| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文縮略词 | 第10-11页 |
| 一 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 植物乙烯与果实成熟 | 第11-14页 |
| 1.2 ERF转录因子研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 ERF转录因子的结构与功能 | 第14-15页 |
| 1.2.2 ERF转录因子在果实成熟中的研究 | 第15-16页 |
| 1.3 外源基因瞬时表达研究进展 | 第16-18页 |
| 1.4 研究意义、内容及技术路线 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第18-19页 |
| 1.4.2 主要内容及技术路线 | 第19-20页 |
| 二 实验材料与实验方法 | 第20-40页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌种与质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 试剂 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-40页 |
| 2.2.1 PCR引物设计 | 第20-23页 |
| 2.2.2 果实总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.3 cDNA片段的克隆 | 第23-26页 |
| 2.2.4 基因的表达特性分析 | 第26-27页 |
| 2.2.5 超表达载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.2.6 RNAi载体的构建 | 第29-36页 |
| 2.2.7 甜瓜果实中的瞬时表达 | 第36-38页 |
| 2.2.8 基因的功能分析 | 第38-40页 |
| 三 结果与分析 | 第40-59页 |
| 3.1 cDNA的克隆 | 第40-43页 |
| 3.1.1 RNA的提取 | 第40页 |
| 3.1.2 RT-PCR | 第40-41页 |
| 3.1.3 重组子的筛选 | 第41-42页 |
| 3.1.4 菌落PCR | 第42-43页 |
| 3.2 基因的表达特性分析 | 第43-44页 |
| 3.2.1 基因在甜瓜不同组织中的表达特性分析 | 第43页 |
| 3.2.2 基因在果实不同发育阶段的表达特性分析 | 第43-44页 |
| 3.3 超表达载体构建 | 第44-47页 |
| 3.3.1 酶切 | 第44-45页 |
| 3.3.2 重组子的筛选 | 第45页 |
| 3.3.3 菌落PCR | 第45页 |
| 3.3.4 酶切鉴定 | 第45-47页 |
| 3.4 RNAi载体构建 | 第47-54页 |
| 3.4.1 RNA干扰片段的扩增 | 第47页 |
| 3.4.2 正向干扰片段重组质粒的筛选 | 第47-48页 |
| 3.4.3 正向干扰片段的菌落PCR检测 | 第48-49页 |
| 3.4.4 正向干扰片段的酶切鉴定 | 第49页 |
| 3.4.5 反向干扰片段重组质粒的筛选 | 第49-50页 |
| 3.4.6 反向干扰片段的酶切鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4.7 重组质粒pK-ERF(+/-)的Not I酶切 | 第51-52页 |
| 3.4.8 表达载体重组质粒的筛选 | 第52页 |
| 3.4.9 表达载体的菌体PCR鉴定 | 第52页 |
| 3.4.10 表达载体酶切鉴定 | 第52-54页 |
| 3.5 瞬时表达 | 第54-59页 |
| 3.5.1 农杆菌菌落PCR | 第54-55页 |
| 3.5.2 甜瓜的瞬时表达表型 | 第55-56页 |
| 3.5.3 基因的定量PCR检测结果 | 第56-57页 |
| 3.5.4 成熟相关基因的定量PCR检测 | 第57-59页 |
| 四 讨论与结论 | 第59-62页 |
| 4.1 讨论 | 第59-61页 |
| 4.2 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第67页 |