| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-20页 |
| 1 ABHD16A简介 | 第9-18页 |
| 1.1 人ABHD16A基因简介 | 第9页 |
| 1.2 人ABHD16A基因的定位 | 第9-10页 |
| 1.3 ABHD16A结构 | 第10-12页 |
| 1.4 ABHD蛋白质家族研究进展 | 第12-16页 |
| 1.5 ABHD16A研究进展 | 第16-18页 |
| 2 乙型脑炎病毒的危害及检测方法 | 第18-20页 |
| 2.1 乙型脑炎病毒的危害 | 第18页 |
| 2.2 乙型脑炎病毒临床诊断现状 | 第18-19页 |
| 2.3 LAMP技术简介 | 第19-20页 |
| 第二部分 实验内容 | 第20-47页 |
| 第一章 人ABHD16A抗体的制备 | 第20-38页 |
| 1 引言 | 第20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.1 主要实验材料 | 第20页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.3 主要试剂及配制 | 第21-22页 |
| 2.4 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.4.1 人肝癌细胞Hep G2的培养 | 第22页 |
| 2.4.2 人肝癌细胞HepG2总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.4.3 RNA反转录合成cDNA | 第23页 |
| 2.4.3.1 RNA反转录合成cDNA第一链 | 第23页 |
| 2.4.3.2 人ABHD16A CDS克隆 | 第23页 |
| 2.4.4 目的DNA片段加A尾和连接pMD19-T | 第23-24页 |
| 2.4.4.1 目的DNA片段加A尾 | 第23-24页 |
| 2.4.4.2 连接pMD19-T | 第24页 |
| 2.4.5 pMD19-T-hABHD16A转化E.coli DH5α感受态细胞 | 第24-25页 |
| 2.4.6 pET28a-hABHD16A重组质粒的构建 | 第25页 |
| 2.4.7 人ABHD16A的原核表达 | 第25-26页 |
| 2.4.7.1 阳性克隆子的筛选 | 第25页 |
| 2.4.7.2 诱导表达 | 第25-26页 |
| 2.4.7.3 包涵体蛋白的纯化 | 第26页 |
| 2.4.8 Balb/c小鼠的免疫 | 第26-27页 |
| 2.4.9 免疫原的制备 | 第27-28页 |
| 2.4.9.1 切割SDS-PAGE目的条带制备免疫原 | 第27-28页 |
| 2.4.9.2 包涵体蛋白制备免疫原 | 第28页 |
| 2.5 人ABHD16A多克隆抗体的制备 | 第28页 |
| 2.5.1 抗血清的制备 | 第28页 |
| 2.6 抗血清效价评估 | 第28-30页 |
| 2.6.1 Dot-Blot分析抗血清效价 | 第28页 |
| 2.6.2 pCDNA3.1(+)-Sus Scrofa ABHD16A和pCDNA3.1（+）转染人肝癌细胞Hep G2 | 第28-29页 |
| 2.6.3 Western-Blot评价抗血清 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-37页 |
| 3.1 人ABHD16A基因的扩增 | 第30-31页 |
| 3.1.1 人肝癌细胞HepG2总RNA的提取及cDNA的合成 | 第30页 |
| 3.1.2 扩增人ABHD16A基因 | 第30-31页 |
| 3.2 pET28a-hABHD16A表达载体的构建、表达及表达产物的纯化 | 第31-34页 |
| 3.2.1 pET28a载体及人ABHD16A基因片段的制备 | 第31页 |
| 3.2.2 E.coli BL21(DE3)+ pET28a-hABHD16A阳性克隆子的筛选 | 第31-32页 |
| 3.2.3 阳性克隆子的诱导表达 | 第32-33页 |
| 3.2.4 表达产物人ABHD16A包涵体蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 3.3 Dot-Blot以及Western-Blot评价抗血清 | 第34-37页 |
| 3.3.1 Dot-Blot方法评价抗血清 | 第34-36页 |
| 3.3.2 Western-Blot方法评价抗血清 | 第36-37页 |
| 4 结论与讨论 | 第37-38页 |
| 第二章 乙型脑炎病毒可视化快速检测方法的建立 | 第38-47页 |
| 1 引言 | 第38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第38页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第38页 |
| 2.3 主要试剂及配制 | 第38页 |
| 2.4 实验方法 | 第38-41页 |
| 2.4.1 设计引物 | 第39页 |
| 2.4.2 样品制备 | 第39-40页 |
| 2.4.3 反应液制备和体系 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-46页 |
| 3.1 乙型脑炎病毒阳性检测 | 第41页 |
| 3.2 灵敏度检测 | 第41-44页 |
| 3.3 特异性和重复性检测 | 第44-46页 |
| 4 结论与讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-56页 |
| Abstract | 第56页 |
| 英文缩略词表 | 第57页 |
