中英文缩略词对照表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
引言 | 第14-17页 |
2.材料方法 | 第17-40页 |
·材料和试剂 | 第17-25页 |
·钉螺 | 第17页 |
·小鼠 | 第17页 |
·引物和探针 | 第17-18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·部分试剂的配方 | 第18-23页 |
·主要仪器及来源 | 第23-25页 |
·实验方法 | 第25-40页 |
·日本血吸虫尾蚴的收集 | 第25页 |
·日本血吸虫尾蚴总RNA 提取 | 第25页 |
·逆转录合成第一链cDNA | 第25-26页 |
·SjTH 基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备 | 第26-31页 |
·SjTH、Sj14-3-3、LacZ 长片段dsRNA 体外转录、纯化 | 第31-38页 |
·dsRNA 转染入日本血吸虫尾蚴 | 第38-39页 |
·测定RNA 纯度 | 第39页 |
·GAPDH 目的基因的扩增 | 第39-40页 |
·dsRNA 处理后的日本血吸虫感染小鼠 | 第40页 |
3.结果 | 第40-55页 |
·SjTHj 基因表达质粒的鉴定 | 第40-41页 |
·SjTH 基因的原核表达 | 第41-42页 |
·长片段dsRNA 体外转录结果 | 第42-47页 |
·目的基因的扩增 | 第42-44页 |
·目的基因正义DNA 模板及反义DNA 模板的扩增 | 第44-47页 |
·以正义DNA 及反义DNA 为模板体外转录产生dsRNA | 第47页 |
·体外转录长片段dsRNA 对SjTH 基因转录的抑制作用 | 第47-49页 |
·体外转录长片段Sj14-3-3 dsRNA 对Sj14-3-3 基因转录的抑制作用 | 第49-51页 |
·Western blotting 检测各处理组中SjTH 蛋白的表达 | 第51-53页 |
·显微镜观察日本血吸虫尾蚴的结果 | 第53-54页 |
·感染日本血吸虫尾蚴肝脏病理切片(HE 染色) | 第54-55页 |
4.结果 | 第55-61页 |
·RNA 干扰的机制 | 第55页 |
·选择RNAi 方法检测基因功能 | 第55-56页 |
·长片段dsRNA 在日本血吸虫体内能抑制目标基因的表达 | 第56-57页 |
·影响长片段dsRNA 对目标基因表达调控作用的因素 | 第57-60页 |
·长片段dsRNA 处理后的尾蚴,活力和存活率都下降 | 第60-61页 |
·14-3-3 蛋白与TH 之间的联系 | 第61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
附录一:个人简历 | 第65-67页 |
附录二:致谢 | 第67-68页 |
附录三:综述 | 第68-81页 |
参考文献 | 第76-81页 |