| 中文摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 缩略语 | 第17-19页 |
| 前言 | 第19-22页 |
| 研究现状、成果 | 第19-21页 |
| 研究目的、方法 | 第21-22页 |
| 一、建立HUVECs的HPC模型 | 第22-32页 |
| 研究目的 | 第22页 |
| 1.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 1.1.1 细胞 | 第22页 |
| 1.1.2 实验仪器 | 第22页 |
| 1.1.3 实验耗材与器材 | 第22-23页 |
| 1.1.4 药品与试剂 | 第23页 |
| 1.2 实验方法 | 第23-28页 |
| 1.2.1 主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| 1.2.2 HUVECs的培养 | 第25-27页 |
| 1.2.3 实验分组及HPC模型的建立 | 第27-28页 |
| 1.2.4 细胞存活率 | 第28页 |
| 1.2.5 数据处理 | 第28页 |
| 1.3 结果 | 第28-31页 |
| 1.3.1 不同细胞密度条件下HPC模型中HUVECs的存活率 | 第28-29页 |
| 1.3.2 不同预缺氧/复氧时间对HPC模型中HUVECs存活率的影响 | 第29-30页 |
| 1.3.3 不同缺氧液pH值对HPC模型中HUVECs存活率的影响 | 第30-31页 |
| 1.4 小结 | 第31-32页 |
| 二、HPC诱导HUVECs释放HPC-EMVs | 第32-38页 |
| 研究目的 | 第32页 |
| 2.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.1.1 细胞 | 第32页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第32页 |
| 2.1.3 实验耗材与器材 | 第32页 |
| 2.1.4 药品与试剂 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.2.1 HUVECs的培养 | 第32-33页 |
| 2.2.2 HPC诱导HUVECs释放HPC-EMVs | 第33-34页 |
| 2.2.3 HPC-EMVs的蛋白定量（BCA法） | 第34-35页 |
| 2.2.4 透射电镜观察HPC-EMVs的形态 | 第35页 |
| 2.2.5 数据处理 | 第35页 |
| 2.3 结果 | 第35-37页 |
| 2.3.1 HPC-EMVs蛋白定量 | 第35-36页 |
| 2.3.2 HPC-EMVs电镜检测 | 第36-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 三、建立H9c2细胞内钙超载损伤模型 | 第38-42页 |
| 研究目的 | 第38页 |
| 3.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.1.1 细胞 | 第38页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第38页 |
| 3.1.3 实验耗材与器材 | 第38页 |
| 3.1.4 药品与试剂 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-39页 |
| 3.2.1 实验分组 | 第38页 |
| 3.2.2 Fluo-3 AM荧光染料负载 | 第38-39页 |
| 3.2.3 激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca~(2+)浓度 | 第39页 |
| 3.2.4 数据处理 | 第39页 |
| 3.3 结果 | 第39-41页 |
| 3.3.1 细胞存活率 | 第39-40页 |
| 3.3.2 钙超载水平验证 | 第40-41页 |
| 3.4 小结 | 第41-42页 |
| 四、HPC-EMVs对正常H9c2细胞的影响 | 第42-46页 |
| 研究目的 | 第42页 |
| 4.1 实验材料 | 第42页 |
| 4.1.1 细胞 | 第42页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第42页 |
| 4.1.3 实验耗材与器材 | 第42页 |
| 4.1.4 药品与试剂 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 实验分组及给药方案 | 第42-43页 |
| 4.2.2 MTT法检测细胞存活率 | 第43页 |
| 4.2.3 数据处理 | 第43页 |
| 4.3 结果 | 第43-45页 |
| 细胞存活率 | 第43-45页 |
| 4.4 小结 | 第45-46页 |
| 五、HPC-EMVs对细胞内钙超载H9c2细胞的影响 | 第46-64页 |
| 研究目的 | 第46页 |
| 5.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 5.1.1 细胞 | 第46页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第46页 |
| 5.1.3 实验耗材与器材 | 第46页 |
| 5.1.4 药品与试剂 | 第46-47页 |
| 5.2 实验方法 | 第47-55页 |
| 5.2.1 主要溶液的配制 | 第47-48页 |
| 5.2.2 实验分组及给药方案 | 第48-51页 |
| 5.2.3 激光扫描共聚焦显微镜检测HPC-EMVs 60 组细胞内Ca~(2+)浓度 | 第51页 |
| 5.2.4 MTT法检测细胞存活率 | 第51页 |
| 5.2.5 细胞培养液中LDH活性测定 | 第51页 |
| 5.2.6 Hoechst 33258 染色 | 第51页 |
| 5.2.7 Caspase 3 活性检测 | 第51-53页 |
| 5.2.8 Western blot检测 | 第53-55页 |
| 5.2.9 数据处理 | 第55页 |
| 5.3 结果 | 第55-63页 |
| 5.3.1 HPC-EMVs 60 组细胞内Ca~(2+)浓度 | 第55-56页 |
| 5.3.2 细胞存活率 | 第56-58页 |
| 5.3.3 细胞培养液中LDH活性 | 第58-59页 |
| 5.3.4 Hoechst33258染色 | 第59-60页 |
| 5.3.5 Caspase 3 活性检测 | 第60-62页 |
| 5.3.6 Bcl-2/Bax蛋白表达变化 | 第62-63页 |
| 5.4 小结 | 第63-64页 |
| 讨论 | 第64-72页 |
| 1 HPC模型诱导HUVECs体外产生HPC-EMVs | 第64-67页 |
| 1.1 预处理得到的MVs在心血管疾病中的重要作用 | 第64页 |
| 1.2 HPC模型的选择与建立 | 第64-65页 |
| 1.3 HPC-EMVs的分离与保存 | 第65-66页 |
| 1.4 HPC-EMVs的形态学鉴定与定量 | 第66-67页 |
| 2 H9c2细胞内钙超载模型的建立 | 第67-69页 |
| 2.1 Ca~(2+)在I/R和IPC中的作用 | 第67-68页 |
| 2.2 Ionomycin体外诱导H9c2心肌细胞内钙超载 | 第68页 |
| 2.3 Ca~(2+)在细胞凋亡中的作用 | 第68-69页 |
| 3 HPC-EMVs对正常与细胞内钙超载H9c2的作用 | 第69-70页 |
| 3.1 MVs对心血管系统的作用 | 第69-70页 |
| 3.2 MVs对细胞内钙超载的影响 | 第70页 |
| 4 MVs的临床应用前景 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第81-82页 |
| 综述 心肌缺血预适应的心脏保护机制和临床上与MVs的关系 | 第82-92页 |
| 综述参考文献 | 第87-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 个人简历 | 第93页 |
