| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 序言 | 第9-21页 |
| 1 弧菌病与其病原生物学研究 | 第9-12页 |
| 2 弧菌毒力因子 | 第12-17页 |
| ·粘附因子 | 第12-14页 |
| ·毒素共调菌毛(TCP) | 第13页 |
| ·非菌毛类粘附物质 | 第13-14页 |
| ·外毒素 | 第14-16页 |
| ·胞外酶 | 第14-15页 |
| ·溶血素 | 第15页 |
| ·肠毒素 | 第15-16页 |
| ·铁载体 | 第16页 |
| ·内毒素 | 第16-17页 |
| 3 溶藻弧菌的毒力基因和致病机理 | 第17页 |
| 4 单侧寡聚核苷酸嵌套PCR反应简介 | 第17-18页 |
| 5 原核生物表达体系 | 第18-20页 |
| ·原核生物表达体系的特点 | 第18页 |
| ·IMPACT KIT | 第18-20页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 溶藻弧菌毒力菌株特异基因全长序列的克隆与分析 | 第21-64页 |
| 1 实验材料 | 第21页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第21页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·13条毒力菌株特异基因核心序列 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-24页 |
| ·SON-PCR引物设计 | 第22页 |
| ·溶藻弧菌HN08155基组因DNA的提取 | 第22页 |
| ·SON-PCR通用条件反应程序 | 第22-23页 |
| ·毒力菌株特异基因核心序列的侧翼序列测定、拼接与分析 | 第23-24页 |
| 3 实验结果 | 第24-64页 |
| ·SON-PCR引物设计 | 第24-26页 |
| ·通用条件下的SON-PCR反应结果 | 第26-27页 |
| ·SON-PCR反应条件的优化 | 第27-30页 |
| ·毒力菌株特异基因核心序列的侧翼序列测定拼接与分析 | 第30-60页 |
| ·c26全长序列与相关信息分析 | 第31-34页 |
| ·H76全长序列与相关信息分析 | 第34-38页 |
| ·J2全长序列与相关信息分析 | 第38-41页 |
| ·j5全长序列与相关信息分析 | 第41-44页 |
| ·K35全长序列和相关信息分析 | 第44-46页 |
| ·m25全长序列与相关信息分析 | 第46-49页 |
| ·n4全长序列与相关信息分析 | 第49-54页 |
| ·t75全长序列与相关信息分析 | 第54-57页 |
| ·W90全长序列及相关信息分析 | 第57-59页 |
| ·f26全长序列及相关信息分析 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-64页 |
| 第三章 K35-VSS基因的原核表达 | 第64-76页 |
| 1 实验材料 | 第64-65页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第64页 |
| ·实验用缓冲液 | 第64-65页 |
| ·K35-vss基因序列 | 第65页 |
| 2 实验方法 | 第65-69页 |
| ·重组质粒的构建 | 第65-67页 |
| ·K35-vss的PCR扩增 | 第65页 |
| ·K35-vss基因与质粒的双酶切 | 第65-66页 |
| ·双酶切产物的连接反应 | 第66-67页 |
| ·表达K35-vss基因 | 第67-69页 |
| ·表达条件的优化 | 第67页 |
| ·K35-vss蛋白的诱导 | 第67-68页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第68页 |
| ·K35-vss蛋白的纯化 | 第68-69页 |
| ·包涵体的纯化与复性 | 第69页 |
| 3 实验结果 | 第69-74页 |
| ·重组质粒的构建 | 第69-71页 |
| ·K35-vss基因的表达 | 第71-73页 |
| ·包涵体的纯化与复性 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 附录 | 第83-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 已发表及投出的文章 | 第88页 |
