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抗稻瘟病新基因Pi65(t)候选基因CRISPR/Cas9载体的构建及遗传转化

摘要第10-12页
ABSTRACT第12-13页
第一章 文献综述第14-23页
    1.1 稻瘟病发生概况第14-15页
        1.1.1 稻瘟病发生概况及危害第14页
        1.1.2 稻瘟病菌的侵染过程第14页
        1.1.3 稻瘟病菌的侵染循环第14-15页
    1.2 抗稻瘟病基因的研究进展第15-18页
        1.2.1 抗稻瘟病基因的定位第15-16页
        1.2.2 抗稻瘟病基因的克隆第16-17页
        1.2.3 在育种上抗稻瘟病基因的应用第17-18页
    1.3 CRISPR/Cas基因编辑技术第18-20页
        1.3.1 CRISPR/Cas基因编辑技术简介第18-19页
        1.3.2 CRISPR/Cas基因编辑技术的进展第19页
        1.3.3 CRISPR/Cas9系统的构成第19页
        1.3.4 CRISPR/Cas9系统的作用机理第19-20页
        1.3.5 CRISPR/Cas9系统在植物基因编辑中的应用第20页
    1.4 本研究的目的和意义第20-23页
第二章 辽宁地区水稻资源抗稻瘟病基因的检测分析第23-36页
    2.1 材料与方法第23-25页
        2.1.1 试验材料第23-24页
        2.1.2 抗稻瘟病表型鉴定方法第24页
        2.1.3 抗稻瘟病基因型鉴定方法第24-25页
    2.2 结果与分析第25-33页
        2.2.1 176份水稻资源的抗稻瘟病表型鉴定第25-26页
        2.2.2 8个抗稻瘟病基因在不同类型水稻资源中的分布及其抗病效应分析第26-33页
    2.3 讨论第33-35页
        2.3.1 抗稻瘟病基因在水稻材料中的分布情况及其对抗病性的贡献第33-34页
        2.3.2 不同抗稻瘟病基因的抗病效应第34-35页
    2.4 结论第35-36页
第三章 抗稻瘟病基因Pi65(t)候选基因的筛选第36-50页
    3.1 材料和方法第36-40页
        3.1.1 水稻材料第36页
        3.1.2 基因组DNA的提取第36-37页
        3.1.3 引物的设计第37-38页
        3.1.4 PCR扩增第38页
        3.1.5 电泳检测PCR扩增结果第38页
        3.1.6 PCR产物序列比对第38-39页
        3.1.7 候选基因的诱导表达鉴定第39-40页
    3.2 结果与分析第40-47页
        3.2.1 候选基因Os11g0694500的扩增结果及序列分析第40-41页
        3.2.2 候选基因Os11g0694600的扩增结果及序列分析第41-42页
        3.2.3 候选基因Os11g0694850的序列扩增结果及序列分析第42-44页
        3.2.4 候选基因Os11g0695000的序列扩增结果第44页
        3.2.5 候选基因的诱导表达分析第44-47页
    3.3 讨论第47-48页
        3.3.1 Os11g0694500第47页
        3.3.2 Os11g0694600第47-48页
        3.3.3 Os11g0694850第48页
        3.3.4 Os11g0695000第48页
    3.4 结论第48-50页
第四章 Pi65(t)候选基因的敲除载体构建及遗传转化第50-66页
    4.1 材料与方法第50-57页
        4.1.1 水稻材料、供试菌株和载体第50页
        4.1.2 主要试剂第50页
        4.1.3 培养基配制第50-51页
        4.1.4 CRISPR/Cas9敲除载体的构建第51-54页
        4.1.5 农杆菌介导水稻表达载体的构建第54-55页
        4.1.6 CRISPR/Cas9敲除载体转入港育129第55-57页
    4.2 结果分析第57-63页
        4.2.1 3个候选基因敲除载体的构建第57-61页
        4.2.2 农杆菌的阳性克隆鉴定第61页
        4.2.3 敲除载体的遗传转化第61-63页
        4.2.4 Os11g0694850敲除转化子的基因型鉴定第63页
    4.3 讨论第63-64页
    4.4 结论第64-66页
参考文献第66-71页
附录第71-77页
致谢第77-78页
攻读学位论文期间发表文章第78页

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