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毕氏酵母中重组人白介素15的表达纯化及其生物学活性鉴定研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 研究背景第8-27页
    1.1 重组蛋白表达系统第8-19页
        1.1.1 大肠杆菌表达系统第8-10页
        1.1.2 酵母表达系统第10-15页
        1.1.3 丝状真菌表达系统第15页
        1.1.4 杆状病毒表达系统第15-16页
        1.1.5 哺乳动物细胞表达系统第16-18页
        1.1.6 植物表达系统第18-19页
    1.2 白介素15第19-27页
        1.2.1 白介素15结构第19-20页
        1.2.2 白介素15信号通路第20-22页
        1.2.3 白介素15与肿瘤第22-24页
        1.2.4 白介素15的临床前研究第24-25页
        1.2.5 白介素15毒性第25-27页
第二章 材料与方法第27-44页
    2.1 实验材料第27-33页
        2.1.1 仪器第27-29页
        2.1.2 常规试剂及试剂盒第29-30页
        2.1.3 耗材第30-31页
        2.1.4 菌株及质粒第31页
        2.1.5 溶液配制第31-33页
    2.2 实验方法第33-44页
        2.2.1 毕氏酵母分泌型pPICZαA-Pro-rhIL-15-Tag表达载体构建第33-37页
        2.2.2 载体pPICZaA-Pro-rhIL-15-Tag转化毕氏酵母X-33菌株第37-38页
        2.2.3 白介素15多拷贝子高水平分泌表达酵母转化子的筛选第38页
        2.2.4 rhIL-15/X-33多拷贝酵母转化子的小量诱导表达第38-40页
        2.2.5 rhIL-15在摇瓶条件下的扩大表达第40-41页
        2.2.6 毕氏酵母表达上清中rhIL-15的纯化第41页
        2.2.7 肽指纹图谱分析及比对第41-42页
        2.2.8 rhIL-15的去糖基化第42页
        2.2.9 rhIL-15的生物学活性测定第42-44页
第三章 结果与分析第44-55页
    3.1 重组白介素15表达载体pPICZαA-Pro-rhIL-15-Tag构建第44-46页
    3.2 重组白介素15高拷贝表达菌株筛选第46页
    3.3 rhIL-15/X-33表达菌株小量诱导表达第46-47页
    3.4 rhIL-15/X-33表达菌株大量诱导表达纯化第47-49页
    3.5 rhIL-15肽脂纹图谱分析第49-50页
    3.6 rhIL-15的去糖基化第50-52页
    3.7 rhIL-15的生物学活性测定第52-55页
第四章 讨论第55-57页
第五章 本文小结第57-58页
附录第58-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
在读期间(待)发表的学术论文与取得的其他研究成果第67页

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