中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10页 |
Ⅰ 前言 | 第12-19页 |
1 肌酐的测定方法 | 第12-13页 |
1.1 化学检测方法 | 第12页 |
1.2 酶促检测方法 | 第12-13页 |
2 微生物产肌酸水解酶的研究状况 | 第13-14页 |
3 肌酸水解酶的提纯 | 第14-15页 |
4 肌酸水解酶的性质 | 第15-17页 |
5 肌酸水解酶的分子生物学研究现状 | 第17-18页 |
6 本研究的目的 | 第18-19页 |
Ⅱ 材料与方法 | 第19-26页 |
1 材料 | 第19页 |
1.1 菌株的分离源 | 第19页 |
1.2 主要仪器 | 第19页 |
1.3 主要培养基 | 第19页 |
2 试验方法 | 第19-26页 |
2.1 产肌酸水解酶微生物的分离纯化 | 第19-20页 |
2.2 菌株WB1的鉴定试验 | 第20-21页 |
2.3 肌酸水解酶产生菌株WB1的发酵产酶条件研究 | 第21-23页 |
2.4 酶的提取与纯化 | 第23-24页 |
2.5 酶的特性研究 | 第24-25页 |
2.6 纯化后酶的结晶条件的筛选 | 第25-26页 |
Ⅲ 结果与分析 | 第26-46页 |
1 菌种的富集与分离 | 第26页 |
2 产酶菌的筛选 | 第26页 |
2.1 初筛 | 第26页 |
2.2 菌种的复筛 | 第26页 |
3 产肌酸水解分离菌株WB1的鉴定 | 第26-29页 |
3.1 形态学研究 | 第26页 |
3.2 生理生化测定 | 第26-29页 |
4 菌株WB1发酵产酶条件研究 | 第29-37页 |
4.1 不同氮源对菌株发酵产酶的影响 | 第29-32页 |
4.1.1 不同种类氮源对菌株发酵产酶的影响 | 第29-30页 |
4.1.2 不同比例的玉米浆和酵母膏对菌株发酵产酶的影响 | 第30-31页 |
4.1.3 不同浓度的氮源对菌株发酵产酶的影响 | 第31-32页 |
4.2 不同碳源对菌株发酵产酶的影响 | 第32-33页 |
4.3 通气量对菌株发酵产酶的影响 | 第33-34页 |
4.4 培养基起始pH对菌株发酵产酶的影响 | 第34页 |
4.5 肌酸加入时间和加入量对菌株发酵产酶的影响 | 第34-36页 |
4.5.1 肌酸加入时间对菌株发酵产酶的影响 | 第34-35页 |
4.5.2 肌酸加入量对细菌发酵产酶的影响 | 第35-36页 |
4.6 不同诱导物对肌酸水解酶的诱导作用 | 第36页 |
4.7 培养温度对细菌发酵产酶的影响 | 第36-37页 |
4.8 菌株发酵产酶最佳条件总结 | 第37页 |
5 肌酸水解酶的提取与纯化 | 第37-40页 |
5.1 硫酸铵分级沉淀 | 第37-38页 |
5.2 DEAE-Cellulose离子交换层析 | 第38页 |
5.3 Toyopearl HW-65疏水层析 | 第38-39页 |
5.4 Sephadex G-200分子筛层析 | 第39页 |
5.5 酶提纯结果总结 | 第39-40页 |
5.6 纯酶的结晶 | 第40页 |
6 纯化后酶的特性 | 第40-46页 |
6.1 酶的最佳反应pH与pH稳定性 | 第40-41页 |
6.1.1 酶的最佳反应pH | 第40-41页 |
6.1.2 酶的pH稳定性 | 第41页 |
6.2 酶的最佳反应温度与热稳定性 | 第41-42页 |
6.2.1 酶的最佳反应温度 | 第41-42页 |
6.2.2 酶的热稳定范围 | 第42页 |
6.3 酶的Km值 | 第42-43页 |
6.4 分子量测定 | 第43-44页 |
6.5 不同化学物质对酶活性的影响 | 第44-46页 |
Ⅳ 讨论 | 第46-49页 |
1 产肌酸水解酶的微生物 | 第46页 |
2 WB1菌株发酵产酶特性 | 第46-47页 |
3 酶的提纯与纯酶的特性 | 第47-49页 |
Ⅴ 参考文献 | 第49-52页 |