| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12页 |
| 第一章 绪论 | 第14-39页 |
| 1.1 转基因植物种类及其应用 | 第14-18页 |
| 1.1.1 品质改良转基因植物 | 第14-15页 |
| 1.1.2 抗病毒转基因植物 | 第15-16页 |
| 1.1.3 抗虫转基因植物 | 第16-17页 |
| 1.1.4 抗除草剂转基因植物 | 第17页 |
| 1.1.5 保健型转基因植物 | 第17-18页 |
| 1.2 植物转基因技术 | 第18-32页 |
| 1.2.1 农杆菌介导的基因转化 | 第18-20页 |
| 1.2.1.1 Ti和Ri质粒的特性 | 第19页 |
| 1.2.1.2 影响农杆菌转化的因素 | 第19-20页 |
| 1.2.2 种质转化系统 | 第20-21页 |
| 1.2.2.1 花粉管通道介导的基因转化 | 第20页 |
| 1.2.2.2 生殖细胞浸泡法介导的基因转化 | 第20-21页 |
| 1.2.3 直接基因转化系统 | 第21-32页 |
| 1.2.3.1 脂质体介导的基因转化 | 第21页 |
| 1.2.3.2 PEG介导的基因转化 | 第21页 |
| 1.2.3.3 显微注射介导的基因转化 | 第21-22页 |
| 1.2.3.4 电激介导的基因转化 | 第22页 |
| 1.2.3.5 离子束介导的基因转化 | 第22页 |
| 1.2.3.6 激光微束介导的基因转化 | 第22-23页 |
| 1.2.3.7 基因枪介导的基因转化 | 第23-32页 |
| 1.2.3.7.1 基因枪转化原理及其类型 | 第23-24页 |
| 1.2.3.7.2 影响基因枪转化频率的参数 | 第24-27页 |
| 1.2.3.7.3 基因枪技术在植物基因工程研究中的应用 | 第27-32页 |
| 1.3 茶树转化系统现状 | 第32-33页 |
| 1.3.1 农杆菌转化系统 | 第32-33页 |
| 1.3.2 基因枪在茶树遗传转化等方面的应用及前景 | 第33页 |
| 1.4 转基因植物的安全性 | 第33-35页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第35-39页 |
| 第二章 农杆菌转化系统的优化 | 第39-51页 |
| 2.1 材料和方法 | 第39-40页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 2.1.2 菌株及转化质粒 | 第39-40页 |
| 2.1.3 农杆菌活化及转化 | 第40页 |
| 2.1.4 GUS表达组织化学检验 | 第40页 |
| 2.1.5 抗性愈伤的诱导及筛选 | 第40页 |
| 2.2 结果与分析 | 第40-41页 |
| 2.2.1 不同预培养处理对GUS表达的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.2 不同预培养处理对抗性筛选的影响 | 第41页 |
| 2.2.3 不同质粒对抗性愈伤筛选的影响 | 第41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-51页 |
| 第三章 基因枪介导的转化系统的优化 | 第51-71页 |
| 3.1 材料和方法 | 第51-54页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 3.1.2 转化质粒 | 第51-52页 |
| 3.1.3 供试基因枪 | 第52页 |
| 3.1.4 钨粉预处理 | 第52页 |
| 3.1.5 微弹制备 | 第52页 |
| 3.1.6 转化体生理状态优化 | 第52-53页 |
| 3.1.6.1 不同预培养基对转化频率的影响 | 第53页 |
| 3.1.6.2 渗透处理对转化频率的影响 | 第53页 |
| 3.1.7 轰击条件优化 | 第53页 |
| 3.1.7.1 氮气压力、射程和轰击次数对表达频率的影响 | 第53页 |
| 3.1.7.2 微弹制备条件的优化 | 第53页 |
| 3.1.8 抗性愈伤的诱导及筛选 | 第53-54页 |
| 3.1.9 GUS表达组织化学分析 | 第54页 |
| 3.2 结果与分析 | 第54-56页 |
| 3.2.1 转化体优化 | 第54-55页 |
| 3.2.1.1 不同预培养处理对GUS表达的影响 | 第54页 |
| 3.2.1.2 渗透处理对转化频率的影响 | 第54-55页 |
| 3.2.2 轰击参数优化 | 第55-56页 |
| 3.2.2.1 氮气压力、射程和轰击次数对表达频率的影响 | 第55页 |
| 3.2.2.2 微弹制备条件对转化率的影响 | 第55-56页 |
| 3.2.3 不同质粒对抗性愈伤筛选的影响 | 第56页 |
| 3.3 讨论 | 第56-71页 |
| 第四章 农杆菌系统和基因枪系统结合转化 | 第71-81页 |
| 4.1 材料和方法 | 第71-73页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第71页 |
| 4.1.2 菌株及转化质粒 | 第71-72页 |
| 4.1.3 基因枪 | 第72页 |
| 4.1.4 基因枪轰击后农杆菌浸染转化 | 第72页 |
| 4.1.5 基因枪轰击农杆菌转化 | 第72-73页 |
| 4.1.6 GUS表达组织化学分析 | 第73页 |
| 4.1.7 抗性愈伤的诱导及筛选 | 第73页 |
| 4.2 结果 | 第73-74页 |
| 4.2.1 GUS瞬间表达 | 第73-74页 |
| 4.2.2 抗性愈伤组织的筛选 | 第74页 |
| 4.2.2.1 基因枪轰击后农杆浸染转化 | 第74页 |
| 4.2.2.2 不同茶树品种的转化率 | 第74页 |
| 4.2.2.3 不同转化方法间比较 | 第74页 |
| 4.3 讨论 | 第74-81页 |
| 第五章 总结 | 第81-83页 |
| 5.1 农杆菌转化 | 第81页 |
| 5.2 基因枪转化 | 第81页 |
| 5.3 农杆菌系统和基因枪系统结合转化 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-94页 |
| 附录: 术语与缩略语表 | 第94页 |
