摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-23页 |
1.1 稻瘟病发生概况 | 第14-15页 |
1.1.1 稻瘟病发生概况及危害 | 第14页 |
1.1.2 稻瘟病菌的侵染过程 | 第14页 |
1.1.3 稻瘟病菌的侵染循环 | 第14-15页 |
1.2 抗稻瘟病基因的研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 抗稻瘟病基因的定位 | 第15-16页 |
1.2.2 抗稻瘟病基因的克隆 | 第16-17页 |
1.2.3 在育种上抗稻瘟病基因的应用 | 第17-18页 |
1.3 CRISPR/Cas基因编辑技术 | 第18-20页 |
1.3.1 CRISPR/Cas基因编辑技术简介 | 第18-19页 |
1.3.2 CRISPR/Cas基因编辑技术的进展 | 第19页 |
1.3.3 CRISPR/Cas9系统的构成 | 第19页 |
1.3.4 CRISPR/Cas9系统的作用机理 | 第19-20页 |
1.3.5 CRISPR/Cas9系统在植物基因编辑中的应用 | 第20页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第20-23页 |
第二章 辽宁地区水稻资源抗稻瘟病基因的检测分析 | 第23-36页 |
2.1 材料与方法 | 第23-25页 |
2.1.1 试验材料 | 第23-24页 |
2.1.2 抗稻瘟病表型鉴定方法 | 第24页 |
2.1.3 抗稻瘟病基因型鉴定方法 | 第24-25页 |
2.2 结果与分析 | 第25-33页 |
2.2.1 176份水稻资源的抗稻瘟病表型鉴定 | 第25-26页 |
2.2.2 8个抗稻瘟病基因在不同类型水稻资源中的分布及其抗病效应分析 | 第26-33页 |
2.3 讨论 | 第33-35页 |
2.3.1 抗稻瘟病基因在水稻材料中的分布情况及其对抗病性的贡献 | 第33-34页 |
2.3.2 不同抗稻瘟病基因的抗病效应 | 第34-35页 |
2.4 结论 | 第35-36页 |
第三章 抗稻瘟病基因Pi65(t)候选基因的筛选 | 第36-50页 |
3.1 材料和方法 | 第36-40页 |
3.1.1 水稻材料 | 第36页 |
3.1.2 基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
3.1.3 引物的设计 | 第37-38页 |
3.1.4 PCR扩增 | 第38页 |
3.1.5 电泳检测PCR扩增结果 | 第38页 |
3.1.6 PCR产物序列比对 | 第38-39页 |
3.1.7 候选基因的诱导表达鉴定 | 第39-40页 |
3.2 结果与分析 | 第40-47页 |
3.2.1 候选基因Os11g0694500的扩增结果及序列分析 | 第40-41页 |
3.2.2 候选基因Os11g0694600的扩增结果及序列分析 | 第41-42页 |
3.2.3 候选基因Os11g0694850的序列扩增结果及序列分析 | 第42-44页 |
3.2.4 候选基因Os11g0695000的序列扩增结果 | 第44页 |
3.2.5 候选基因的诱导表达分析 | 第44-47页 |
3.3 讨论 | 第47-48页 |
3.3.1 Os11g0694500 | 第47页 |
3.3.2 Os11g0694600 | 第47-48页 |
3.3.3 Os11g0694850 | 第48页 |
3.3.4 Os11g0695000 | 第48页 |
3.4 结论 | 第48-50页 |
第四章 Pi65(t)候选基因的敲除载体构建及遗传转化 | 第50-66页 |
4.1 材料与方法 | 第50-57页 |
4.1.1 水稻材料、供试菌株和载体 | 第50页 |
4.1.2 主要试剂 | 第50页 |
4.1.3 培养基配制 | 第50-51页 |
4.1.4 CRISPR/Cas9敲除载体的构建 | 第51-54页 |
4.1.5 农杆菌介导水稻表达载体的构建 | 第54-55页 |
4.1.6 CRISPR/Cas9敲除载体转入港育129 | 第55-57页 |
4.2 结果分析 | 第57-63页 |
4.2.1 3个候选基因敲除载体的构建 | 第57-61页 |
4.2.2 农杆菌的阳性克隆鉴定 | 第61页 |
4.2.3 敲除载体的遗传转化 | 第61-63页 |
4.2.4 Os11g0694850敲除转化子的基因型鉴定 | 第63页 |
4.3 讨论 | 第63-64页 |
4.4 结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
附录 | 第71-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读学位论文期间发表文章 | 第78页 |