| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-47页 |
| 1 植物抗病反应的分子生物学研究 | 第11-15页 |
| 1．1 抗病机制模型 | 第11-12页 |
| 1．2 抗病基因的研究进展 | 第12-14页 |
| 1．3 信号传导与防卫基因 | 第14-15页 |
| 1．3．1 信号传导 | 第14-15页 |
| 1．3．2 防卫基因 | 第15页 |
| 2 小麦白粉病抗病相关基因的研究 | 第15-18页 |
| 2．1 小麦白粉病抗病基因 | 第16页 |
| 2．2 小麦抗白粉病防卫基因的研究 | 第16-18页 |
| 3 EST技术及其应用 | 第18-27页 |
| 3．1 EST与植物EST计划 | 第18-23页 |
| 3．1．1 EST技术 | 第18-19页 |
| 3．1．2 植物基因组计划 | 第19-20页 |
| 3．1．3 小麦EST计划研究进展 | 第20-23页 |
| 3．2 EST技术的应用 | 第23-26页 |
| 3．3 EST技术中常遇的两个问题 | 第26-27页 |
| 4 功能基因组学与基因表达谱 | 第27-35页 |
| 4．1 功能基因组学 | 第27-28页 |
| 4．2 基因功能研究内容 | 第28-31页 |
| 4．2．1 基因功能的分类 | 第28-30页 |
| 4．2．2 基因表达谱 | 第30页 |
| 4．2．3 蛋白质组学 | 第30-31页 |
| 4．3 基因功能的研究方法与技术 | 第31-35页 |
| 4．3．1 在转录水平上的研究方法 | 第31-33页 |
| 4．3．2 在蛋白质水平上的研究方法 | 第33-34页 |
| 4．3．3 应用反求遗传学的方法 | 第34-35页 |
| 5 差减文库构建的几种方法 | 第35-41页 |
| 5．1 差减文库的构建原理 | 第35-36页 |
| 5．2 几种差减杂交方法 | 第36-40页 |
| 5．2．1 羟基磷灰石柱层析法（HAP） | 第36页 |
| 5．2．2 生物素标记、链亲和蛋白结合排除法 | 第36页 |
| 5．2．3 限制性内切酶与PCR技术相结合的差减方法 | 第36-37页 |
| 5．2．4 差减抑制杂交法（SSH） | 第37-39页 |
| 5．2．5 磁珠介导的差减法（MAST） | 第39-40页 |
| 5．3 构建差减文库的载体系统 | 第40-41页 |
| 6 生物信息学 | 第41-45页 |
| 6．1 生物信息学数据库 | 第42-44页 |
| 6．1．1 核酸与蛋白质序列数据库 | 第42-43页 |
| 6．1．2 生物数据库的发展特点 | 第43页 |
| 6．1．3 数据库的网络服务 | 第43-44页 |
| 6．2 生物信息学软件 | 第44-45页 |
| 7 研究目的与实验设计 | 第45-47页 |
| 7．1 目的 | 第45-46页 |
| 7．2 实验流程 | 第46-47页 |
| 第二章 白粉病菌诱导的小麦普通cDNA文库构建与EST研究 | 第47-66页 |
| 1 研究材料与方法 | 第47-51页 |
| 1．1 材料与处理 | 第47-48页 |
| 1．2 总RNA的提取与检测 | 第48页 |
| 1．3 cDNA文库构建与转化菌筛选 | 第48-49页 |
| 1．4 质粒的提取与纯化 | 第49-50页 |
| 1．5 测序与分析 | 第50页 |
| 1．6 反向Northern blot分析 | 第50-51页 |
| 1．6．1 高密度PCR点阵膜的制备 | 第50页 |
| 1．6．2 反转录标记探针 | 第50-51页 |
| 1．6．3 差减探针标记 | 第51页 |
| 1．6．4 杂交及检测 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-62页 |
| 2．1 总RNA检测结果 | 第51页 |
| 2．2 未扩增cDNA文库的滴度与转化效率 | 第51-52页 |
| 2．3 EST的产生 | 第52页 |
| 2．4 EST分析结果 | 第52-60页 |
| 2．4．1 BLASTn的分析结果 | 第52-56页 |
| 2．4．2 BLASTx的分析结果 | 第56-60页 |
| 2．5 反向Northern blot结果 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-66页 |
| 3．1 文库构建 | 第63页 |
| 3．2 文库的转化 | 第63-64页 |
| 3．3 与抗病相关的代谢途径 | 第64-65页 |
| 3．4 EST技术用于植物抗病机制研究的评价 | 第65-66页 |
| 第三章 白粉病菌诱导小麦抑制差减文库的构建与文库质量分析 | 第66-76页 |
| 1 材料与方法 | 第67-70页 |
| 1．1 材料与处理 | 第67页 |
| 1．2 总RNA提取与mRNA分离与纯化 | 第67-69页 |
| 1．3．1 cDNA第一链的合成 | 第67-68页 |
| 1．3．2 cDNA第二链的合成 | 第68页 |
| 1．3．3 双链cDNA RsaⅠ酶切与连接接头 | 第68-69页 |
| 1．3．4 二次差减杂交反应 | 第69页 |
| 1．3．5 二次PCR扩增反应和差减效率分析 | 第69页 |
| 1．4 差减cDNA文库的构建 | 第69页 |
| 1．5 质粒提取 | 第69-70页 |
| 2 结果与讨论 | 第70-75页 |
| 2．1 文库构建样品的总RNA与mRNA浓度与质量检测结果 | 第70-72页 |
| 2．2 差减杂交后两次PCR产物的分析 | 第72-73页 |
| 2．3 差减文库的滴度 | 第73页 |
| 2．4 差减文库的插入片段大小 | 第73-75页 |
| 3 小结 | 第75-76页 |
| 第四章 基于抑制差减杂交文库的小麦抗白粉病相关基因表达谱研究 | 第76-110页 |
| 1 材料与方法 | 第77-79页 |
| 1．1 SSH文库构建 | 第78页 |
| 1．1．1 材料与处理 | 第78页 |
| 1．1．2 总RNA提取与mRNA分离与纯化 | 第78页 |
| 1．1．3 抑制差减杂交、差减cDNA文库的构建 | 第78页 |
| 1．2 质粒提取与测序 | 第78页 |
| 1．2．1 质粒提取 | 第78页 |
| 1．2．2 测序 | 第78页 |
| 1．3 序列分析 | 第78页 |
| 1．4 差示筛选差减cDNA文库 | 第78-79页 |
| 1．4．1 PCR产物点阵列杂交膜制备 | 第78-79页 |
| 1．4．2 制备差示筛选探针 | 第79页 |
| 1．4 杂交及结果检测分析 | 第79页 |
| 2 结果 | 第79-100页 |
| 2．1 EST获得与分析 | 第79-92页 |
| 2．2 差示筛选差减cDNA文库结果 | 第92-100页 |
| 3 讨论 | 第100-110页 |
| 3．1 白粉病菌接种初期抗病反应相关过程 | 第100-105页 |
| 3．1．1 抗病信号传导途径 | 第101-103页 |
| 3．1．2 防卫反应基因 | 第103-104页 |
| 3．1．3 细胞保护机制与其它 | 第104-105页 |
| 3．2 SSH文库在抗病基因表达谱研究中的优越性 | 第105-107页 |
| 3．3 基于SSH文库的EST测序量 | 第107-108页 |
| 3．4 差示筛选时的探针标记方法 | 第108-109页 |
| 3．5 功能已知基因的确定 | 第109-110页 |
| 第五章 生物信息学在EST研究中的应用 | 第110-129页 |
| 1 建立数据库与开发相关软件 | 第111-115页 |
| 1．1 建立数据库 | 第111页 |
| 1．2 相关软件开发 | 第111-115页 |
| 1．2．1 多序列相同性比较软件—SEQEDIT | 第111-113页 |
| 1．2．2 序列同源比较的批提交软件—blasetW2 | 第113-115页 |
| 1．2．3 序列格式转换软件—SEQTOOL | 第115页 |
| 2 未知功能EST的同源比较分析 | 第115页 |
| 3 目的EST片段的拼接与电子延伸 | 第115-126页 |
| 3．1 过氧化氢酶（catalase）基因的拼接 | 第116-123页 |
| 3．2 未知功能EST的电子拼接与延长 | 第123-126页 |
| 4 R基因同源分析 | 第126-128页 |
| 5 小结 | 第128-129页 |
| 第六章 总结 | 第129-135页 |
| 1 抗病相关基因表达谱构建的技术体系 | 第129-131页 |
| 1．1 抗病相关cDNA文库构建方法 | 第129页 |
| 1．2 EST技术 | 第129-130页 |
| 1．3 高密度点阵杂交检测技术 | 第130页 |
| 1．4 其它 | 第130-131页 |
| 2 抗病基因表达谱研究合理的技术路线 | 第131页 |
| 3 建立抗病相关基因表达谱与抗病机制初探 | 第131-133页 |
| 3．1 抗病相关基因表达谱 | 第131-132页 |
| 3．2 白粉病抗病机制初探 | 第132-133页 |
| 3．2．1 信号传导途径 | 第132页 |
| 3．2．2 SAR表达基因 | 第132-133页 |
| 3．2．3 细胞保护机制 | 第133页 |
| 3．2．4 其它 | 第133页 |
| 3．3 抗病EST研究对育种工作的启示 | 第133页 |
| 4 生物信息学分析方法在EST分析中的应用 | 第133-134页 |
| 4．1 建立数据库与开发软件 | 第133-134页 |
| 4．2 寻找抗病相关新基因 | 第134页 |
| 4．3 基于计算机的序列拼接与延伸 | 第134页 |
| 5 完成ITEC协议任务 | 第134-135页 |
| 参考文献 | 第135-151页 |
| 英文摘要 | 第151页 |
