| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表(ABBREVIATIONS) | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 鸡毒支原体 | 第13-15页 |
| 1.1.1 鸡毒支原体的生物学特征及致病机理 | 第13页 |
| 1.1.2 鸡毒支原体的危害及防治 | 第13-15页 |
| 1.2 miRNA研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 miRNA的基本特征 | 第15-17页 |
| 1.2.2 miRNA在炎症中的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.3 miR-101 在疾病中的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 实验材料和方法 | 第21-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 主要试剂及溶液的配制 | 第21-24页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.3 生物信息学分析相关软件及数据库 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-47页 |
| 2.2.1 MG-HS的培养、鉴定及毒力测定 | 第26-30页 |
| 2.2.2 gga-miR1013p在不同时期MG-HS感染鸡胚肺组织中的表达量分析 | 第30-34页 |
| 2.2.3 gga-miR1013p在MG-HS感染DF-1 细胞中的差异表达 | 第34页 |
| 2.2.4 靶基因的预测与分析 | 第34页 |
| 2.2.5 EZH23’UTR双荧光素酶报告基因载体的构建 | 第34-40页 |
| 2.2.6 双荧光素酶报告基因的检测 | 第40-43页 |
| 2.2.7 gga-miR1013p mimics转染DF-1 细胞 | 第43-45页 |
| 2.2.8 gga-miR1013p inhibitor转染DF-1 细胞 | 第45页 |
| 2.2.9 qPCR检测MG-HS感染与非感染DF-1 细胞中EZH2 的表达 | 第45页 |
| 2.2.10 qPCR检测不同时期感染与非感染鸡胚肺组织中EZH2 的相对表达 | 第45-46页 |
| 2.2.11 gga-miR-101-3p 对细胞增殖及细胞周期的影响 | 第46-47页 |
| 3 实验结果 | 第47-65页 |
| 3.1 MG-HS的培养 | 第47-51页 |
| 3.1.1 MG-HS的形态学鉴定 | 第47页 |
| 3.1.2 MG-HS活力的测定 | 第47-48页 |
| 3.1.3 MG-HS毒力的检测 | 第48-51页 |
| 3.2 MG感染鸡胚肺组织中gga-miR1013p的表达谱 | 第51-53页 |
| 3.2.1 鸡胚肺组织总RNA的提取 | 第51页 |
| 3.2.2 肺组织cDNA质量的检测 | 第51-52页 |
| 3.2.3 鸡胚肺组织cDNA gga-miR-101-3p的扩增 | 第52页 |
| 3.2.4 检测鸡胚肺组织中gga-miR-101-3p的相对表达量 | 第52-53页 |
| 3.3 gga-miR-101-3p在MG-HS感染与正常细胞中差异表达的验证 | 第53-54页 |
| 3.4 gga-miR-101-3p靶基因的预测及分析 | 第54-56页 |
| 3.5 EZH23’UTR双荧光素酶报告基因载体的构建 | 第56-59页 |
| 3.5.1 EZH23’UTR序列的扩增 | 第56-57页 |
| 3.5.2 T- EZH23’UTR重组质粒的双酶切鉴定 | 第57-58页 |
| 3.5.3 psiCHECKTM2 EZH23’UTR重组质粒的酶切鉴定 | 第58页 |
| 3.5.4 psiCHECKTM2 EZH23’UTR重组质粒的测序 | 第58-59页 |
| 3.6 双荧光素酶报告基因的检测 | 第59页 |
| 3.7 细胞转染gga-miR1013p mimics后EZH2 的表达量 | 第59-60页 |
| 3.8 细胞转染gga-miR1013p inhibitor后EZH2 的表达量 | 第60-61页 |
| 3.9 EZH2 在MG感染细胞与正常细胞中的表达量 | 第61-62页 |
| 3.10 EZH2 在不同时期鸡胚肺组织中的相对表达量 | 第62-63页 |
| 3.11 细胞增殖与细胞周期 | 第63-65页 |
| 3.11.1 细胞增殖 | 第63页 |
| 3.11.2 细胞周期 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| 5 小结 | 第69-70页 |
| 5.1 本研究所取得的结果 | 第69页 |
| 5.2 研究展望 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
