摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 脊椎动物骨骼肌生长发育 | 第12-14页 |
1.1.1 骨骼肌生长发生 | 第12-13页 |
1.1.2 骨骼肌发育相关重要基因 | 第13-14页 |
1.2 LncRNA | 第14-19页 |
1.2.1 LncRNA概述 | 第14页 |
1.2.2 LncRNA生物学功能 | 第14-15页 |
1.2.3 LncRNA与肌肉发育 | 第15-17页 |
1.2.4 LncRNA研究策略 | 第17-19页 |
1.3 研究目的及意义 | 第19-20页 |
第二章 绵羊lncRNA测序 | 第20-35页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 试验动物 | 第20页 |
2.1.2 试验样品 | 第20页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第20页 |
2.1.4 主要试剂与耗材 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-24页 |
2.2.1 提取总RNA | 第21页 |
2.2.2 检测RNA样品质量 | 第21-22页 |
2.2.3 构建cDNA测序文库 | 第22-23页 |
2.2.4 转录组高通量测序 | 第23-24页 |
2.2.5 测序数据处理 | 第24页 |
2.3 结果与分析 | 第24-33页 |
2.3.1 测序RNA样本的提取 | 第24-25页 |
2.3.2 测序RNA样本质检 | 第25页 |
2.3.3 测序数据预处理及质量评估 | 第25-27页 |
2.3.4 与参考序列比对 | 第27-29页 |
2.3.5 候选lncRNA筛选 | 第29-31页 |
2.3.6 候选lncRNA描述性统计 | 第31-33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
第三章 绵羊lncRNA转录组的鉴定与分析 | 第35-46页 |
3.1 LncRNA靶基因预测 | 第35页 |
3.2 靶基因功能注释 | 第35-37页 |
3.2.1 GO注释 | 第35-36页 |
3.2.2 KEGG注释 | 第36-37页 |
3.3 相同发育阶段不同品种间lncRNA差异表达分析 | 第37-42页 |
3.4 不同发育阶段不同品种间差异表达lncRNA | 第42-44页 |
3.5 讨论 | 第44-46页 |
第四章 LncRNA-TCONS_00102859对绵羊成肌细胞作用初步探究 | 第46-55页 |
4.1 实验材料 | 第46-47页 |
4.1.1 样品采集及原代绵羊成肌细胞 | 第46页 |
4.1.2 主要仪器和设备 | 第46页 |
4.1.3 主要试剂与耗材 | 第46页 |
4.1.4 慢病毒载体信息 | 第46-47页 |
4.1.5 所用引物序列 | 第47页 |
4.2 实验方法 | 第47-49页 |
4.2.1 原代绵羊成肌细胞培养 | 第47-48页 |
4.2.2 慢病毒转染绵羊成肌细胞 | 第48页 |
4.2.3 细胞总RNA提取、gDNA去除 | 第48页 |
4.2.4 反转录及荧光定量PCR | 第48-49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-53页 |
4.3.1 成肌细胞总RNA提取 | 第49-50页 |
4.3.2 不同日龄肌肉特异性表达 | 第50页 |
4.3.3 标准曲线及熔解曲线 | 第50-51页 |
4.3.4 慢病毒过表达载体效果验证 | 第51-52页 |
4.3.5 慢病毒过表达载体对成肌细胞相关基因表达的影响 | 第52-53页 |
4.4 讨论 | 第53-55页 |
第五章 结论 | 第55-56页 |
5.1 结论 | 第55页 |
5.2 展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简历 | 第66页 |