摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
1.1 柑橘生产概况 | 第10页 |
1.2 柑橘常见病害 | 第10-14页 |
1.2.1 柑橘溃疡病简介 | 第11-12页 |
1.2.2 柑橘溃疡病的防治措施 | 第12-14页 |
1.3 抗病基因工程研究进展 | 第14-15页 |
1.4 高等植物启动子的研究 | 第15-21页 |
1.4.1 启动子的结构特征 | 第15页 |
1.4.2 植物启动子的类型 | 第15-17页 |
1.4.3 启动子的克隆方法 | 第17-18页 |
1.4.4 启动子功能的研究方法 | 第18-19页 |
1.4.5 顺式作用元件的研究方法 | 第19-21页 |
1.5 病原物诱导启动子研究与利用概况 | 第21-24页 |
1.5.1 病原物相关顺式作用元件的研究进展 | 第21-22页 |
1.5.2 柑橘病原物诱导启动子研究概况 | 第22-24页 |
第二章 引言 | 第24-26页 |
2.1 立题依据 | 第24-25页 |
2.2 技术路线 | 第25-26页 |
第三章 材料和方法 | 第26-44页 |
3.1 材料 | 第26-29页 |
3.1.1 植物材料 | 第26页 |
3.1.2 载体与菌株 | 第26页 |
3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
3.1.4 试剂 | 第26-27页 |
3.1.5 常用溶液及配方 | 第27-28页 |
3.1.6 常用培养基 | 第28-29页 |
3.2 方法 | 第29-44页 |
3.2.1 表达载体的构建 | 第29-33页 |
3.2.2 遗传转化锦橙上胚轴 | 第33页 |
3.2.3 转基因植株的绿色荧光检测 | 第33-34页 |
3.2.4 转基因植株的PCR鉴定 | 第34-35页 |
3.2.5 转基因植株的Southern blot分析 | 第35-39页 |
3.2.6 创伤诱导 | 第39页 |
3.2.7 溃疡病菌的侵染 | 第39页 |
3.2.8 RNA的提取以及RT-PCR的分析 | 第39-41页 |
3.2.9 GUS酶活力测定 | 第41-44页 |
第四章 结果与分析 | 第44-58页 |
4.1 GST1启动子生物信息学分析 | 第44-45页 |
4.2 不同缺失型病原诱导启动子与GUS基因融合载体的构建 | 第45-49页 |
4.3 农杆菌介导锦橙上胚轴的遗传转化 | 第49-52页 |
4.3.1 GFP筛选转基因植株 | 第49-50页 |
4.3.2 转基因植株的PCR鉴定 | 第50-51页 |
4.3.3 转基因植株的Southern杂交分析 | 第51-52页 |
4.4 不同缺失型启动子的伤诱导特异性表达分析 | 第52-55页 |
4.4.1 不同缺失型启动子伤诱导激活GUS基因表达的定量PCR分析 | 第52-54页 |
4.4.2 不同缺失型启动子伤诱导激活GUS酶活测定 | 第54-55页 |
4.5 不同缺失型启动子受溃疡病病原物诱导的表达分析 | 第55-58页 |
4.5.1 不同缺失型启动子受溃疡病诱导激活GUS表达的定量PCR分析 | 第55-56页 |
4.5.2 不同缺失型启动子受溃疡病导激活GUS酶活测定 | 第56-58页 |
第五章 讨论 | 第58-62页 |
第六章 结论 | 第62-64页 |
第七章 创新性 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
附录 缩略词表 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-78页 |
发表文章与参与项目 | 第78页 |