中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-13页 |
第一部分 高表达SPATA5L1的稳定转染细胞株的建立与鉴定 | 第13-31页 |
一.实验材料 | 第13-16页 |
1. 细胞系、菌株和质粒 | 第13页 |
2. 主要试剂 | 第13-14页 |
3. 自配试剂 | 第14-15页 |
4. 主要材料 | 第15页 |
5. 主要仪器、设备 | 第15-16页 |
二、实验方法 | 第16-22页 |
1.细胞准备 | 第16页 |
2.细菌的准备 | 第16-17页 |
3.细菌转化 | 第17页 |
4.质粒提取 | 第17-18页 |
5.G418浓度筛选试验 | 第18页 |
6.细胞的转染及稳定细胞株的筛选 | 第18页 |
7.显微镜观察细胞形态 | 第18页 |
8.稳定细胞株的mRNA表达鉴定 | 第18-20页 |
9.稳定细胞株的蛋白表达鉴定 | 第20-22页 |
三、结果 | 第22-28页 |
1.SPATA5L1基因序列分析 | 第22-24页 |
2.G418筛选KB细胞的最低致死浓度 | 第24页 |
3.脂质体法pEX1SPATA5L1重组质粒转染细胞 | 第24页 |
4.转染SPATA5L1基因后细胞形态的变化 | 第24-26页 |
5.SPATA5L1的mRNA表达鉴定 | 第26-27页 |
6.SPATA5L1的蛋白表达鉴定 | 第27-28页 |
四.讨论 | 第28-31页 |
第二部分 高表达SPATA5L1对KB细胞辐射敏感性的影响 | 第31-42页 |
一.实验材料 | 第31-32页 |
1. 细胞系 | 第31页 |
2. 主要试剂 | 第31-32页 |
3. 自配试剂 | 第32页 |
4. 主要材料 | 第32页 |
5. 主要仪器、设备 | 第32页 |
二.实验方法 | 第32-34页 |
1.细胞培养 | 第32页 |
2.CCK-8 比色法检测不同剂量X射线对细胞增殖的影响 | 第32-33页 |
3.克隆形成实验 | 第33-34页 |
4.流式细胞仪分析不同照射剂量细胞凋亡的变化 | 第34页 |
5.统计学分析 | 第34页 |
三.结果 | 第34-40页 |
1.CCK-8 实验研究不同剂量X射线对三组细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
2.克隆形成实验研究SPATA5L1对KB细胞辐射敏感性的影响 | 第35-37页 |
3.SPATA5L1对口腔癌细胞X射线照射后细胞凋亡的影响 | 第37-40页 |
四.实验讨论 | 第40-42页 |
第三部分 高表达SPATA5L1影响KB细胞辐射敏感性的相关机制 | 第42-54页 |
一、实验材料 | 第42-43页 |
1. 细胞系 | 第42页 |
2. 主要试剂 | 第42-43页 |
3. 自配试剂 | 第43页 |
4. 主要材料 | 第43页 |
5. 主要仪器、设备 | 第43页 |
二、实验方法 | 第43-45页 |
1.细胞培养 | 第43页 |
2.细胞周期分布检测 | 第43-44页 |
3.细胞线粒体膜电位变化检测 | 第44-45页 |
4.Western Blot 法检测 Cyclin B 2、beclin 1、LC3B 的表达 | 第45页 |
三、实验结果 | 第45-51页 |
1.细胞周期检测结果 | 第45-48页 |
2.SPATA5L1对细胞周期调控蛋白表达量的影响 | 第48页 |
3.SPATA5L1对自噬相关蛋白的影响 | 第48-49页 |
4.线粒体膜电位检测结果 | 第49-51页 |
四、实验讨论 | 第51-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
综述:肿瘤基因治疗和放射治疗联合应用的研究进展 | 第59-70页 |
参考文献 | 第64-70页 |
攻读硕士学位期间公开发表的论文 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |