| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第10-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-24页 |
| 1.1 乳酸菌概述 | 第16页 |
| 1.2 多糖概述 | 第16-17页 |
| 1.3 乳酸菌胞外多糖 | 第17-20页 |
| 1.3.1 乳酸菌胞外多糖简介 | 第17页 |
| 1.3.2 不同乳酸菌对EPS产量的影响 | 第17-18页 |
| 1.3.3 EPS的提取、分离与纯化 | 第18-19页 |
| 1.3.4 EPS的分子量和单糖组成 | 第19页 |
| 1.3.5 乳酸菌EPS的生物学功能 | 第19-20页 |
| 1.4 多糖对特异性免疫应答的影响 | 第20-22页 |
| 1.4.1 特异性免疫 | 第20-21页 |
| 1.4.2 由T细胞介导的细胞免疫应答 | 第21页 |
| 1.4.3 由B细胞介导的体液免疫应答 | 第21页 |
| 1.4.4 多糖对机体特异性免疫应答的影响 | 第21-22页 |
| 1.5 本课题的研究内容和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 乳杆菌胞外多糖的筛选 | 第24-36页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.1 菌株 | 第24页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.5 溶液配制 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 乳酸菌菌株活化 | 第25页 |
| 2.2.2 菌种产糖量测定 | 第25-26页 |
| 2.2.3 硫酸-苯酚法测定多糖含量 | 第26页 |
| 2.2.4 粗EPS的提取 | 第26页 |
| 2.2.5 EPS刺激巨噬细胞RAW264.7和Ana-1增殖 | 第26-27页 |
| 2.2.6 EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞吞噬中性红 | 第27-28页 |
| 2.2.7 EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞释放NO | 第28页 |
| 2.3 实验结果 | 第28-33页 |
| 2.3.1 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第28-29页 |
| 2.3.2 乳酸菌胞外多糖含量测定结果 | 第29-31页 |
| 2.3.3 EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞的增殖结果 | 第31页 |
| 2.3.4 EPS刺激RAW264.7和Ana-1吞噬中性红的结果 | 第31-32页 |
| 2.3.5 EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞释放NO的结果 | 第32-33页 |
| 2.4 分析与讨论 | 第33-36页 |
| 第三章 三种乳杆菌胞外多糖的分离纯化 | 第36-49页 |
| 3.1 材料与设备 | 第36-37页 |
| 3.1.1 菌株和发酵条件 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 EPS的DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换纯化 | 第37页 |
| 3.2.2 EPS的Sepharose CL-6B分子筛纯化 | 第37页 |
| 3.2.3 紫外光谱扫描 | 第37页 |
| 3.2.4 红外光谱分析 | 第37-38页 |
| 3.2.5 多角度激光光散射仪测定多糖分子量 | 第38页 |
| 3.2.6 离子色谱测定单糖组成 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-47页 |
| 3.3.1 三种EPS的DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换纯化结果 | 第39-40页 |
| 3.3.2 三种EPS的Sepharose CL-6B分子筛纯化结果 | 第40-42页 |
| 3.3.3 三种EPS的紫外光谱扫描结果 | 第42页 |
| 3.3.4 三种EPS的红外扫描结果 | 第42-44页 |
| 3.3.5 三种EPS的分子量测定结果 | 第44-45页 |
| 3.3.6 三种EPS的单糖组成测定 | 第45-47页 |
| 3.4 分析与讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 三种乳杆菌胞外多糖对巨噬细胞免疫活性的影响 | 第49-67页 |
| 4.1 材料与设备 | 第49-50页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第49页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第49-50页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第50页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 4.2.1 巨噬细胞RAW264.7和Ana-1的培养 | 第50页 |
| 4.2.2 不同浓度EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞增殖 | 第50-51页 |
| 4.2.3 不同浓度EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞吞噬中性红 | 第51页 |
| 4.2.4 不同浓度EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞释放NO | 第51页 |
| 4.2.5 不同浓度EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞分泌TNF-α | 第51页 |
| 4.2.6 不同浓度EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞分泌IL-1β | 第51-52页 |
| 4.2.7 不同浓度EPS刺激RAW264.7和Ana-1细胞分泌IL-6 | 第52页 |
| 4.2.8 巨噬细胞表面标志免疫荧光标记和流式细胞仪检测 | 第52页 |
| 4.3 实验结果 | 第52-65页 |
| 4.3.1 不同浓度EPS对巨噬细胞增殖情况检测结果 | 第52-55页 |
| 4.3.2 不同浓度EPS刺激巨噬细胞吞噬中性红能力的检测结果 | 第55-57页 |
| 4.3.3 不同浓度EPS刺激巨噬细胞释放NO的结果 | 第57-59页 |
| 4.3.4 不同浓度EPS刺激巨噬细胞分泌TNF-α的结果 | 第59-61页 |
| 4.3.5 不同浓度EPS刺激巨噬细胞分泌IL-1β的结果 | 第61页 |
| 4.3.6 不同浓度EPS刺激巨噬细胞分泌IL-6的结果 | 第61-62页 |
| 4.3.7 SXJ30 EPS刺激巨噬细胞24 h后表面标志表达结果 | 第62-63页 |
| 4.3.8 SXJ30 EPS刺激巨噬细胞48h后表面标志表达结果 | 第63-64页 |
| 4.3.9 SXJ30 EPS刺激巨噬细胞72 h后表面标志表达结果 | 第64-65页 |
| 4.4 分析与讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 干酪乳杆菌SXJ30胞外多糖对树突状细胞免疫活性的影响 | 第67-76页 |
| 5.1 材料与设备 | 第67-68页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第67页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第67-68页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第68页 |
| 5.1.4 溶液配制 | 第68页 |
| 5.2 实验方法 | 第68-70页 |
| 5.2.1 小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)的分离培养 | 第68-69页 |
| 5.2.2 BMDCs表面标志免疫荧光标记和流式细胞仪检测 | 第69页 |
| 5.2.3 ELISA检测BMDC上清中TNF-α的含量 | 第69页 |
| 5.2.4 ELISA检测BMDC上清中IL-6的含量 | 第69页 |
| 5.2.5 ELISA检测BMDC上清中IL-10的含量 | 第69页 |
| 5.2.6 ELISA检测BMDC上清中IL-12的含量 | 第69-70页 |
| 5.3 实验结果 | 第70-74页 |
| 5.3.1 小鼠BMDCs培养结果 | 第70-71页 |
| 5.3.2 SXJ30 EPS刺激小鼠BMDCs表面标志表达结果 | 第71-72页 |
| 5.3.3 SXJ30 EPS刺激小鼠BMDCs后细胞因子的分泌 | 第72-74页 |
| 5.3.4 SXJ30 EPS刺激小鼠BMDCs后IL-10/IL-12的比值 | 第74页 |
| 5.4 分析与讨论 | 第74-76页 |
| 第六章 干酪乳杆菌SXJ30胞外多糖增强OVA特异性免疫应答的影响 | 第76-98页 |
| 6.1 材料与设备 | 第76-77页 |
| 6.1.1 实验动物 | 第76页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第76-77页 |
| 6.1.3 主要仪器设备 | 第77页 |
| 6.2 实验方法 | 第77-81页 |
| 6.2.1 小鼠分组及免疫程序 | 第77-78页 |
| 6.2.2 OVA特异性IgG抗体水平的检测 | 第78-79页 |
| 6.2.3 OVA特异性IgG亚类抗体水平的检测 | 第79页 |
| 6.2.4 小鼠脾脏T淋巴细胞增殖检测 | 第79-80页 |
| 6.2.5 脾脏T淋巴细胞上清中细胞因子的检测 | 第80页 |
| 6.2.6 小鼠脾脏T淋巴细胞胞内因子染色及流式细胞检测 | 第80-81页 |
| 6.2.7 小鼠脾脏树突状细胞表面染色及检测 | 第81页 |
| 6.3 实验结果 | 第81-96页 |
| 6.3.1 OVA特异性IgG抗体水平的检测结果 | 第81-82页 |
| 6.3.2 OVA特异性IgG抗体亚类IgG1,IgG2a相IgG2b水平的检测结果 | 第82-85页 |
| 6.3.3 SXJ30 EPS对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力检测结果 | 第85-86页 |
| 6.3.4 SXJ30 EPS对小鼠脾脏T淋巴细胞上清中细胞因子的检测结果 | 第86-87页 |
| 6.3.5 小鼠脾脏T淋巴细胞胞内因子检测结果 | 第87-90页 |
| 6.3.6 SXJ30 EPS刺激小鼠脾脏DCs表面标志表达的结果 | 第90-96页 |
| 6.4 分析与讨论 | 第96-98页 |
| 结论 | 第98-99页 |
| 创新点及展望 | 第99-100页 |
| 1 创新点 | 第99页 |
| 2 展望 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 硕士期间发表论文 | 第112页 |
