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新型色酮小分子化合物靶向端粒全酶核心成分Dyskerin诱导胃癌细胞凋亡:设计合成及活性评价

中文摘要第7-9页
英文摘要第9-10页
1 前言第11-12页
2 实验材料第12-16页
    2.1 细胞株第12页
    2.2 药物与试剂第12-13页
    2.3 主要溶液配制第13-15页
    2.4 仪器与设备第15-16页
    2.5 数据处理及制图软件第16页
3 实验方法第16-27页
    3.1 细胞培养第16页
    3.2 MTT实验检测细胞的增殖第16-17页
    3.3 流式细胞术检测细胞周期第17-18页
    3.4 Annexin V/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡第18-19页
    3.5 JC-1 检测线粒体膜电位第19-20页
        3.5.1 流式细胞仪检测第19页
        3.5.2 荧光显微镜检测第19-20页
    3.6 蛋白免疫印迹法检测蛋白的表达第20-23页
        3.6.1 细胞总蛋白的提取第20页
        3.6.2 BCA蛋白定量第20-21页
        3.6.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第21页
        3.6.4 切胶和转膜第21-22页
        3.6.5 封闭和抗体孵育第22页
        3.6.6 显影第22-23页
    3.7 免疫荧光第23-24页
        3.7.1 样品的制备第23页
        3.7.2 细胞固定与通透第23页
        3.7.3 封闭与孵一抗第23页
        3.7.4 孵二抗与荧光染色第23-24页
    3.8 TRAP-PCR-ELISA法检测端粒酶活性第24-27页
        3.8.1 预处理和细胞样品的制备第24-25页
        3.8.2 端粒酶重复序列扩增(TRAP)第25页
        3.8.3 抗体交联及ELISA检测第25-27页
        3.8.4 数据分析与计算第27页
4 数据处理第27页
5 实验结果第27-46页
    5.1 小分子化合物的设计思路第27-29页
    5.2 小分子化合物8的合成第29-30页
    5.3 化合物的结构表征第30-34页
        5.3.1 代表性化合物NMR核磁共振谱图第31-34页
    5.4 细胞毒性试验第34-36页
        5.4.1 MTT试验第34-35页
        5.4.2 形态学观察第35-36页
    5.5 细胞凋亡试验第36-37页
    5.6 化合物8对SGC-7901 细胞线粒体膜电位的影响第37-39页
        5.6.1 流式细胞仪检测第38-39页
        5.6.2 荧光显微镜检测第39页
    5.7 化合物8对SGC-7901 细胞细胞周期的影响第39-41页
    5.8 化合物8诱导SGC-7901 细胞凋亡的作用机制研究第41-43页
    5.9 化合物8对目标靶蛋白Dyskerin的作用第43-45页
        5.9.1 化合物8对Dyskerin和h TERT的蛋白水平的影响第43-44页
        5.9.2 免疫荧光对目标靶蛋白Dyskerin进行定位第44-45页
    5.10 TRAP-PCR-ELISA法检测化合物8对端粒酶活性的抑制作用第45-46页
讨论第46-47页
结论第47页
参考文献第47-50页
个人简历第50-51页
致谢第51-52页
综述第52-60页
    参考文献第57-60页

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