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杨树肌醇代谢关键酶基因的表达及功能研究

致谢第5-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-8页
第1章 前言第12-26页
    1.1 植物的抗逆性第12-15页
        1.1.1 植物与逆境胁迫第12-14页
            1.1.1.1 干旱胁迫对植物生长发育的影响第13页
            1.1.1.2 盐胁迫对植物生长发育的影响第13页
            1.1.1.3 重金属胁迫对植物生长发育的影响第13-14页
        1.1.2 植物对逆境胁迫的响应机制第14-15页
            1.1.2.1 渗透调节第14页
            1.1.2.2 抗氧化调节第14-15页
    1.2 肌醇在逆境中的作用第15-20页
        1.2.1 肌醇的发现第15-16页
        1.2.2 肌醇的代谢途径第16-17页
        1.2.3 肌醇在植物体内的生理作用第17-19页
        1.2.4 肌醇与植物逆境胁迫第19-20页
    1.3 肌醇合成酶基因(MIPS)研究现状第20-21页
        1.3.1 MIPS基因多样性第20页
        1.3.2 MIPS基因在植物抗逆中的作用第20-21页
    1.4 肌醇加氧酶基因(MIOX)研究现状第21-23页
        1.4.1 MIOX基因多样性第21-22页
        1.4.2 MIOX基因表达和在植物抗逆中的作用第22-23页
    1.5 杨树在抗逆研究中的应用第23-26页
        1.5.1 模式植物杨树转基因育种研究现状第23-24页
        1.5.2 农杆菌介导法的遗传转化技术第24页
        1.5.3 本研究的应用潜力第24-26页
第2章 PdMIPS和Pd MIOX基因的获得第26-39页
    2.1 植物组织培养第26-27页
        2.1.1 植物材料第26页
        2.1.2 培养条件第26页
        2.1.3 抗生素和生长激素配制第26页
        2.1.4 培养基配方第26-27页
    2.2 PdMIPS和PdMIOX基因扩增第27-32页
        2.2.1 杨树总RNA提取第27-28页
        2.2.2 反转录cDNA第28-29页
        2.2.3 PdMIPS和PdMIOX基因克隆第29-32页
            2.2.3.1 PdMIPS基因克隆第29页
            2.2.3.2 PdMIOX基因克隆第29-30页
            2.2.3.3 序列测定第30-32页
    2.3 结果与分析第32-39页
        2.3.1 目的基因扩增电泳结果第32-33页
        2.3.2 PdMIPS和PdMIOX氨基酸序列相似性分析第33-37页
        2.3.3 PdMIPS和PdMIOX基因序列的系统进化分析第37-39页
第3章 PdMIPS和Pd MIOX基因的表达模式分析第39-45页
    3.1 山新杨组培苗胁迫处理第39-40页
        3.1.1 不同胁迫处理条件第39-40页
        3.1.2 胁迫处理时间第40页
    3.2 RNA提取第40-41页
    3.3 实时定量PCR分析第41-42页
        3.3.1 反转录cDNA第41页
        3.3.2 实时定量PCR引物设计第41页
        3.3.3 实时定量PCR第41-42页
    3.4 结果第42-45页
        3.4.1 山新杨RNA的提取第42页
        3.4.2 实时定量PCR分析第42-45页
第4章 PdMIPS亚细胞定位第45-51页
    4.1 亚细胞定位载体的构建第45-49页
    4.2 农杆菌侵染法侵染本生烟第49页
    4.3 荧光观察第49-50页
    4.4 结果第50-51页
第5章 PdMIPS和Pd MIOX基因功能鉴定第51-57页
    5.1 PdMIPS和PdMIOX基因表达载体构建第51-53页
    5.2 转基因杨树的获得第53-54页
    5.3 转PdMIPS基因杨树耐盐性分析第54-55页
    5.4 结果第55-57页
        5.4.1 转基因载体酶切检测第55页
        5.4.2 转基因杨树苗抗性植株的检测第55-56页
        5.4.3 转PdMIPS山新杨组培苗抗性分析第56-57页
第6章 转PdMIPS基因山新杨抗逆生理指标测定第57-63页
    6.1 杨树组培苗的移栽第57页
    6.2 杨树苗的胁迫处理第57-58页
        6.2.1 野生型山新杨的胁迫处理第57-58页
        6.2.2 转PdMIPS山新杨的胁迫处理第58页
    6.3 胁迫生理指标的测定第58-60页
        6.3.1 电导率测定第58页
        6.3.2 抗氧化酶活性测定第58-59页
            6.3.2.1 酶液提取第58页
            6.3.2.2 SOD测量第58-59页
        6.3.3 丙二醛含量测定第59-60页
    6.4 结果第60-63页
        6.4.1 转PdMIPS基因植株与野生型植株在胁迫下的表型变化第60-61页
        6.4.2 盐胁迫下生理指标测定第61-63页
第7章 讨论第63-65页
第8章 结论与主要创新点第65-66页
参考文献第66-76页
作者简历第76页

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