| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| §1．1 番茄环斑病毒的生物学 | 第10-11页 |
| §1．1．1 症状分布及传播途径 | 第10页 |
| §1．1．2 分类地位 | 第10-11页 |
| §1．2 番茄环斑病毒的基因结构 | 第11-12页 |
| §1．3 植物病毒的检测方法 | 第12-14页 |
| §1．4 传统PCR-ELISA对病原微生物的检测 | 第14-15页 |
| §1．5 杂交诱捕PCR-ELISA的原理 | 第15页 |
| §1．6 影响杂交诱捕的因素 | 第15-16页 |
| §1．7 载体 | 第16-17页 |
| §1．7．1 对载体的要求 | 第16页 |
| §1．7．2 载体材料类型 | 第16-17页 |
| §1．7．3 载体的活化 | 第17页 |
| §1．7．4 常用载体 | 第17页 |
| §1．8 诱捕链的类型 | 第17-18页 |
| §1．9 实时荧光PCR原理 | 第18页 |
| §1．10 转基因产品的安全性 | 第18-19页 |
| §1．11 转基因产品检测方法 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-28页 |
| §2．1 材料 | 第20-21页 |
| §2．2 材料的准备 | 第21页 |
| §2．2．1 ToRSV接种 | 第21页 |
| §2．2．2 ToRSV的酶联检测 | 第21页 |
| §2．3 RT-PCR反应 | 第21-22页 |
| §2．3．1 植物总RNA的提取 | 第21-22页 |
| §2．3．2 引物及探针设计 | 第22页 |
| §2．3．3 反转录反应 | 第22页 |
| §2．3．4 PCR扩增 | 第22页 |
| §2．4 PCR产物克隆 | 第22-24页 |
| §2．4．1 PCR产物的回收 | 第22-23页 |
| §2．4．2 PCR产物与载体的连接 | 第23页 |
| §2．4．3 大肠杆菌感受态的制备和转化 | 第23页 |
| §2．4．4 克隆的鉴定 | 第23页 |
| §2．4．5 质粒的提取 | 第23-24页 |
| §2．4．6 质粒的酶切 | 第24页 |
| §2．4．7 序列测定 | 第24页 |
| §2．5 PCR管的包被与保存 | 第24-25页 |
| §2．5．1 PCR管的包被 | 第24-25页 |
| §2．5．2 包被管保存时间 | 第25页 |
| §2．6 核酸的诱捕 | 第25页 |
| §2．7 利用HC-RT-PCR-ELISA检测ToRSV | 第25-26页 |
| §2．8 杂交诱捕实时荧光PCR检测ToRSV | 第26页 |
| §2．9 HC-PCR检测转基因产品 | 第26-28页 |
| §2．9．1 诱捕用片段的合成 | 第26页 |
| §2．9．2 核酸的诱捕 | 第26-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-41页 |
| §3．1 ToRSV的ELISA检测 | 第28页 |
| §3．2 ToRSV的RT-PCR结果 | 第28-29页 |
| §3．3 PCR产物的克隆及鉴定 | 第29页 |
| §3．4 序列测定 | 第29-31页 |
| §3．5 包被参数的优化 | 第31-33页 |
| §3．5．1 包被时间对包被量的影响 | 第31页 |
| §3．5．2 DNA长度对包被量的影响 | 第31-32页 |
| §3．5．3 EDC浓度对包被量的影响 | 第32页 |
| §3．5．4 温度对包被量的影响 | 第32-33页 |
| §3．6 夹心式杂交检测 | 第33-34页 |
| §3．7 再杂交 | 第34页 |
| §3．8 诱捕参数的优化 | 第34-35页 |
| §3．8．1 杂交诱捕的温度 | 第34-35页 |
| §3．8．2 杂交诱捕时间 | 第35页 |
| §3．9 正反向引物浓度比对扩增结果影响 | 第35-36页 |
| §3．10 杂交参数确定 | 第36页 |
| §3．10．1 杂交中探针浓度的确定 | 第36页 |
| §3．10．2 探针的一端标记与两端标记 | 第36页 |
| §3．11 HC-RT-PCR-ELISA检测ToRSV的灵敏度 | 第36-37页 |
| §3．12 实际检测应用 | 第37-38页 |
| §3．13 实时荧光PCR检测 | 第38页 |
| §3．14 杂交诱捕实时荧光PCR相对灵敏度实验 | 第38-39页 |
| §3．15 HC-RT-PCR-ELISA对南瓜花叶病毒的检测 | 第39页 |
| §3．16 Nest-PCR对南瓜花叶病毒的检测 | 第39-40页 |
| §3．17 转基因产品的HC-PCR检测 | 第40-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-45页 |
| §4．1 植物病毒几种检测方法比较 | 第41-42页 |
| §4．2 Agilent chiplab检测PCR产物 | 第42页 |
| §4．3 PCR-ELISA与传统PCR-ELISA比较 | 第42-43页 |
| §4．4 寡核苷酸在管壁上的存在形式 | 第43页 |
| §4．5 结合臂 | 第43页 |
| §4．6 诱捕用寡核苷酸 | 第43-44页 |
| §4．7 实验室的核酸污染问题 | 第44-45页 |
| 第五章 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
