 | 第125-126页 |
第五章 荭草苷基于Beclin 1/Bcl-2相互作用的抗心肌细胞缺氧/复氧损伤的分子机制研究 | 第126-154页 |
引言 | 第126-127页 |
第一节 实验材料 | 第127-132页 |
一、实验动物 | 第127页 |
二、实验主要仪器和设备 | 第127-128页 |
三、主要药品及试剂 | 第128-130页 |
四、主要试剂的配制 | 第130-132页 |
第二节 实验方法 | 第132-143页 |
一、大鼠乳鼠心肌细胞的培养 | 第132页 |
二、心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的建立 | 第132页 |
三、实验分组 | 第132页 |
四、观察指标及检测方法 | 第132-143页 |
第三节 实验结果 | 第143-151页 |
一、实时荧光定量PCR法检测beclin 1基因的mRNA表达水平 | 第143-146页 |
二、Western Blot法检测Beclin 1、Bcl-2和Bcl-XL的磷酸化水平 | 第146-150页 |
三、免疫共沉淀法检测内质网上Beclin 1与Bcl-2的相互作用 | 第150-151页 |
第四节 分析与讨论 | 第151-153页 |
第五节 小结 | 第153-154页 |
全文总结 | 第154-158页 |
参考文献 | 第158-174页 |
致谢 | 第174-176页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第176页 |