| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 细菌对逆境的适应性 | 第10-12页 |
| 1.1.1 细菌生物薄膜的形成及趋向性 | 第10-11页 |
| 1.1.2 代谢的改变以及热激应答 | 第11-12页 |
| 1.2 ClpA蛋白在细菌环境胁迫应答中的作用 | 第12-14页 |
| 1.3 棉花角斑病的发病情况及防治 | 第14-15页 |
| 1.4 立题依据和研究意义 | 第15-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第18页 |
| 2.1.2 供试质粒 | 第18页 |
| 2.1.3 引物 | 第18-19页 |
| 2.1.4 棉花种子 | 第19-20页 |
| 2.1.5 培养基 | 第20页 |
| 2.1.6 药品及试剂 | 第20-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 棉花角斑病菌Xcm的活化、培养及保存 | 第22页 |
| 2.2.2 Xcm基因组DNA的抽提 | 第22-23页 |
| 2.2.3 生物信息学分析Xcm野生型和clpA突变体差异表达蛋白 | 第23页 |
| 2.2.4 大肠杆菌S17-1电击感受态的制作 | 第23-24页 |
| 2.2.5 DNA快速纯化回收法 | 第24-25页 |
| 2.2.6 质粒小量抽取(碱裂解法) | 第25页 |
| 2.2.7 116热激感受态的制备(CaCl_2法) | 第25-26页 |
| 2.3 缺陷型菌株的获得 | 第26-28页 |
| 2.3.1 目的基因上下游片段的扩增 | 第26页 |
| 2.3.2 敲除载体的构建 | 第26页 |
| 2.3.3 遗传转化 | 第26-27页 |
| 2.3.4 突变株的筛选 | 第27-28页 |
| 2.4 基因互补菌株的构建 | 第28-29页 |
| 2.4.1 互补片段pbP-com的克隆 | 第28页 |
| 2.4.2 互补载体的构建 | 第28页 |
| 2.4.3 互补菌株的筛选 | 第28-29页 |
| 2.5 野生型Xcm与其衍生菌株在生物学表型特征方面的比较 | 第29-34页 |
| 2.5.1 野生型Xcm及缺陷型菌株的群体生长 | 第29页 |
| 2.5.2 野生型Xcm及缺陷型菌株对盐离子耐受性能力的测定 | 第29页 |
| 2.5.3 野生型Xcm及其衍生菌株的生物薄膜形成 | 第29-30页 |
| 2.5.4 野生型Xcm及其衍生菌株的运动性 | 第30页 |
| 2.5.5 野生型Xcm及其衍生菌株产胞外淀粉酶能力的比较 | 第30页 |
| 2.5.6 野生型Xcm与突变株在耐热能力方面的比较 | 第30-31页 |
| 2.5.7 野生型Xcm与突变株的竞争性实验 | 第31页 |
| 2.5.8 野生型Xcm与突变株在棉花幼苗内7d定殖能力的测定 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-52页 |
| 3.1 Xcm野生型和clpA突变体差异表达蛋白分析结果 | 第34-35页 |
| 3.2 缺陷型菌株的获得 | 第35-39页 |
| 3.2.1 目的基因上下游片段的扩增 | 第35页 |
| 3.2.2 敲除载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.2.3 遗传转化 | 第36-37页 |
| 3.2.4 突变株的筛选 | 第37-39页 |
| 3.3 野生型Xcm与其衍生菌株在生物学表型方面的比较 | 第39-49页 |
| 3.3.1 野生型Xcm及缺陷型菌株的群体生长 | 第39-40页 |
| 3.3.2 野生型Xcm及缺陷型菌株对盐离子耐受性能力的测定 | 第40-42页 |
| 3.3.3 野生型Xcm及其衍生菌株的生物薄膜形成 | 第42-43页 |
| 3.3.4 野生型Xcm及其衍生菌株的运动性 | 第43-44页 |
| 3.3.5 野生型Xcm及其衍生菌株产胞外淀粉酶能力的比较 | 第44-45页 |
| 3.3.6 野生型Xcm与突变株在耐热能力方面的比较 | 第45页 |
| 3.3.7 野生型Xcm与突变株的竞争性实验 | 第45-48页 |
| 3.3.8 野生型Xcm与突变株在棉花幼苗内7d定殖能力的测定 | 第48-49页 |
| 3.4 野生型Xcm和突变体△pbP以及回补菌株Xcm (△pbP::△pbP)的表型分析 | 第49-52页 |
| 4 结论 | 第52-54页 |
| 5 讨论 | 第54-56页 |
| 6 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
