| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 1. 前言 | 第13-32页 |
| 1.1 植物应对高温胁迫的组学研究现状 | 第13-19页 |
| 1.1.1 植物对非生物胁迫的反应与组学的关系 | 第14-16页 |
| 1.1.2 高温胁迫下的植物蛋白质组 | 第16-19页 |
| 1.2 植物PPDK的研究进展 | 第19-32页 |
| 1.2.1 植物PPDK基因结构 | 第19-22页 |
| 1.2.2 植物PPDK基因与进化 | 第22-24页 |
| 1.2.3 植物PPDK蛋白结构与功能 | 第24-27页 |
| 1.2.4 植物PPDK蛋白活性的调控 | 第27-30页 |
| 1.2.5 植物PPDK蛋白在逆境中的作用 | 第30-32页 |
| 1.3 研究目的与意义 | 第32页 |
| 2. 材料与方法 | 第32-49页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.2 实验材料种植 | 第33页 |
| 2.3 温度处理和取样 | 第33-34页 |
| 2.4 灌浆动态分析 | 第34-35页 |
| 2.5 稻米碾米品质和外观品质分析 | 第35页 |
| 2.5.1 稻米碾米品质分析 | 第35页 |
| 2.5.2 稻米外观品质分析 | 第35页 |
| 2.6 PPDK酶活性测定 | 第35-38页 |
| 2.6.1 粗酶液的提取和除盐 | 第35-36页 |
| 2.6.2 酶活性的测定 | 第36-37页 |
| 2.6.3 蛋白质含量的测定 | 第37-38页 |
| 2.7 PPDK基因表达分析 | 第38-41页 |
| 2.7.1 总RNA提取和质量检测 | 第38-39页 |
| 2.7.2 cDNA合成和质量检测 | 第39-40页 |
| 2.7.3 Real-time qPCR | 第40-41页 |
| 2.8 PPDK蛋白表达分析 | 第41-46页 |
| 2.8.1 抗原设计 | 第41-42页 |
| 2.8.2 抗体制备 | 第42页 |
| 2.8.3 抗体纯化 | 第42-43页 |
| 2.8.4 间接ELISA检测PPDK磷酸化抗体效价 | 第43-44页 |
| 2.8.5 可溶性蛋白提取及定量 | 第44-45页 |
| 2.8.6 SDS-PAGE | 第45页 |
| 2.8.7 Western Blot | 第45-46页 |
| 2.9 PPDK磷酸化位点的LC-MS/MS质谱分析 | 第46-47页 |
| 2.10 PPDK异构体分析 | 第47-49页 |
| 2.10.1 双向电泳蛋白样品制备 | 第47页 |
| 2.10.2 双向电泳 | 第47-49页 |
| 2.10.3 Western Blot | 第49页 |
| 3. 结果与分析 | 第49-65页 |
| 3.1 高温下籽粒灌浆动态 | 第49-51页 |
| 3.2 高温对碾米品质和外观品质的影响 | 第51-53页 |
| 3.3 高温对PPDK酶活性的影响 | 第53-54页 |
| 3.4 高温对CYPPDK基因表达的影响 | 第54-58页 |
| 3.4.1 Real-time qPCR反应体系的优化 | 第54-57页 |
| 3.4.2 Real-time qPCR检测cyPPDK在高温下的变化情况 | 第57-58页 |
| 3.5 对PPDK抗体和PPDK-THR527 磷酸化抗体特异性评价 | 第58-62页 |
| 3.6 高温对PPDK蛋白和PPDK-THR527 磷酸化蛋白水平的影响 | 第62-64页 |
| 3.7 PPDK异构体的验证 | 第64-65页 |
| 4. 讨论 | 第65-73页 |
| 4.1 高温对水稻籽粒发育和品质的影响 | 第65-66页 |
| 4.1.1 高温对灌浆动态的影响 | 第65页 |
| 4.1.2 高温对稻米品质的影响 | 第65-66页 |
| 4.2 高温下PPDK与稻米品质形成的关系 | 第66-70页 |
| 4.2.1 高温下PPDK酶活性与稻米品质的关系 | 第66-67页 |
| 4.2.2 高温下PPDK参与稻米品质形成机理 | 第67-70页 |
| 4.3 高温下PPDK酶活性的调控特征 | 第70-71页 |
| 4.4 高温下PPDK酶活性调控与水稻籽粒细胞发育的关系 | 第71-72页 |
| 4.5 小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-84页 |
| 附录 | 第84-88页 |
| 附表 | 第84-87页 |
| 作者简历 | 第87页 |
| 在读期间发表文章 | 第87页 |
| 在读期间申请专利 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
