摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一部分 Vero细胞无血清培养基的筛选 | 第8-30页 |
前言 | 第8-11页 |
1. 实验材料 | 第11-12页 |
1.1 细胞株 | 第11页 |
1.2 主要试剂 | 第11-12页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第12页 |
2. 实验方法 | 第12-17页 |
2.1 Vero细胞有血清培养 | 第12-13页 |
2.2 Vero细胞无血清适应 | 第13页 |
2.3 无血清Vero细胞冻存 | 第13-14页 |
2.4 Vero细胞无血清培养基的研制 | 第14-16页 |
2.5 柠檬酸铁替代转铁蛋白 | 第16页 |
2.6 无血清培养基培养SFM-Vero细胞的分析 | 第16-17页 |
3. 结果分析 | 第17-27页 |
3.0 添加成分的确定 | 第17-18页 |
3.1 转铁蛋白替代后SFM-Vero细胞的生长情况 | 第18-19页 |
3.2 不同无血清培养基中SFM-Vero细胞的形态观察 | 第19-23页 |
3.3 SFM-Vero细胞在不同培养基中的生长曲线 | 第23-24页 |
3.4 SFM-Vero细胞传代稳定性试验 | 第24-25页 |
3.5 SFM-Vero细胞在不同无血清培养基中对葡萄糖的代谢 | 第25-26页 |
3.6 SFM-Vero细胞在不同无血清培养基中氨的生成情况 | 第26-27页 |
4. 讨论 | 第27-29页 |
5. 小结 | 第29-30页 |
第二部分 H5N1亚型流感病毒的无血清Vero细胞培养 | 第30-55页 |
前言 | 第30-32页 |
1. 实验材料 | 第32-34页 |
1.1 细胞株 | 第32页 |
1.2 病毒毒株 | 第32-33页 |
1.3 菌种 | 第33页 |
1.4 主要试剂 | 第33页 |
1.5 生物学软件及网站 | 第33页 |
1.6 主要仪器和设备 | 第33-34页 |
2. 实验方法 | 第34-41页 |
2.1 H5N1在SFM-Vero细胞上的培养 | 第34页 |
2.2 病毒滴定 | 第34-35页 |
2.3 SFM-Vero细胞培养H5N1条件的优化 | 第35-37页 |
2.4 H5N1感染SFM-Vero细胞的免疫荧光试验 | 第37-38页 |
2.5 H5N1稳定性研究 | 第38-41页 |
3. 结果分析 | 第41-52页 |
3.1 Box-Behnken试验结果 | 第41-45页 |
3.2 SFM-Vero胞龄对培养H5N1的影响结果 | 第45-46页 |
3.3 病毒培养温度对H5N1产量的影响结果 | 第46-47页 |
3.4 补加TPCK-Trypsin对H5N1产量的影响结果 | 第47-48页 |
3.5 病毒感染SFM-Vero细胞的免疫荧光观察 | 第48-49页 |
3.6 H5N1亚型流感病毒稳定性研究结果 | 第49-52页 |
4. 讨论 | 第52-54页 |
5. 小结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录Ⅰ 缩略语表 | 第61-63页 |
附录Ⅱ 基本实验操作 | 第63-68页 |
附录Ⅲ 溶液配制 | 第68-74页 |
附录Ⅳ A/Anhui/1/2005(H5N1)va病毒HA和NA碱基序列比对 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
个人简历 | 第77-78页 |