中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
前言 | 第12-14页 |
研究现状、成果 | 第12-13页 |
研究目的、方法 | 第13-14页 |
1 对象和方法 | 第14-30页 |
1.1 实验材料 | 第14-15页 |
1.1.1 细胞系 | 第14页 |
1.1.2 质粒(本实验室构建) | 第14页 |
1.1.3 常规试剂和耗材 | 第14-15页 |
1.1.4 各实验所需主要抗体 | 第15页 |
1.2 实验试剂的配制 | 第15-20页 |
1.2.1 细胞培养液 | 第15-16页 |
1.2.2 质粒构建和提取相关试剂 | 第16页 |
1.2.3 293T细胞钙法转染制备慢病毒相关试剂 | 第16-17页 |
1.2.4 Western Blot相关试剂 | 第17-19页 |
1.2.5 免疫荧光实验相关试剂 | 第19-20页 |
1.2.6 荧光流式细胞术相关试剂 | 第20页 |
1.2.7 细胞冻存液 | 第20页 |
1.3 主要实验仪器 | 第20-21页 |
1.4 主要实验方法 | 第21-30页 |
1.4.1 细胞培养 | 第21-22页 |
1.4.2 质粒的构建及鉴定方法 | 第22-24页 |
1.4.3 质粒提取 | 第24-25页 |
1.4.4 钙法转染制备慢病毒 | 第25-26页 |
1.4.5 慢病毒感染 | 第26页 |
1.4.6 细胞蛋白提取 | 第26页 |
1.4.7 Western Blot | 第26-27页 |
1.4.8 细胞免疫荧光 | 第27-28页 |
1.4.9 活细胞成像 | 第28-30页 |
2 结果 | 第30-47页 |
2.1 肿瘤细胞中,EPSH和E受体的表达和定位 | 第30-31页 |
2.1.1 人乳腺癌细胞系、前列腺癌细胞系、卵巢癌和宫颈癌细胞系中EPSH和E受体的基础表达水平 | 第30页 |
2.1.2 EPSH与E受体在HeLa细胞内的定位情况 | 第30-31页 |
2.2 HeLa细胞中EPSH参与调控E受体的内吞转运 | 第31-37页 |
2.2.1 内源EPSH和E受体在EGF刺激或射线照射后内吞研究 | 第31-34页 |
2.2.2 EGF刺激或射线照射后,过表达EPSH与内源E受体内吞转运研究 | 第34-36页 |
2.2.3 活细胞状态下EPSH对E受体的内吞转运调控研究 | 第36-37页 |
2.3 HeLa细胞中EPSH参与介导E受体内吞转运途径研究 | 第37-39页 |
2.4 EPSH沉默促进E受体的内吞降解 | 第39-41页 |
2.5 ATP酶活性是EPSH调控E受体内吞转运的结构基础 | 第41-47页 |
2.5.1 失活体和活化性的细胞定位 | 第42页 |
2.5.2 EPSH的不同突变体对E受体内吞转运的影响。 | 第42-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第54-55页 |
综述 泛素化在细胞膜受体内吞和胞内分选中的作用 | 第55-71页 |
综述参考文献 | 第64-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
个人简历 | 第72页 |