| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第8-16页 |
| 1.1 棉花简介 | 第8-9页 |
| 1.1.1 棉花起源 | 第8页 |
| 1.1.2 棉花分类 | 第8-9页 |
| 1.1.3 棉花株型 | 第9页 |
| 1.2 棉花重要性状克隆 | 第9-11页 |
| 1.2.1 棉花质量性状的定位 | 第9-11页 |
| 1.2.2 棉花零式果枝的定位 | 第11页 |
| 1.3 TFL1/CEN基因的概述 | 第11-15页 |
| 1.3.1 PEBP基因家族 | 第11-13页 |
| 1.3.2 TFL1/CEN基因研究进展 | 第13-15页 |
| 1.4 研究目的意义 | 第15-16页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第16-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 酶与试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 抗生素、培养基、重悬液和试剂的配制 | 第17-18页 |
| 2.1.4 菌株与质粒 | 第18页 |
| 2.1.5 主要使用仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.1.6 引物 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 棉花基因组DNA的提取 | 第19页 |
| 2.2.2 棉花基因组RNA的提取及检测 | 第19-20页 |
| 2.2.3 RNA反转录为cDNA的过程 | 第20-21页 |
| 2.3 GhCEN基因克隆 | 第21-23页 |
| 2.3.1 GhCEN基因片段的扩增 | 第21页 |
| 2.3.2 目的片段的回收 | 第21页 |
| 2.3.3 载体与目的片段的连接 | 第21页 |
| 2.3.4 热激转化大肠杆菌Trans1-T1感受态细胞 | 第21页 |
| 2.3.5 阳性克隆PCR检测 | 第21-22页 |
| 2.3.6 重组质粒的提取及检测 | 第22-23页 |
| 2.4 GhCEN基因qRT-PCR | 第23-24页 |
| 2.4.1 实验材料的处理 | 第23页 |
| 2.4.2 荧光定量PCR反应体系及程序 | 第23页 |
| 2.4.3 qRT-PCR数据处理 | 第23-24页 |
| 2.5 植物超表达载体的构建 | 第24-27页 |
| 2.5.1 PBI121-GhCEN表达载体的构建 | 第24页 |
| 2.5.2 重组质粒转化农杆菌GV3101感受态细胞 | 第24-25页 |
| 2.5.3 花序侵染法转化拟南芥 | 第25-27页 |
| 2.6 棉花遗传实验 | 第27-30页 |
| 2.6.1 CLCrV-A-GhCEN表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.6.2 重组质粒转化农杆菌GV3101感受态细胞 | 第28页 |
| 2.6.3 棉花VIGS体系的构建 | 第28-29页 |
| 2.6.4 VIGS棉花幼苗的获得 | 第29页 |
| 2.6.5 培养接种 | 第29-30页 |
| 第3章 结果与分析 | 第30-46页 |
| 3.1 GhCEN基因克隆及生物学信息分析 | 第30-36页 |
| 3.1.1 GhCEN基因的克隆与分析 | 第30-34页 |
| 3.1.2 GhCEN同源基因蛋白序列的比对与进化树分析 | 第34-36页 |
| 3.2 GhCEN基因表达模式分析 | 第36-40页 |
| 3.2.1 棉花总RNA的提取及目标基因的合成 | 第36页 |
| 3.2.2 GhCEN基因组织表达模式分析 | 第36-39页 |
| 3.2.3 GhCEN基因时空表达模式 | 第39-40页 |
| 3.3 超表达GhCEN在拟南芥的功能分析 | 第40-44页 |
| 3.3.1 PBI121-GhCEN基因植物表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.3.2 重组质粒转化农杆菌GV3101 | 第41页 |
| 3.3.3 超表达转基因拟南芥的获得 | 第41页 |
| 3.3.4 超表达载体转GhCEN基因拟南芥T_0代检测 | 第41页 |
| 3.3.5 转基因拟南芥T_1代GhCEN基因的表达检测 | 第41-42页 |
| 3.3.6 转基因拟南芥的性状观察及功能分析 | 第42-44页 |
| 3.4 棉花VIGS相关功能初步分析 | 第44-46页 |
| 3.4.1 病毒诱导基因沉默载体的构建 | 第44页 |
| 3.4.2 农杆菌工程菌的获得 | 第44页 |
| 3.4.3 利用VIGS技术获得转基因植株及棉花GhCEN基因功能初步分析 | 第44-46页 |
| 第4章 结论与讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 全文结论 | 第46页 |
| 4.2 讨论 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
