致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 前言 | 第12-26页 |
1.1 植物的抗逆性 | 第12-15页 |
1.1.1 植物与逆境胁迫 | 第12-14页 |
1.1.1.1 干旱胁迫对植物生长发育的影响 | 第13页 |
1.1.1.2 盐胁迫对植物生长发育的影响 | 第13页 |
1.1.1.3 重金属胁迫对植物生长发育的影响 | 第13-14页 |
1.1.2 植物对逆境胁迫的响应机制 | 第14-15页 |
1.1.2.1 渗透调节 | 第14页 |
1.1.2.2 抗氧化调节 | 第14-15页 |
1.2 肌醇在逆境中的作用 | 第15-20页 |
1.2.1 肌醇的发现 | 第15-16页 |
1.2.2 肌醇的代谢途径 | 第16-17页 |
1.2.3 肌醇在植物体内的生理作用 | 第17-19页 |
1.2.4 肌醇与植物逆境胁迫 | 第19-20页 |
1.3 肌醇合成酶基因(MIPS)研究现状 | 第20-21页 |
1.3.1 MIPS基因多样性 | 第20页 |
1.3.2 MIPS基因在植物抗逆中的作用 | 第20-21页 |
1.4 肌醇加氧酶基因(MIOX)研究现状 | 第21-23页 |
1.4.1 MIOX基因多样性 | 第21-22页 |
1.4.2 MIOX基因表达和在植物抗逆中的作用 | 第22-23页 |
1.5 杨树在抗逆研究中的应用 | 第23-26页 |
1.5.1 模式植物杨树转基因育种研究现状 | 第23-24页 |
1.5.2 农杆菌介导法的遗传转化技术 | 第24页 |
1.5.3 本研究的应用潜力 | 第24-26页 |
第2章 PdMIPS和Pd MIOX基因的获得 | 第26-39页 |
2.1 植物组织培养 | 第26-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第26页 |
2.1.2 培养条件 | 第26页 |
2.1.3 抗生素和生长激素配制 | 第26页 |
2.1.4 培养基配方 | 第26-27页 |
2.2 PdMIPS和PdMIOX基因扩增 | 第27-32页 |
2.2.1 杨树总RNA提取 | 第27-28页 |
2.2.2 反转录cDNA | 第28-29页 |
2.2.3 PdMIPS和PdMIOX基因克隆 | 第29-32页 |
2.2.3.1 PdMIPS基因克隆 | 第29页 |
2.2.3.2 PdMIOX基因克隆 | 第29-30页 |
2.2.3.3 序列测定 | 第30-32页 |
2.3 结果与分析 | 第32-39页 |
2.3.1 目的基因扩增电泳结果 | 第32-33页 |
2.3.2 PdMIPS和PdMIOX氨基酸序列相似性分析 | 第33-37页 |
2.3.3 PdMIPS和PdMIOX基因序列的系统进化分析 | 第37-39页 |
第3章 PdMIPS和Pd MIOX基因的表达模式分析 | 第39-45页 |
3.1 山新杨组培苗胁迫处理 | 第39-40页 |
3.1.1 不同胁迫处理条件 | 第39-40页 |
3.1.2 胁迫处理时间 | 第40页 |
3.2 RNA提取 | 第40-41页 |
3.3 实时定量PCR分析 | 第41-42页 |
3.3.1 反转录cDNA | 第41页 |
3.3.2 实时定量PCR引物设计 | 第41页 |
3.3.3 实时定量PCR | 第41-42页 |
3.4 结果 | 第42-45页 |
3.4.1 山新杨RNA的提取 | 第42页 |
3.4.2 实时定量PCR分析 | 第42-45页 |
第4章 PdMIPS亚细胞定位 | 第45-51页 |
4.1 亚细胞定位载体的构建 | 第45-49页 |
4.2 农杆菌侵染法侵染本生烟 | 第49页 |
4.3 荧光观察 | 第49-50页 |
4.4 结果 | 第50-51页 |
第5章 PdMIPS和Pd MIOX基因功能鉴定 | 第51-57页 |
5.1 PdMIPS和PdMIOX基因表达载体构建 | 第51-53页 |
5.2 转基因杨树的获得 | 第53-54页 |
5.3 转PdMIPS基因杨树耐盐性分析 | 第54-55页 |
5.4 结果 | 第55-57页 |
5.4.1 转基因载体酶切检测 | 第55页 |
5.4.2 转基因杨树苗抗性植株的检测 | 第55-56页 |
5.4.3 转PdMIPS山新杨组培苗抗性分析 | 第56-57页 |
第6章 转PdMIPS基因山新杨抗逆生理指标测定 | 第57-63页 |
6.1 杨树组培苗的移栽 | 第57页 |
6.2 杨树苗的胁迫处理 | 第57-58页 |
6.2.1 野生型山新杨的胁迫处理 | 第57-58页 |
6.2.2 转PdMIPS山新杨的胁迫处理 | 第58页 |
6.3 胁迫生理指标的测定 | 第58-60页 |
6.3.1 电导率测定 | 第58页 |
6.3.2 抗氧化酶活性测定 | 第58-59页 |
6.3.2.1 酶液提取 | 第58页 |
6.3.2.2 SOD测量 | 第58-59页 |
6.3.3 丙二醛含量测定 | 第59-60页 |
6.4 结果 | 第60-63页 |
6.4.1 转PdMIPS基因植株与野生型植株在胁迫下的表型变化 | 第60-61页 |
6.4.2 盐胁迫下生理指标测定 | 第61-63页 |
第7章 讨论 | 第63-65页 |
第8章 结论与主要创新点 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
作者简历 | 第76页 |