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利用RNA干扰技术抑制日本血吸虫酪氨酸羟化酶的合成

中英文缩略词对照表第1-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-14页
引言第14-17页
2.材料方法第17-40页
   ·材料和试剂第17-25页
     ·钉螺第17页
     ·小鼠第17页
     ·引物和探针第17-18页
     ·主要试剂第18页
     ·部分试剂的配方第18-23页
     ·主要仪器及来源第23-25页
   ·实验方法第25-40页
     ·日本血吸虫尾蚴的收集第25页
     ·日本血吸虫尾蚴总RNA 提取第25页
     ·逆转录合成第一链cDNA第25-26页
     ·SjTH 基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备第26-31页
     ·SjTH、Sj14-3-3、LacZ 长片段dsRNA 体外转录、纯化第31-38页
     ·dsRNA 转染入日本血吸虫尾蚴第38-39页
     ·测定RNA 纯度第39页
     ·GAPDH 目的基因的扩增第39-40页
     ·dsRNA 处理后的日本血吸虫感染小鼠第40页
3.结果第40-55页
   ·SjTHj 基因表达质粒的鉴定第40-41页
   ·SjTH 基因的原核表达第41-42页
   ·长片段dsRNA 体外转录结果第42-47页
     ·目的基因的扩增第42-44页
     ·目的基因正义DNA 模板及反义DNA 模板的扩增第44-47页
     ·以正义DNA 及反义DNA 为模板体外转录产生dsRNA第47页
   ·体外转录长片段dsRNA 对SjTH 基因转录的抑制作用第47-49页
   ·体外转录长片段Sj14-3-3 dsRNA 对Sj14-3-3 基因转录的抑制作用第49-51页
   ·Western blotting 检测各处理组中SjTH 蛋白的表达第51-53页
   ·显微镜观察日本血吸虫尾蚴的结果第53-54页
   ·感染日本血吸虫尾蚴肝脏病理切片(HE 染色)第54-55页
4.结果第55-61页
   ·RNA 干扰的机制第55页
   ·选择RNAi 方法检测基因功能第55-56页
   ·长片段dsRNA 在日本血吸虫体内能抑制目标基因的表达第56-57页
   ·影响长片段dsRNA 对目标基因表达调控作用的因素第57-60页
   ·长片段dsRNA 处理后的尾蚴,活力和存活率都下降第60-61页
   ·14-3-3 蛋白与TH 之间的联系第61页
5 结论第61-62页
参考文献第62-65页
附录一:个人简历第65-67页
附录二:致谢第67-68页
附录三:综述第68-81页
 参考文献第76-81页

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