摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 研究背景 | 第8-27页 |
1.1 重组蛋白表达系统 | 第8-19页 |
1.1.1 大肠杆菌表达系统 | 第8-10页 |
1.1.2 酵母表达系统 | 第10-15页 |
1.1.3 丝状真菌表达系统 | 第15页 |
1.1.4 杆状病毒表达系统 | 第15-16页 |
1.1.5 哺乳动物细胞表达系统 | 第16-18页 |
1.1.6 植物表达系统 | 第18-19页 |
1.2 白介素15 | 第19-27页 |
1.2.1 白介素15结构 | 第19-20页 |
1.2.2 白介素15信号通路 | 第20-22页 |
1.2.3 白介素15与肿瘤 | 第22-24页 |
1.2.4 白介素15的临床前研究 | 第24-25页 |
1.2.5 白介素15毒性 | 第25-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-44页 |
2.1 实验材料 | 第27-33页 |
2.1.1 仪器 | 第27-29页 |
2.1.2 常规试剂及试剂盒 | 第29-30页 |
2.1.3 耗材 | 第30-31页 |
2.1.4 菌株及质粒 | 第31页 |
2.1.5 溶液配制 | 第31-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-44页 |
2.2.1 毕氏酵母分泌型pPICZαA-Pro-rhIL-15-Tag表达载体构建 | 第33-37页 |
2.2.2 载体pPICZaA-Pro-rhIL-15-Tag转化毕氏酵母X-33菌株 | 第37-38页 |
2.2.3 白介素15多拷贝子高水平分泌表达酵母转化子的筛选 | 第38页 |
2.2.4 rhIL-15/X-33多拷贝酵母转化子的小量诱导表达 | 第38-40页 |
2.2.5 rhIL-15在摇瓶条件下的扩大表达 | 第40-41页 |
2.2.6 毕氏酵母表达上清中rhIL-15的纯化 | 第41页 |
2.2.7 肽指纹图谱分析及比对 | 第41-42页 |
2.2.8 rhIL-15的去糖基化 | 第42页 |
2.2.9 rhIL-15的生物学活性测定 | 第42-44页 |
第三章 结果与分析 | 第44-55页 |
3.1 重组白介素15表达载体pPICZαA-Pro-rhIL-15-Tag构建 | 第44-46页 |
3.2 重组白介素15高拷贝表达菌株筛选 | 第46页 |
3.3 rhIL-15/X-33表达菌株小量诱导表达 | 第46-47页 |
3.4 rhIL-15/X-33表达菌株大量诱导表达纯化 | 第47-49页 |
3.5 rhIL-15肽脂纹图谱分析 | 第49-50页 |
3.6 rhIL-15的去糖基化 | 第50-52页 |
3.7 rhIL-15的生物学活性测定 | 第52-55页 |
第四章 讨论 | 第55-57页 |
第五章 本文小结 | 第57-58页 |
附录 | 第58-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
在读期间(待)发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第67页 |