| 主要缩略词表 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 第一章 全人源炭疽致死因子单抗的筛选与鉴定 | 第18-48页 |
| 第一节 炭疽毒素致死因子的制备与检测 | 第18-22页 |
| 1. 材料和方法 | 第18-19页 |
| 1.1 材料 | 第18页 |
| 1.2 方法 | 第18-19页 |
| 1.2.1 炭疽毒素LF的诱导表达及抽提 | 第18页 |
| 1.2.2 炭疽毒素LF的纯化及纯度分析 | 第18-19页 |
| 1.2.3 炭疽毒素LF的细胞毒性试验 | 第19页 |
| 2. 结果 | 第19-21页 |
| 2.1 LF纯化效果 | 第19-20页 |
| 2.2 LF的细胞毒性分析 | 第20-21页 |
| 3. 讨论 | 第21-22页 |
| 第二节 转基因小鼠的免疫及体液免疫特性分析 | 第22-27页 |
| 1. 材料和方法 | 第22-23页 |
| 1.1 材料 | 第22页 |
| 1.2 方法 | 第22-23页 |
| 1.2.1 转基因小鼠的免疫及血液采集 | 第22页 |
| 1.2.2 血清中LF结合抗体的ELISA检测 | 第22-23页 |
| 1.2.3 TNA法检测小鼠血清LF中和抗体水平 | 第23页 |
| 2. 结果 | 第23-26页 |
| 2.1 转基因小鼠体液免疫特性分析 | 第23-24页 |
| 2.2 血清中LF结合抗体水平检测 | 第24-25页 |
| 2.3 小鼠血清LF中和抗体水平 | 第25-26页 |
| 3. 讨论 | 第26-27页 |
| 第三节 流式分选记忆B细胞获取LF单抗基因 | 第27-36页 |
| 1. 材料和方法 | 第27-32页 |
| 1.1 材料 | 第27页 |
| 1.2 方法 | 第27-32页 |
| 1.2.1 转基因小鼠脾细胞的分离 | 第27-28页 |
| 1.2.2 抗原特异的记忆B细胞表面抗原的染色 | 第28页 |
| 1.2.3 流式细胞仪分选单个抗原特异的记忆B细胞 | 第28页 |
| 1.2.4 单细胞反转录PCR扩增抗体基因 | 第28-31页 |
| 1.2.5 单细胞巢式PCR扩增抗体基因 | 第31-32页 |
| 2. 结果 | 第32-34页 |
| 2.1 转基因小鼠脾细胞的分离 | 第32页 |
| 2.2 流式分选单个记忆B细胞 | 第32页 |
| 2.3 LF单抗重、轻链基因的获取 | 第32-34页 |
| 2.4 抗体基因序列分析 | 第34页 |
| 3. 讨论 | 第34-36页 |
| 第四节 全人源LF单克隆抗体的筛选 | 第36-48页 |
| 1. 材料和方法 | 第36-42页 |
| 1.1 材料 | 第36页 |
| 1.2 方法 | 第36-42页 |
| 1.2.1 单抗基因线性表达框的构建 | 第36-41页 |
| 1.2.2 单抗基因线性表达框的表达 | 第41页 |
| 1.2.3 ELISA法筛选LF结合单抗 | 第41页 |
| 1.2.4 LF中和单抗的TNA筛选 | 第41-42页 |
| 2. 结果 | 第42-46页 |
| 2.1 单抗基因线性表达框构建与表达 | 第42-44页 |
| 2.1.1 线性表达框各基因片段的扩增 | 第42-43页 |
| 2.1.2 重叠延伸PCR构建单抗线性表达框 | 第43-44页 |
| 2.2 单抗基因的表达与LF单抗的鉴定 | 第44-46页 |
| 2.2.1 结合单抗的筛选 | 第44-45页 |
| 2.2.2 中和单抗的筛选 | 第45页 |
| 2.2.3 LF单抗基因序列比对 | 第45-46页 |
| 3. 讨论 | 第46-48页 |
| 第二章 全人源炭疽LF中和单抗的功能研究 | 第48-64页 |
| 第一节 全人源LF单克隆抗体的中和活性研究 | 第48-56页 |
| 1. 材料和方法 | 第48-50页 |
| 1.1 材料 | 第48页 |
| 1.2 方法 | 第48-50页 |
| 1.2.1 LF中和单抗表达质粒的构建、表达及纯化 | 第48-49页 |
| 1.2.2 SPR法测定LF单抗亲和力 | 第49-50页 |
| 1.2.3 TNA法测定LF中和单抗体外中和活性 | 第50页 |
| 1.2.4 大鼠攻毒实验测定LF中和单抗体内中和活性： | 第50页 |
| 2. 结果 | 第50-54页 |
| 2.1 获取LF中和单抗 | 第50-52页 |
| 2.1.1 LF单抗全长基因克隆至pc DNA3.4 表达质粒 | 第50-51页 |
| 2.1.2 LF单抗的表达和纯化 | 第51-52页 |
| 2.2 LF中和单抗的亲和力测定 | 第52-53页 |
| 2.3 LF中和单抗的体外中和活性测定 | 第53页 |
| 2.4 LF中和单抗的体内中和活性测定 | 第53-54页 |
| 3. 讨论 | 第54-56页 |
| 第二节 全人源LF单抗与PA单抗的协同作用研究 | 第56-64页 |
| 1. 材料和方法 | 第56-57页 |
| 1.1 材料 | 第56页 |
| 1.2 方法 | 第56-57页 |
| 1.2.1 LF中和单抗体外协同作用的TNA测定 | 第56-57页 |
| 1.2.2 LF单抗和PA单抗体内协同试验 | 第57页 |
| 1.2.3 单抗协同作用评价 | 第57页 |
| 2 结果 | 第57-62页 |
| 2.1 LF单抗与炭疽PA单抗 2A6的协同作用分析 | 第57-60页 |
| 2.2 LF单抗与炭疽PA单抗 8A7的协同作用分析 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录 主要溶液配制 | 第70-72页 |
| 个人简历 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
