| 摘要 | 第3-9页 |
| ABSTRACT | 第9-14页 |
| 第一章 前言 | 第19-28页 |
| 1.1 原发性肝细胞癌研究概况 | 第19-22页 |
| 1.1.1 HCC流行病学特征 | 第19-20页 |
| 1.1.2 HCC病因与易感因素 | 第20-21页 |
| 1.1.3 HCC临床诊断及治疗 | 第21-22页 |
| 2.2 原发性肝细胞癌与药物代谢酶的关系研究概况 | 第22-26页 |
| 2.2.1 药物代谢酶研究进展 | 第22-24页 |
| 2.2.2 药物代谢酶与肿瘤发生及药物治疗的关系 | 第24-26页 |
| 2.3 立题依据 | 第26-28页 |
| 2.3.1 研究意义 | 第26-27页 |
| 2.3.2 研究目标 | 第27-28页 |
| 第二章 临床组织样本纳入及处理方法 | 第28-37页 |
| 2.1 临床病例信息及纳入标准 | 第28页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第28-30页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第28-30页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第30页 |
| 2.3 HCC肝组织微粒体的制备 | 第30-33页 |
| 2.3.1 所需溶液配制 | 第30-31页 |
| 2.3.2 肝微粒体制备流程 | 第31-32页 |
| 2.3.3 肝微粒总蛋白测定 | 第32-33页 |
| 2.4 HCC肝组织总RNA的提取 | 第33-37页 |
| 2.4.1 所需溶液配制 | 第33-34页 |
| 2.4.2 肝组织总RNA提取流程 | 第34-35页 |
| 2.4.3 cDNA的合成 | 第35-37页 |
| 第三章 HCC肿瘤组织中CYPs和UGTs蛋白表达变化研究 | 第37-85页 |
| 3.1 引言 | 第37-38页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第38-39页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第38-39页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-70页 |
| 3.3.1 LC-MS/MS测定肝组织蛋白基本原理 | 第39-40页 |
| 3.3.2 计算机辅助探针多肽设计 | 第40-43页 |
| 3.3.3 探针多肽合成及纯度检测 | 第43-54页 |
| 3.3.4 建立探针多肽LC-MS/MS检测方法 | 第54-59页 |
| 3.3.5 建立肝微粒体蛋白水解方法 | 第59-61页 |
| 3.3.6 建立固相萃取方法 | 第61页 |
| 3.3.7 方法学验证 | 第61-68页 |
| 3.3.8 测定HCC肿瘤组织及癌旁组织微粒体中CYPs和UGTs蛋白绝对含量 | 第68-69页 |
| 3.3.9 数据处理及统计学分析 | 第69-70页 |
| 3.4 实验结果 | 第70-80页 |
| 3.4.1 混合肝组织微粒体中CYPs及UGTs代谢酶蛋白表达特征 | 第70-73页 |
| 3.4.2 个体肿瘤组织与癌旁组织CYPs和UGTs蛋白差异性表达 | 第73-80页 |
| 3.5 讨论与结论 | 第80-85页 |
| 第四章 HCC肿瘤组织中CYPs酶活性及其对抗肿瘤药物处置能力变化研究 | 第85-142页 |
| 4.1 引言 | 第85-87页 |
| 4.2 仪器与试剂 | 第87-88页 |
| 4.2.1 主要仪器 | 第87页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第87页 |
| 4.2.3 所需溶液配制 | 第87-88页 |
| 4.3 HCC肿瘤组织中CYPs酶代谢活性变化研究 | 第88-127页 |
| 4.3.1 CYP1A2探针底物非那西丁的酶代动力学研究 | 第88-95页 |
| 4.3.2 CYP2A6探针底物香豆素的酶代动力学研究 | 第95-99页 |
| 4.3.3 CYP2C8探针底物紫杉醇的酶代动力学研究 | 第99-104页 |
| 4.3.4 CYP2C9探针底物甲苯磺丁脲的酶代动力学研究 | 第104-108页 |
| 4.3.5 CYP2D6探针底物右美沙芬的酶代动力学研究 | 第108-113页 |
| 4.3.6 CYP2E1探针底物氯唑沙宗的酶代动力学研究 | 第113-118页 |
| 4.3.7 CYP3A4探针底物睾酮的酶代动力学研究 | 第118-123页 |
| 4.3.8 HCC肿瘤组织中CYPs代谢酶蛋白分子催化能力变化研究 | 第123-127页 |
| 4.4 HCC肿瘤组织中CYPs酶对抗癌药物处置能力变化研究 | 第127-139页 |
| 4.4.1 HCC肿瘤组织对索拉菲尼处置能力变化研究 | 第127-134页 |
| 4.4.2 HCC肿瘤组织对替加氟处置能力变化研究 | 第134-139页 |
| 4.5 讨论与结论 | 第139-142页 |
| 第五章 HCC肿瘤组织中CYPs酶mRNA表达变化研究 | 第142-153页 |
| 5.1 引言 | 第142页 |
| 5.2 仪器与试剂 | 第142-143页 |
| 5.2.1 主要仪器 | 第142-143页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第143页 |
| 5.3 实验方法 | 第143-147页 |
| 5.3.1 PCR引物设计与合成 | 第143页 |
| 5.3.2 荧光实时定量PCR | 第143-146页 |
| 5.3.3 数据处理及统计学分析 | 第146-147页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第147-153页 |
| 第六章 CYPs酶活性、蛋白和基因表达水平相关性分析 | 第153-164页 |
| 6.1 实验方法 | 第153页 |
| 6.1.1 数据处理方法 | 第153页 |
| 6.1.2 统计学分析 | 第153页 |
| 6.2 实验结果 | 第153-162页 |
| 6.2.1 CYPs酶活性、蛋白和基因表达水平相关性分析 | 第153-154页 |
| 6.2.2 CYPs酶对抗癌药物处置能力与其表达水平相关性分析 | 第154-156页 |
| 6.2.3 CYPs酶各亚型表达水平相关性分析 | 第156-162页 |
| 6.3 讨论与结论 | 第162-164页 |
| 第七章 结论和展望 | 第164-168页 |
| 参考文献 | 第168-172页 |
| 缩略词 | 第172-174页 |
| 攻读学位期间成果 | 第174-175页 |
| 致谢 | 第175-177页 |
| 统计学审稿证明 | 第177页 |
