| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| 1.1 成纤维细胞生长因子（FGF）及成纤维细胞生长因子受体（FGFR） | 第11-12页 |
| 1.2 单链抗体 | 第12页 |
| 1.3 siRNA 与癌症 | 第12-13页 |
| 1.4 siRNA 的运输系统 | 第13-14页 |
| 1.5 原核表达与 Sumo 表达系统 | 第14-15页 |
| 1.6 课题设计思路 | 第15-17页 |
| 第二章 实验试剂、仪器及实验步骤 | 第17-24页 |
| 2.1 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.2 实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.3 实验室常用溶液 | 第19-21页 |
| 2.3.1 SDS-PAGE 试剂 | 第19页 |
| 2.3.2 Western blot 试剂 | 第19页 |
| 2.3.3 细菌培养基 | 第19-20页 |
| 2.3.4 50×Tris-乙酸（TAE） | 第20页 |
| 2.3.5 Amp（100 mg/mL）贮存液 | 第20页 |
| 2.3.6 蛋白纯化相关缓冲液 | 第20-21页 |
| 2.4 实验室基本方法 | 第21-24页 |
| 2.4.1 DNA 片段胶回收 | 第21页 |
| 2.4.2 重组子转化 | 第21页 |
| 2.4.3 质粒提取 | 第21-24页 |
| 第三章 ScFv 原核表达载体的构建及重组 ScFv 蛋白的诱导表达和纯化 | 第24-36页 |
| 3.1 实验目的 | 第24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 3.2.1 ScFv 表达载体的构建 | 第24-27页 |
| 3.2.2 重组蛋白的表达与纯化 | 第27-30页 |
| 3.3 实验结果 | 第30-35页 |
| 3.3.1 Sumo 和 Sumo-ScFv 片段电泳结果 | 第30-31页 |
| 3.3.2 重组质粒酶切与测序鉴定 | 第31页 |
| 3.3.3 重组蛋白 Sumo-ScFv 的诱导表达及可溶性表达情况 | 第31-32页 |
| 3.3.4 重组蛋白 Sumo-ScFv 的纯化 | 第32页 |
| 3.3.5 重组蛋白 Sumo-ScFv 的 Western Blot 检测 | 第32-33页 |
| 3.3.6 融合蛋白 Sumo-ScFv 酶切及纯化 | 第33页 |
| 3.3.7 目的蛋白 ScFv 质谱测序 | 第33-34页 |
| 3.3.8 目的蛋白 ScFv 抑制 FGF9 诱导的 FGFR3 磷酸化的研究 | 第34-35页 |
| 3.4 实验小结 | 第35-36页 |
| 第四章 融合蛋白 ScFv-tp 的表达、纯化及功能研究 | 第36-49页 |
| 4.1 实验方法 | 第36-42页 |
| 4.1.1 重组质粒 pET-20b-ScFv-tp 表达载体的构建 | 第36页 |
| 4.1.2 ScFv-tp 融合蛋白的表达与获得 | 第36-37页 |
| 4.1.3 ScFv-tp 融合蛋白的鉴定 | 第37-38页 |
| 4.1.4 ScFv-tp 融合蛋白结合 siRNA 能力的鉴定 | 第38页 |
| 4.1.5 流式细胞术检测 ScFv-tp 运送 siRNA 入 K562 细胞的能力 | 第38页 |
| 4.1.6 免疫荧光检测 ScFv-tp 运送 siRNA 入 RT-112 细胞的能力 | 第38-39页 |
| 4.1.7 ScFv-tp 运送 siRNA 对 RT-112 细胞在 mRNA 水平的影响 | 第39-41页 |
| 4.1.8 ScFv-tp 运送 siRNA 对 RT-112 细胞在蛋白水平的影响 | 第41-42页 |
| 4.2 实验结果 | 第42-48页 |
| 4.2.1 ScFv-tp 基因片段的 PCR 扩增 | 第42页 |
| 4.2.2 融合蛋白 ScFv-tp 的诱导表达及可溶性表达情况 | 第42-43页 |
| 4.2.3 包涵体蛋白的纯化与复性 | 第43页 |
| 4.2.4 融合蛋白 ScFv-tp 的 Western Blot 鉴定 | 第43页 |
| 4.2.5 ScFv-tp 融合蛋白的质谱鉴定 | 第43-44页 |
| 4.2.6 ScFv-tp 融合蛋白结合 siRNA 的能力检测 | 第44页 |
| 4.2.7 流式细胞术检测 ScFv-tp 运送 siRNA 入 K562 细胞的能力 | 第44-45页 |
| 4.2.8 免疫荧光检测 ScFv-tp 运送 siRNA 入 RT-112 细胞的能力 | 第45-46页 |
| 4.2.9 ScFv-tp 运送 siRNA 对 RT-112 细胞在 mRNA 水平的影响 | 第46-47页 |
| 4.2.10 ScFv-tp 运送 siRNA 对 RT-112 细胞在蛋白水平的影响 | 第47-48页 |
| 4.3 实验小结 | 第48-49页 |
| 第五章 讨论 | 第49-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
