| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-30页 |
| 1.1 荧光蛋白 | 第11-20页 |
| 1.1.1 荧光蛋白的发展历程 | 第11-12页 |
| 1.1.2 荧光蛋白发光机理 | 第12-14页 |
| 1.1.3 荧光蛋白的应用 | 第14-20页 |
| 1.2 荧光蛋白模拟物 | 第20-24页 |
| 1.2.1 荧光蛋白模拟物及其发展 | 第20页 |
| 1.2.2 荧光蛋白模拟物的种类 | 第20-24页 |
| 1.2.3 荧光蛋白模拟物的意义 | 第24页 |
| 1.3 细胞膜成像 | 第24-29页 |
| 1.3.1 细胞膜结构与功能 | 第24-25页 |
| 1.3.2 细胞膜的生物意义 | 第25页 |
| 1.3.3 细胞膜成像应用 | 第25-29页 |
| 1.4 本文构思 | 第29-30页 |
| 第2章 Split-GFP构建及应用探索 | 第30-44页 |
| 2.1 前言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料 | 第30-32页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第31页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第31页 |
| 2.2.3 培养基制备 | 第31-32页 |
| 2.2.4 实验溶液及缓冲溶液的制备 | 第32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-38页 |
| 2.3.1 超折叠绿色荧光蛋白质粒模板的合成 | 第32-33页 |
| 2.3.2 pCold-sfgfp1-11的质粒构建 | 第33-35页 |
| 2.3.3 重组质粒pCold-sfgp1-9及pCold-sfgfp-10的构建 | 第35-36页 |
| 2.3.4 sfGFP1-11、sfGFP1-9及sfGFP1-10的表达与纯化 | 第36-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-43页 |
| 2.4.1 pCold-[sfgfp1-11、sfgfp1-9及sfgfp1-10]的构建 | 第38-40页 |
| 2.4.2 sfGFP1-11、sfGFP1-9及sfGFP1-10蛋白表达及基本性质 | 第40-41页 |
| 2.4.3 sfGFP1-9及sfGFP1-10与S-peptide的复合验证 | 第41-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 第3章 荧光蛋白模拟物在细胞膜的成像探究 | 第44-55页 |
| 3.1 前言 | 第44-45页 |
| 3.2 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第45页 |
| 3.2.2 实验材料试剂 | 第45-46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.3.1 实验细胞培养 | 第46-47页 |
| 3.3.2 细胞毒性实验 | 第47页 |
| 3.3.3 激光共聚焦成像实验 | 第47-48页 |
| 3.3.4 细胞流式实验 | 第48页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第48-53页 |
| 3.4.1 红色荧光蛋白模拟物RMFP | 第48-49页 |
| 3.4.2 基于胆固醇的RMFP成像实验 | 第49-50页 |
| 3.4.3 基于核酸适配体的RMFP成像实验 | 第50-53页 |
| 3.5 本章小结 | 第53-55页 |
| 第4章 荧光蛋白模拟物在细胞膜上的应用 | 第55-68页 |
| 4.1 前言 | 第55页 |
| 4.2 实验部分 | 第55-56页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第56页 |
| 4.2.2 实验材料试剂 | 第56页 |
| 4.3 实验方法 | 第56-63页 |
| 4.3.1 Human PTK-7表达质粒的构建 | 第56-60页 |
| 4.3.2 pDisplay-egfp表达质粒的构建 | 第60页 |
| 4.3.3 实验细胞培养 | 第60页 |
| 4.3.4 细胞转染实验 | 第60-61页 |
| 4.3.5 细胞及组织成像实验 | 第61-62页 |
| 4.3.6 荧光定量PCR实验 | 第62-63页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第63-66页 |
| 4.4.1 质粒的构建及转染 | 第63-64页 |
| 4.4.2 膜蛋白PTK7表达及检测 | 第64-65页 |
| 4.4.3 细胞共定位与持续荧光成像实验 | 第65-66页 |
| 4.4.4 细胞与组织双光子荧光成像 | 第66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-68页 |
| 总结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
