| 缩略词表(Abbreviation) | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-15页 |
| 前言 | 第15-21页 |
| 材料与方法 | 第21-38页 |
| 1. 材料 | 第21-23页 |
| 2.P ERV- WZSP- env基因的扩增与克隆 | 第23-30页 |
| ·PERV-WZSP-env序列分析 | 第23-24页 |
| ·PERV-WZSP-env基因引物设计与合成 | 第24-25页 |
| ·外周血单个核细胞的分离 | 第25页 |
| ·PBMC 总RNA的提取 | 第25页 |
| ·反转录合成cDNA第一链 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增产物的克隆与鉴定 | 第26-29页 |
| ·pHCMV-env重组表达质粒的构建及鉴定 | 第29-30页 |
| 3. 重组反转录病毒载体的构建 | 第30-31页 |
| ·MSCVneo-GFP的构建策略 | 第30页 |
| ·GFP基因引物设计与合成 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增GFP片段 | 第31页 |
| ·目的片段的纯化、回收 | 第31页 |
| ·反转录病毒载体MSCVneo双酶切及GFP连接 | 第31页 |
| ·反转录病毒载体的鉴定 | 第31页 |
| 4. 整合PERV囊膜的假型鼠白血病病毒的包装 | 第31-35页 |
| ·HEK293T细胞培养 | 第31-32页 |
| ·菌液扩大培养 | 第32页 |
| ·质粒DNA的中量提取及纯化 | 第32-34页 |
| ·假型反转录病毒的包装 | 第34-35页 |
| ·转染细胞基因组中env基因整合及转录情况的检测 | 第35页 |
| ·病毒浓缩 | 第35页 |
| ·假型病毒感染性的检测 | 第35页 |
| ·流式细胞仪测定假型反转录病毒的滴度 | 第35页 |
| 5.P ERV细胞感染谱分析 | 第35-38页 |
| ·细胞培养 | 第35-36页 |
| ·细胞感染实验 | 第36-37页 |
| ·细胞感染谱分析 | 第37-38页 |
| 结果 | 第38-53页 |
| 1. 五指山猪PERV-env核酸序列比对与进化分析结果 | 第38-40页 |
| ·五指山猪PERV-env核酸序列比对结果 | 第38-39页 |
| ·五指山猪PERV-Env氨基酸序列进化分析结果 | 第39-40页 |
| 2.P ERV-env基因扩增、克隆及鉴定结果 | 第40-44页 |
| ·PERV-env基因的PCR扩增结果 | 第40页 |
| ·pGEM-T-env重组质粒的鉴定结果与初步分析 | 第40-43页 |
| ·pHCMV-env表达质粒的鉴定结果 | 第43-44页 |
| 3.p MSCVneo-GFP的构建与鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·GFP基因PCR扩增结果 | 第44页 |
| ·重组反转录病毒载体pMSCVneo-GFP的构建及鉴定 | 第44-45页 |
| 4. 假型反转录病毒包装结果 | 第45-49页 |
| ·包装质粒转染HEK293T细胞结果 | 第45-47页 |
| ·转染细胞中env基因的整合及转录情况的检测结果 | 第47-48页 |
| ·假型病毒粒子的浓缩及鉴定 | 第48页 |
| ·假型病毒粒子感染性的检测 | 第48-49页 |
| ·假型反转录病毒滴度测定结果 | 第49页 |
| 5. 细胞感染谱的获得及分析 | 第49-53页 |
| ·假型反转录病毒感染多种细胞结果 | 第49-51页 |
| ·PERV-WZSP感染谱分析 | 第51-53页 |
| 讨论 | 第53-63页 |
| 1. 关于PERV的体外宿主范围细胞嗜性 | 第53-56页 |
| 2. 关于PERV-WZSP-A囊膜化的假型鼠干细胞病毒包装 | 第56-59页 |
| 3. 关于PERV-WZSP-A细胞感染谱 | 第59-61页 |
| 4.P ERV-Env关键区域的比对结果 | 第61-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 文献综述 | 第71-85页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 个人简历 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |