中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一部分 绪论 | 第8-13页 |
1. 研究背景 | 第8-13页 |
1.1 局麻药与神经毒性 | 第8-9页 |
1.2 体外急性毒性药物安全性评价模型 | 第9-10页 |
1.3 可能的分子作用机制 | 第10-12页 |
1.4 研究思路 | 第12页 |
1.5 研究意义 | 第12-13页 |
第二部分 右美托咪定对利多卡因诱导产生的PC12细胞毒性的影响 | 第13-28页 |
2.材料与方法 | 第14-17页 |
2.1 药品与试剂 | 第14页 |
2.2 使用仪器 | 第14-15页 |
2.3 细胞培养与药物预处理 | 第15-16页 |
2.4 细胞增殖水平检测 | 第16页 |
2.5 蛋白提取和western blotting检测 | 第16-17页 |
2.6 细胞凋亡水平检测 | 第17页 |
2.7 数据统计分析 | 第17页 |
3. 实验结果 | 第17-22页 |
3.1 右美托咪定对PC12细胞的安全用药浓度范围探索 | 第17-19页 |
3.2 右美托咪定对利多卡因预处理后PC12细胞活力的影响 | 第19-20页 |
3.3 右美托咪定对利多卡因预处理后PC12细胞凋亡水平的影响 | 第20-21页 |
3.4 右美托咪定和利多卡因共同作用下对MAPK信号通路相关蛋白的影响 | 第21-22页 |
4. 讨论 | 第22-28页 |
第三部分 miR-let-7b在右美托咪定减缓利多卡因诱导PC12细胞毒性效应的作用 | 第28-60页 |
2. 材料与方法 | 第29-38页 |
2.1 药品与试剂 | 第29页 |
2.2 使用仪器 | 第29-30页 |
2.3 microRNA预测 | 第30页 |
2.4 质粒构建 | 第30-31页 |
2.5 细胞培养与药物处理 | 第31页 |
2.6 双荧光素酶报告基因检测 | 第31-32页 |
2.7 RNA抽提和Real-time RT-PCR检测 | 第32-33页 |
2.8 蛋白提取和western blotting检测 | 第33-34页 |
2.9 PC12细胞平板克隆形成实验 | 第34-35页 |
2.10 流式细胞术Edu染色增殖检测 | 第35页 |
2.11 Hoechest33258染色检测细胞增殖 | 第35-36页 |
2.12 流式细胞术细胞凋亡检测 | 第36-37页 |
2.13 细胞迁移与细胞侵袭能力检测 | 第37-38页 |
2.14 流式细胞术细胞周期检测 | 第38页 |
2.15 数据统计分析 | 第38页 |
3. 实验结果 | 第38-51页 |
3.1 miR-let-7b及COL3A1在利多卡因和右美托咪定联合给药处理的PC12中的表达情况 | 第38-40页 |
3.2 验证miR-let-7b对COL3A1的调控作用 | 第40-42页 |
3.3 右美托咪定对利多卡因诱导的PC12细胞毒性的保护作用的分子机制研究 | 第42-51页 |
4. 讨论 | 第51-60页 |
第四部分 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
在学期间发表论文 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |