| 目录 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-30页 |
| 第一章 圆环病毒以及类猪圆环病毒的研究进展 | 第12-30页 |
| 1 病原学研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1 病毒学分类地位 | 第13-14页 |
| 1.2 病毒的形态结构与理化特性 | 第14页 |
| 1.3 培养特性 | 第14-15页 |
| 2 分子生物学特性 | 第15-16页 |
| 2.1 病毒的基因组特征 | 第15页 |
| 2.2 病毒基因编码的蛋白及特征 | 第15-16页 |
| 3 致病机理 | 第16-18页 |
| 3.1 PCV2感染对猪免疫系统的影响 | 第16-17页 |
| 3.2 PCV2感染对免疫细胞的影响 | 第17页 |
| 3.3 PCV2感染对细胞因子的影响 | 第17-18页 |
| 3.4 对PCV2致病有重要作用的因素 | 第18页 |
| 4 相关疾病及病理变化 | 第18-20页 |
| 4.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) | 第18-19页 |
| 4.2 猪皮炎肾病综合征(PDNS) | 第19页 |
| 4.3 猪先天性震颤(CT) | 第19页 |
| 4.4 猪呼吸道综合征(PRDC) | 第19-20页 |
| 4.5 繁殖障碍性疾病 | 第20页 |
| 4.6 猪增生性和坏死性肺炎(PNP) | 第20页 |
| 5 实验室诊断 | 第20-25页 |
| 5.1 病毒的分离 | 第21页 |
| 5.2 电镜观察 | 第21页 |
| 5.3 PCR技术 | 第21-23页 |
| 5.4 间接免疫荧光实验(IFA) | 第23页 |
| 5.5 免疫组织化学技术(IHC) | 第23页 |
| 5.6 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第23-24页 |
| 5.7 原位核酸杂交实验(ISH) | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 第二部分 实验部分 | 第30-74页 |
| 第一章 类猪圆环病毒因子P1 3pCap串联蛋白原核表达和优化 | 第30-52页 |
| 摘要 | 第30-31页 |
| 1 材料和方法 | 第31-40页 |
| 1.1 质粒和菌株 | 第31页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第31页 |
| 1.3 pCap基因的扩增 | 第31-33页 |
| 1.4 pCap基因的T-A克隆 | 第33-34页 |
| 1.5 重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| 1.6 pET-28a-3pCap重组质粒的构建及鉴定 | 第35-37页 |
| 1.7 3pCap蛋白的诱导表达及条件优化 | 第37-38页 |
| 1.8 重组蛋白的纯化和浓度测定 | 第38-39页 |
| 1.9 Western blotting鉴定 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-47页 |
| 2.1 基因的PCR扩增 | 第40页 |
| 2.2 pMD18-T-前段pCap、pMD18-T-中段pCap和pMD18-T-后段pCap三种重组质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3 测序结果分析 | 第41页 |
| 2.4 pET-28a-前段pCap重组质粒的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 2.5 pET-28a-前段pCap-中段pCap重组质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| 2.6 pET-28a-3pCap重组质粒酶切鉴定 | 第43页 |
| 2.7 pMD18-T-3pCap重组质粒的测序验证 | 第43页 |
| 2.8 3pCap重组蛋白的表达及表达形式鉴定 | 第43-44页 |
| 2.9 诱导条件的优化 | 第44-46页 |
| 2.10 重组蛋白的纯化 | 第46页 |
| 2.11 Western blotting检测 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| Abstract | 第50-52页 |
| 第二章 基于类猪圆环病毒因子P1 3pCap串联蛋白的间接ELISA的建立 | 第52-68页 |
| 摘要 | 第52-53页 |
| 1 材料和方法 | 第53-56页 |
| 1.1 抗原和血清 | 第53页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第53页 |
| 1.3 3pCap-间接ELISA反应条件的优化 | 第53-54页 |
| 1.4 间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第54-55页 |
| 1.5 特异性实验 | 第55页 |
| 1.6 敏感性实验 | 第55页 |
| 1.7 保存期实验 | 第55页 |
| 1.8 重复性实验 | 第55页 |
| 1.9 间接ELISA方法与间接免疫荧光实验检测结果的比较 | 第55-56页 |
| 2 结果 | 第56-64页 |
| 2.1 3pCap-间接ELISA反应条件的优化 | 第56-61页 |
| 2.2 阴阳性临界值的判定 | 第61页 |
| 2.3 特异性实验 | 第61-62页 |
| 2.4 敏感性实验 | 第62页 |
| 2.5 保存期实验 | 第62页 |
| 2.6 重复性实验 | 第62-63页 |
| 2.7 间接ELISA方法与间接免疫荧光实验检测结果的比较 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| ABSTRACT | 第67-68页 |
| 第三章 江苏省以及周边四省市类猪圆环病毒因子P1流行病学调查 | 第68-74页 |
| 摘要 | 第68页 |
| 1 材料和方法 | 第68-69页 |
| 1.1 血清样品 | 第68-69页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第69页 |
| 1.3 操作步骤 | 第69页 |
| 2 结果 | 第69-70页 |
| 2.1 五省市送检血清的检测 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-73页 |
| Abstract | 第73-74页 |
| 全文总结 | 第74-76页 |
| 附录 常用试剂配制 | 第76-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
