摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第15-26页 |
1.1 肿瘤转移 | 第15-17页 |
1.1.1 上皮间质转化(EMT) | 第15页 |
1.1.2 肿瘤微环境 | 第15-16页 |
1.1.3 肿瘤血管形成 | 第16-17页 |
1.1.4 蛋白水解酶 | 第17页 |
1.2 宫颈癌 | 第17-18页 |
1.3 URI研究进展 | 第18-20页 |
1.4 Vimentin与肿瘤 | 第20-22页 |
1.5 基因转录调控 | 第22-24页 |
1.5.1 转录调控概述 | 第22页 |
1.5.2 研究方法 | 第22-24页 |
1.6 本研究内容及意义 | 第24-26页 |
第二章 建立URI干预宫颈癌细胞株 | 第26-40页 |
2.1 材料 | 第26-29页 |
2.1.1 主要仪器 | 第26-27页 |
2.1.2 主要材料 | 第27-28页 |
2.1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
2.2 方法 | 第29-37页 |
2.2.1 细胞培养 | 第29-30页 |
2.2.2 细胞瞬时转染 | 第30-33页 |
2.2.3 qRT-PCR检测分析 | 第33-34页 |
2.2.4 Western blot检测分析 | 第34-37页 |
2.2.5 统计学分析 | 第37页 |
2.3 结果 | 第37-39页 |
2.3.1 两株宫颈癌细胞URI基础表达水平 | 第37页 |
2.3.2 URI干预后宫颈癌细胞URI mRNA和蛋白表达水平 | 第37-39页 |
2.4 讨论 | 第39-40页 |
第三章 URI对宫颈癌细胞迁移和侵袭能力的影响 | 第40-47页 |
3.1 材料 | 第40页 |
3.1.1 主要仪器 | 第40页 |
3.1.2 主要材料 | 第40页 |
3.1.3 主要试剂 | 第40页 |
3.2 方法 | 第40-42页 |
3.2.1 Transwell小室迁移实验 | 第40-41页 |
3.2.2 Transwell小室侵袭实验 | 第41-42页 |
3.2.3 统计学分析 | 第42页 |
3.3 结果 | 第42-45页 |
3.3.1 Transwell小室迁移实验检测URI干预后细胞迁移能力 | 第42-43页 |
3.3.2 Transwell小室侵袭实验检测URI干预后细胞侵袭能力 | 第43-45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
第四章 调节Vimentin参与URI对宫颈癌细胞运动能力的影响 | 第47-55页 |
4.1 材料 | 第47页 |
4.1.1 主要仪器 | 第47页 |
4.1.2 主要材料 | 第47页 |
4.1.3 主要试剂 | 第47页 |
4.2 方法 | 第47-48页 |
4.2.1 qRT-PCR检测分析 | 第47页 |
4.2.2 Western blot检测分析 | 第47页 |
4.2.3 TGF-β 诱导和siRNA干扰Vimentin表达 | 第47-48页 |
4.2.4 Transwell小室迁移实验 | 第48页 |
4.2.5 Transwell小室侵袭实验 | 第48页 |
4.2.6 统计学分析 | 第48页 |
4.3 结果 | 第48-54页 |
4.3.1 URI促进Vimentin mRNA和蛋白表达 | 第48-50页 |
4.3.2 Vimentin干预后mRNA和蛋白表达水平 | 第50-51页 |
4.3.3 URI上调Vimentin表达促进宫颈癌细胞迁移能力 | 第51-52页 |
4.3.4 URI上调Vimentin表达促进宫颈癌细胞侵袭能力 | 第52-54页 |
4.4 讨论 | 第54-55页 |
第五章 URI调控Vimentin表达的机制 | 第55-72页 |
5.1 材料 | 第55-56页 |
5.1.1 主要仪器 | 第55页 |
5.1.2 主要材料 | 第55-56页 |
5.1.3 主要试剂 | 第56页 |
5.2 方法 | 第56-66页 |
5.2.1 报告基因载体构建 | 第56-60页 |
5.2.2 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第60-61页 |
5.2.3 ChIP引物设计 | 第61-62页 |
5.2.4 染色质免疫共沉淀实验 | 第62-65页 |
5.2.5 统计学分析 | 第65-66页 |
5.3 结果 | 第66-70页 |
5.3.1 报告基因载体验证 | 第66-67页 |
5.3.2 URI对Vimentin启动子活性影响 | 第67-69页 |
5.3.3 URI结合Vimentin启动子位点分析 | 第69-70页 |
5.4 讨论 | 第70-72页 |
结论与展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
研究生期间发表论文 | 第85页 |