| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| 1.1 自交不亲和性的概述 | 第9-10页 |
| 1.2 自交不亲和的分类 | 第10-13页 |
| 1.3 自交不亲和的分子机理 | 第13-16页 |
| 1.4 花粉与柱头的识别反应 | 第16-19页 |
| 1.5 甘蓝型油菜自交不亲和性的研究和应用 | 第19-21页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第22页 |
| 2.2 研究方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 油菜柱头总RNA的抽提及检测 | 第22-23页 |
| 2.2.2 RT-PCR及Real time-PCR | 第23-24页 |
| 2.2.2.1 cDNA第一条链合成 | 第23页 |
| 2.2.2.2 RT-PCR 反应 | 第23页 |
| 2.2.2.3 Real-time PCR | 第23-24页 |
| 2.2.3 PCR反应及片段的克隆，测序 | 第24-26页 |
| 2.2.3.1 PCR反应体系及片段回收 | 第24-25页 |
| 2.2.3.2 E. coli感受态细胞制备 | 第25页 |
| 2.2.3.3 片段连接转化 | 第25-26页 |
| 2.2.3.4 重组子的筛选与测序 | 第26页 |
| 2.2.4 干涉载体构建 | 第26-27页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的油菜遗传转化 | 第27-29页 |
| 2.2.6 油菜DNA提取 | 第29页 |
| 2.2.7 花粉萌发观察 | 第29-30页 |
| 2.3 转录组测序 | 第30-31页 |
| 2.3.1 cDNA文库构建和Solexa/Illumina测序 | 第30页 |
| 2.3.2 转录组数据处理 | 第30页 |
| 2.3.3 DEGs的分析与注释 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-53页 |
| 3.1 转录组的分析及挖掘 | 第31-48页 |
| 3.1.1 ‘Westar’的授粉特性 | 第31-32页 |
| 3.1.2 转录组的数据的处理及比对的结果 | 第32页 |
| 3.1.3 基因的差异表达分析 | 第32-34页 |
| 3.1.4 差异表达基因的GO注释与富集分析 | 第34-48页 |
| 3.1.4.1 差异表达基因的GO注释 | 第34-38页 |
| 3.1.4.2 差异表达基因的富集分析 | 第38-40页 |
| 3.1.4.3 蛋白激酶类基因和泛素化相关基因的鉴定及分析 | 第40-41页 |
| 3.1.4.4 转录因子的鉴定及分析 | 第41-43页 |
| 3.1.4.5 柱头优势表达基因的鉴定及分析 | 第43-45页 |
| 3.1.4.6 CPRs相关基因的鉴定及分析 | 第45-48页 |
| 3.2 QRT-PCR对转录组数据进行验证 | 第48-49页 |
| 3.3 CPK34基因功能的初步研究 | 第49-53页 |
| 3.3.1 候选基因干涉载体的构建 | 第49-50页 |
| 3.3.2 转基因植株花粉管萌发的荧光观察实验 | 第50-52页 |
| 3.3.3 转基因植株结籽情况 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-60页 |
| 4.1 亲和/不亲和的反应存在一些共同的生物过程 | 第53页 |
| 4.2 泛素化相关基因可能参与花粉与柱头不亲和反应 | 第53-54页 |
| 4.3 蛋白激酶类基因可能参与花粉与柱头不亲和反应 | 第54-55页 |
| 4.4 转录因子可能在花粉与柱头识别反应中发挥重要作用 | 第55-56页 |
| 4.5 花粉与柱头识别反应和病原体与植物的抗病反应 | 第56-57页 |
| 4.6 CPK34在花粉与柱头自交不亲和识别反应中的作用 | 第57-58页 |
| 4.7 总结与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
