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病原物诱导启动子GST1响应柑橘溃疡病诱导的功能结构域研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第10-24页
    1.1 柑橘生产概况第10页
    1.2 柑橘常见病害第10-14页
        1.2.1 柑橘溃疡病简介第11-12页
        1.2.2 柑橘溃疡病的防治措施第12-14页
    1.3 抗病基因工程研究进展第14-15页
    1.4 高等植物启动子的研究第15-21页
        1.4.1 启动子的结构特征第15页
        1.4.2 植物启动子的类型第15-17页
        1.4.3 启动子的克隆方法第17-18页
        1.4.4 启动子功能的研究方法第18-19页
        1.4.5 顺式作用元件的研究方法第19-21页
    1.5 病原物诱导启动子研究与利用概况第21-24页
        1.5.1 病原物相关顺式作用元件的研究进展第21-22页
        1.5.2 柑橘病原物诱导启动子研究概况第22-24页
第二章 引言第24-26页
    2.1 立题依据第24-25页
    2.2 技术路线第25-26页
第三章 材料和方法第26-44页
    3.1 材料第26-29页
        3.1.1 植物材料第26页
        3.1.2 载体与菌株第26页
        3.1.3 主要仪器第26页
        3.1.4 试剂第26-27页
        3.1.5 常用溶液及配方第27-28页
        3.1.6 常用培养基第28-29页
    3.2 方法第29-44页
        3.2.1 表达载体的构建第29-33页
        3.2.2 遗传转化锦橙上胚轴第33页
        3.2.3 转基因植株的绿色荧光检测第33-34页
        3.2.4 转基因植株的PCR鉴定第34-35页
        3.2.5 转基因植株的Southern blot分析第35-39页
        3.2.6 创伤诱导第39页
        3.2.7 溃疡病菌的侵染第39页
        3.2.8 RNA的提取以及RT-PCR的分析第39-41页
        3.2.9 GUS酶活力测定第41-44页
第四章 结果与分析第44-58页
    4.1 GST1启动子生物信息学分析第44-45页
    4.2 不同缺失型病原诱导启动子与GUS基因融合载体的构建第45-49页
    4.3 农杆菌介导锦橙上胚轴的遗传转化第49-52页
        4.3.1 GFP筛选转基因植株第49-50页
        4.3.2 转基因植株的PCR鉴定第50-51页
        4.3.3 转基因植株的Southern杂交分析第51-52页
    4.4 不同缺失型启动子的伤诱导特异性表达分析第52-55页
        4.4.1 不同缺失型启动子伤诱导激活GUS基因表达的定量PCR分析第52-54页
        4.4.2 不同缺失型启动子伤诱导激活GUS酶活测定第54-55页
    4.5 不同缺失型启动子受溃疡病病原物诱导的表达分析第55-58页
        4.5.1 不同缺失型启动子受溃疡病诱导激活GUS表达的定量PCR分析第55-56页
        4.5.2 不同缺失型启动子受溃疡病导激活GUS酶活测定第56-58页
第五章 讨论第58-62页
第六章 结论第62-64页
第七章 创新性第64-66页
参考文献第66-74页
附录 缩略词表第74-76页
致谢第76-78页
发表文章与参与项目第78页

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